實驗二pcr擴增乙肝病毒基因及rapd(編輯修改稿)
2024-11-15 16:03 本頁面
【文章內容簡介】 間短 、 特異性高 、 靈敏度高 、實用性強； 廣泛的應用于醫(yī)學診斷 、 分子生物學 、分子克隆 、 基因診斷 、 法醫(yī)學 、 考古學等各個領域 。 ? PCR擴增 DNA片段的原理 PCR是在模板 DNA、 引物和四種脫氧核苷酸等存在的情況下 ， DNA聚合酶依賴的酶促合成反應 ， 整個擴增過程分三步： ① 變性 ：加熱 ， 模板 DNA形成兩條單鏈 ② 退火 ：降溫 ， 模板單鏈 DNA與引物配對結合 ③ 延伸 ：在 DNA聚合酶及鎂離子等存在的條件下 ， 引物 339。端向前延伸 ， 合成與模板配對的新鏈 上述三步為一個循環(huán)，經(jīng)過一個循環(huán) DNA量增加一倍。新合成的鏈又可以成為新一輪循環(huán)的模板，經(jīng)過 2530個循環(huán)后目的 DNA就可以擴增 106~109 倍。 通過循環(huán)可以提高 PCR的特異性。 ? PCR反應體系的組成及功能 PCR的完成是在一個 EP管中完成 ， 一個完整的 PCR反應體系應包括以下成分： ? 引物 ：是預擴增 DNA片段兩端的已知序列 ， 是保證 PCR特異性的關鍵因素 ， PCR引物設計的原
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