大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)及發(fā)酵技術(shù)(編輯修改稿)
2025-06-19 23:56 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 P供細(xì)胞的能量 ? 用于測(cè)量和跟蹤細(xì)胞消耗氧的速率 . O xyge n C on s u m p t i on R at e of C e l l s i nC u l t u r e00 . 10 . 20 . 310 15 20 25 30 35 40 45T i m e (m i n )O2:mmol/L溶氧 ? 在細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵過(guò)程中， O2 通常是限制營(yíng)養(yǎng)成分，是因?yàn)樗谌芤褐械腿芙舛?: – 通常關(guān)心對(duì)培養(yǎng)液中 % O2, 也就是 “ 溶氧 ” 值 (DO): – 理論 DO: 80% +/ 5 % (哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) ) 90 % DO2 (細(xì)菌培養(yǎng)） – O2 也可能通過(guò)自由基形成對(duì)細(xì)胞造成傷害 ,在低 pO2 水平，細(xì)胞的活性通常越高 (O2 值必須維持在最低的水平 ) – 然而 , 原代細(xì)胞可能在低 O2 條件下繁殖受延遲 因而，維持正確的 O2的平衡，對(duì)保證所有細(xì)胞正確生長(zhǎng)都非常重要 ,一般 3050% 葡萄糖 ? 葡萄糖兩個(gè)主要的功能 : – 細(xì)胞的主要的能量物質(zhì) – 主要的細(xì)胞碳源 ? 葡萄糖和谷氨酰胺是相互補(bǔ)充的 : – 產(chǎn)生其他代謝物 (例如 : 天冬氨酸 ) – 提供能量 – 在所有細(xì)胞中通過(guò)糖酵解途徑轉(zhuǎn)變成丙酮 . ? 葡萄糖的代謝隨細(xì)胞生長(zhǎng)而增加 . – 葡萄糖通常是細(xì)胞生長(zhǎng)的限制因素 G l u c amp。 C e l l D e n s i t y vs T i m e i n B at c h C u l t u r e01234560 15 30 45 60 75 80 85 90 T i m e ( m i n )Gluc (mmol)012Cell Count (cells/ml)葡萄糖 ? 監(jiān)控細(xì)胞反應(yīng)器和發(fā)酵罐中的葡萄糖水平 : – 保證細(xì)胞正常生長(zhǎng)所需能量 . ? 開(kāi)發(fā)延長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)周期的標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)料策略 . ? 計(jì)算葡萄糖消耗速率和決定批次培養(yǎng)最佳的起始濃度 . 乳酸 = 氧化問(wèn)題 ? 在培養(yǎng)過(guò)程中，大多數(shù)乳酸來(lái)自于葡萄糖代謝，但也有一部分來(lái)自于谷氨酰胺代謝 . – 基于高細(xì)胞
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