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8味單藥提取液體外抑制未孢子化卵囊成熟的研究設計與記錄(編輯修改稿)

2025-07-04 14:44 本頁面
 

【文章內容簡介】 實驗 目的 從感染了柔嫩艾美爾球蟲的 雞 的 糞便中回收 球蟲 卵囊 實驗材料 洗潔精 ( 5ml ) 生產廠家:廣州立白企業(yè)集團有限公司 批號: 70140215K70118 乙酸 (5ml)生產廠家:太原溶劑廠 批號: HG310957食鹽生產廠家:山西省鹽業(yè)公司 批號: GF61080210009涼開水 (1桶 ) : 天平 (HCTP12A20),玻璃棒( 4個)、 18目篩( 1mm)、 80目篩(孔徑約 )、200目篩(孔徑約 )、離心機 3個( DD5M aida)( Anke LXJIIB)( LXJⅡ)、燒杯 15個、 15ml離心管 6支、血球計數板 1個 、麥卡瑪斯特計數板 1個、溫箱 (XMTD MC12810132)、顯微鏡( XSP24N )、滴管 3個、載玻片若干、蓋玻片若干。 配方:含 %的洗潔精和 %乙酸、滅菌水; 配制過程:取一個 500ml的燒杯按順序加入 (涼白開水) + +乙酸。 3 實驗方法和步驟 : 將新鮮糞便先用少量生理鹽水浸濕,并攪開糞塊,然后用 10倍的生理鹽水浸泡并不時地攪拌,直到糞便中的卵囊大部分溢出到水中(大約 1 小時)。先用60目篩過濾,后用 200目篩過濾糞便,過濾三次。第一次過濾后剩余糞便用 5倍于糞便的生理鹽水稀釋并攪勻后再過濾,第二次過濾后剩余糞便用 3倍于糞便的生理鹽水稀釋并攪勻后再過濾。取盲腸內容物:用剪刀將盲腸縱向剪開,刮取盲腸內容物置于離心管中。將盲腸置于盛有適量生理鹽水的研缽中輕研磨、沖洗(重復三次)。并將每次的洗液倒入離心管中。 糞便濾液或盲腸內容物懸浮液的處理: 將上述得到的糞便濾液或盲腸內容物懸浮液放到離心管里,加生理鹽水到離心管的 3/4,并加入 %的洗潔精。 20xxr/min離心 10分鐘,檢上清,無球蟲 時棄上清(將上清倒入另外高壓過的離心管里進行檢測);于沉渣中加少量生理鹽水并將沉渣攪開,再加生理鹽水到離心管的 3/4,離心,重復洗 3次。 球蟲卵囊的漂?。?向上述離心所得的沉淀中加 10 倍量飽和鹽水(比重 )(先加少許,混勻后再加其余的), 1500 轉 /分離心 5 分鐘,收集上清液;再重復漂浮 1~ 2 次,檢查沉渣,當沉渣中沒有或僅有少量球蟲時,棄掉沉渣。最后把離心所得飽和食鹽水混合。 : 將上述上清液用生理鹽水 7倍稀釋, 2500r/min離心 10分鐘,檢上清,無球蟲時棄上清,收集沉淀物(卵 囊)。 第 6 頁 共 10 頁 卵囊計數 每 ml濾液卵囊數計數方法 ①稱取 10ml濾液。 ②取 50ml飽和鹽水,加入 10ml濾液中。 ③混勻,用吸管吸取少量混合液體,加入計數室內(液體要充滿計數室但不要溢出),放于顯微鏡載物臺上,靜置 1~ 2分鐘。 ④在低倍鏡下( 10 10)數完兩個計數室內見到的全部蟲卵,取平均值乘以 40,即為每ml濾液中的蟲
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