a連接,感受態(tài)細胞制備,轉(zhuǎn)化及篩選(編輯修改稿)
2025-06-16 23:52 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 1. 感受態(tài)細胞制備原理 ： 1） 感受態(tài)細胞的膜已經(jīng)很脆 ， 應(yīng)該超低溫保存 。 如果反復(fù)凍融會使細胞活力受影響 ， 而且細胞膜的變化可能復(fù)原 ， 由感受態(tài)細胞狀態(tài)回轉(zhuǎn)到普通細胞狀態(tài) ， 失去接受外源 DNA的能力 。 2） 無菌操作 。 在火焰附近操作 ， 火焰附近是無菌區(qū) 。 各種器具均需消毒 。 無菌操作的注意事項 ? 槍頭、 EP管、試管、平皿等，各種試劑都是經(jīng)過 高壓滅菌 后在超凈臺中專用的，但加樣器需要自帶。 ? 取飯盒中的槍頭、 EP管時，都要用在酒精燈上燒灼后的鑷子夾取 。 ? 燒瓶、試管、玻璃棒等玻璃器具，使用前和蓋蓋兒前要在 酒精燈上燒灼一下瓶口 。 ? 塑料制品，如槍頭和 EP管不能用酒精燈燒灼。 ? 手臂盡量 不要在敞開的容器上方移動 ，以免落入雜菌。 ? 超凈臺事先要打開 紫外燈照射至少 20 min進行消毒，使用時要打開風(fēng)機。 ? 操作前要用 酒精擦拭手臂或帶手套 。 （超凈臺內(nèi)操作）
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