【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 級(jí)及以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室的鏡檢能力進(jìn)行考核評(píng)估；并對(duì)其檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行抽樣復(fù)核。 六、重點(diǎn)地區(qū)的監(jiān)測(cè)與專項(xiàng)調(diào)查 中國(guó)疾 病預(yù)防控制中心根據(jù)全國(guó)瘧疾疫情形勢(shì)和消除瘧疾工作需求，在不同類型瘧疾流行區(qū)選擇 6～8個(gè)縣，重點(diǎn)加強(qiáng)主動(dòng)病例偵查，開(kāi)展人群抗體水平、帶蟲率調(diào)查，媒介種群、密度、抗性和瘧原蟲抗性調(diào)查，以及消除瘧疾措施評(píng)估和研究。具體方案另行制訂。 各?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r，選擇部分重點(diǎn)地區(qū)，加強(qiáng)消除階段的瘧疾監(jiān)測(cè)工作。 七、質(zhì)量控制 （一）人員培訓(xùn) 按照分級(jí)培訓(xùn)的原則，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心每年組織對(duì)省級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)的瘧疾防治專業(yè)人員進(jìn)行至少 1次師資培訓(xùn)；省級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)每 2年對(duì)地市級(jí)和縣級(jí)瘧疾防治專業(yè)人員輪 訓(xùn) 1次；縣級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)結(jié)合常規(guī)例會(huì)，對(duì)鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院防保人員及其參與瘧疾防治工作的村醫(yī)每年至少培訓(xùn) 1次?？h級(jí)瘧疾防治專業(yè)人員 3年內(nèi)接受培訓(xùn)的比率不低于 95%。 各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)要高度重視瘧疾專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)工作，將培訓(xùn)工作納入每年的工作計(jì)劃，針對(duì)不同對(duì)象編制培訓(xùn)教材，有針對(duì)性地開(kāi)展培訓(xùn)工作。鼓勵(lì)和提倡有條件的地區(qū)，通過(guò)組織開(kāi)展瘧疾防治技術(shù)練兵和鏡檢技術(shù)競(jìng)賽等多種形式，不斷改進(jìn)培訓(xùn)工作質(zhì)量，切實(shí)提高瘧疾防治專業(yè)人員的業(yè)務(wù)能力和技術(shù)水平。 （二）鏡檢復(fù)核 1. 縣級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)定期對(duì)開(kāi)展血檢醫(yī)療機(jī)構(gòu)的血涂 片鏡檢質(zhì)量進(jìn)行抽查復(fù)核。要求每年抽取所有陽(yáng)性血涂片和不少于 10%的陰性血涂片，進(jìn)行厚、薄血膜制作、染色和鏡檢質(zhì)量復(fù)核。 2. 地市級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)每年抽取每縣的所有陽(yáng)性血涂片和不少于 3%的陰性血涂片進(jìn)行復(fù)核。 3．省級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)每年對(duì)每年抽取每縣的所有陽(yáng)性血涂片和不少于 1%的陰性血涂片進(jìn)行復(fù)核。 4．中國(guó)疾病預(yù)防控制中心每年組織 1次對(duì)各省（自治區(qū)、直轄市）血涂片鏡檢質(zhì)量的抽查復(fù)核。 （三）檢查督導(dǎo) 縣級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)對(duì)承擔(dān)消除瘧疾工作的鄉(xiāng)鎮(zhèn)每年至少開(kāi)展 1次工作質(zhì)量抽查；省級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu) 負(fù)責(zé)組織對(duì)各縣每年至少進(jìn)行一次工作督導(dǎo)；中國(guó)疾病預(yù)防控制中心對(duì)每個(gè)瘧疾流行省每年至少進(jìn)行 1次工作督導(dǎo)。各級(jí)消除瘧疾工作相關(guān)數(shù)據(jù)資料的抽查合格率不低于 95%。 （四）資料管理 各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)建立健全資料管理制度，確定專人承擔(dān)資料管理工作。消除瘧疾工作的各類資料收集完整、真實(shí)、記錄清晰、準(zhǔn)確，按要求及時(shí)上報(bào)。各項(xiàng)工作完成后及時(shí)整理，按檔案管理要求立卷歸檔，妥善保管。電子文檔形式的資料信息應(yīng)及時(shí)備份，確保數(shù)據(jù)安全。 附件 1 的基因檢測(cè)確認(rèn)行鏡檢復(fù)核， 查技術(shù)規(guī)范 附表 1. 瘧疾病例就診登記表 、臨床診斷病例和不明原因發(fā)熱病人瘧原蟲血檢登記表 （ IRS）記錄表 附件 1 抗瘧藥使用原則和用藥方案 根據(jù)《中華人民共和國(guó)傳染病防 治法》、《中華人民共和國(guó)藥品管理法》和瘧疾防治工作的實(shí)際需要，參照世界衛(wèi)生組織關(guān)于抗瘧藥使用的有關(guān)政策，制訂本方案。 一 、抗瘧藥使用原則 抗瘧藥的使用應(yīng)遵循安全、有效、合理和規(guī)范的原則。根據(jù)流行地區(qū)的瘧原蟲蟲種及其對(duì)抗瘧藥物的敏感性和患者的臨床表現(xiàn)，合理選擇藥物，嚴(yán)格掌握劑量、療程和給藥途徑，以保證治療效果和延緩抗藥性的產(chǎn)生。 （一）間日瘧治療藥物 首選磷酸氯喹片（簡(jiǎn)稱氯喹）、磷酸伯氨喹片（簡(jiǎn)稱伯氨喹）。治療無(wú)效時(shí)，可選用以青蒿素類藥物為基礎(chǔ)的復(fù)方或聯(lián)合用藥的口服劑型進(jìn)行治療。 （二）惡性瘧治療藥物 以青 蒿素類藥物為基礎(chǔ)的復(fù)方或聯(lián)合用藥（ ACT），包括：青蒿琥酯片加阿莫地喹片、雙氫青蒿素哌喹片、復(fù)方磷酸萘酚喹片、復(fù)方青蒿素片等。 （三）重癥瘧疾治療藥物 1. 青蒿素類藥物注射劑，包括蒿甲醚和青蒿琥酯。 2. 磷酸咯萘啶注射劑。 二、用藥方案 （一）間日瘧的治療 氯喹加伯氨喹：氯喹口服總劑量 1200mg。第 1日 600mg 頓服，或分 2次服，每次 300mg；第 3日各服1次，每次 300mg。伯氨喹口服總劑量 180mg。從服用氯喹的第 1日起，同時(shí)服用伯氨喹，每日 1次，每次，連服 8日。 此療法也可用于卵 形瘧和三日瘧的治療。 （二）惡性瘧的治療（選用以下一種方案） 1. 青蒿琥酯片加阿莫地喹片：口服總劑量青蒿琥酯和阿莫地喹各 12片（青蒿琥酯每片 50mg，阿莫地喹每片 150mg），每日頓服青蒿琥酯片和阿莫地喹片各 4片，連服 3日。 2. 雙氫青蒿素哌喹片：口服總劑量 8片（每片含雙氫青蒿素 40mg，磷酸哌喹 320mg），首劑 2片，首劑后 6— 8小時(shí)、 24小時(shí)、 32小時(shí)各服 2片。 3. 復(fù)方磷酸萘酚喹片：口服總劑量 8片（每片含萘酚喹 50mg，青蒿素 125mg），一次服用。 4. 復(fù)方青蒿素片：口服總劑量 4片（每片含青 蒿素 ，哌喹 375mg），首劑 2片， 24小時(shí)后再服 2片。 三、重癥瘧疾的治療（選用以下一種方案）。 1．蒿甲醚注射劑：肌注每日 1次，每次 80mg，連續(xù) 7日，首劑加倍。若病情嚴(yán)重時(shí)，首劑給藥后 4— 6小時(shí)可再肌注 80mg。 2．青蒿琥酯注射劑 :靜脈注射每日 1次，每次 60mg，連續(xù) 7日，首劑加倍。若病情嚴(yán)重時(shí)，首劑給藥后 4— 6小時(shí)，可再靜脈注射 60mg。 采用上述兩種注射療法治療，患者病情緩解并且能夠進(jìn)食后，改用 ACT 口服劑型，再進(jìn)行一個(gè)療程治療。 3．咯萘啶注射劑 :肌注或靜脈滴注，總劑量均為 480mg。每日 1次，每次 160mg，連續(xù) 3日。需加大劑量時(shí)，總劑量不得超過(guò) 640mg。 （四）孕婦瘧疾治療 孕婦患間日瘧可采用氯喹治療。孕期 3個(gè)月以內(nèi)的惡性瘧患者可選用磷酸哌喹，孕期 3個(gè)月以上的惡性瘧患者采用 ACT 治療。孕婦患重癥瘧疾應(yīng)選用蒿甲醚或青蒿琥酯注射劑治療。 （五）間日瘧休止期根治 伯氨喹：口服總劑量 180mg，每日 1次，每次 ，連服 8日。 （六）預(yù)防服藥（選用以下一種方案）。 1．磷酸哌喹片：每月 1次，每次服 600mg，睡前服。 2．氯喹：每 7— 10天服 1次，每次服 300mg。 注： ① 氯喹 、磷酸哌喹、伯氨喹和咯萘啶的劑量均以基質(zhì)計(jì)。 ② 方案中劑量均為成人劑量，兒童劑量按體重或年齡遞減。 ③ 地喹可引起粒細(xì)胞缺乏，萘酚喹可引起血尿 , 服用時(shí)如出現(xiàn)副反應(yīng)，應(yīng)立即停藥。 ④ 使用青蒿琥酯注射劑做靜脈注射時(shí)，需先將 5%碳酸氫鈉注射液 1ml 注入青蒿琥酯粉劑中，反復(fù)振搖 2— 3分鐘，待溶解澄清后，再注入 5ml 等滲葡萄糖或生理鹽水，混勻后緩慢靜脈推注（不宜滴注）。配制后的溶液如發(fā)生混濁，則不能使用。 ⑤ 使用咯萘啶注射劑做靜脈滴注時(shí)，需將 160mg 咯萘啶藥液注入 500ml 等滲葡萄糖或生理鹽水中，靜脈滴注速度不超過(guò) 60滴 /分。 ⑥ 磷酸哌喹有肝臟積蓄作用，采用磷酸哌喹片進(jìn)行預(yù)防服藥時(shí)，連續(xù)服藥時(shí)間不宜超過(guò) 4個(gè)月（需要時(shí)，應(yīng)停藥 2— 3個(gè)月后再次進(jìn)行預(yù)防服藥）。 ⑦ 孕婦、 1歲以下嬰兒、有溶血史者或其家屬中有溶血史者應(yīng)禁用伯氨喹；葡萄糖 6磷酸脫氫酶（ G6PD）缺乏地區(qū)的人群，應(yīng)在醫(yī)務(wù)人員的監(jiān)護(hù)下服用伯氨喹。 附：兒童抗瘧藥使用劑量參考表 兒童抗瘧藥使用劑量參考表 一、間日瘧病例 表 1 氯喹加伯氨喹八日療法不同年齡組服藥劑量 年齡組（歲） 占成人總劑量的比例 ≤ 1 1/10～ 1/8 1～ 3 1/6～ 1/4 4～ 6 1/3 7～ 12 1/2 13～ 15 3/4 ≥ 16 1/1 注：根據(jù)成人服藥劑量和不同年齡組的比例折算后給予相應(yīng)劑量。 15歲及以下兒童抗瘧疾治療劑量也可按公斤體重折算后給藥，氯喹口服總劑量按 24mg/Kg 計(jì)算，伯氨喹口服總劑量按 。 二、惡性瘧病例 （一）雙氫青蒿素哌喹片 表 2 雙氫青蒿素哌喹片不同年齡組服藥劑量（單位：片） 年齡（歲） 首劑 6～ 8小時(shí) 24小時(shí) 48小時(shí) ≥ 16 2 2 2 2 11～ 15 7～ 10 1 1 1 1 1～ 6 （二）青蒿琥酯片加阿莫地喹片 表 3 青蒿琥酯片加阿莫地喹片不同年齡組服藥劑量（單位：片） 年齡（歲） 第 1天 第 2天 第 3天 ≥ 14 2 2 2 6～ 13 1 1 1 1～ 5 （三）復(fù)方磷酸萘酚喹片 表 4 磷酸萘酚喹片不同年齡組服藥劑量（單位：片） 年齡（歲） 劑量 ≥ 8 6 4 2 1 （四）復(fù)方青蒿素片 表 5 復(fù)方青蒿素片不同 年齡組服藥劑量（單位：片） 年齡（歲） 首劑劑量 24小時(shí) ≥ 16 2 2 1115 710 1 1 46 23 附件 2 媒介按蚊種群調(diào)查技術(shù)規(guī)范 一、調(diào)查方法 在疫點(diǎn)病例周圍選取 1～ 2個(gè)調(diào)查場(chǎng)所（豬圈或牛舍），每個(gè)場(chǎng)所布置 1盞誘蚊燈，采用誘蚊燈通宵誘蚊法，進(jìn)行 1～ 2個(gè)通宵（日落后半小時(shí)至次日凌晨）的媒介按蚊種群調(diào)查；或采用人誘半通宵法開(kāi)展 1～ 2晚上調(diào)查。 二、標(biāo)本鑒定 （一）形態(tài)學(xué)鑒定 調(diào)查結(jié)束后，將集蚊盒 取出，用乙醚麻醉，放入標(biāo)記的平皿中（標(biāo)記采集時(shí)間、地點(diǎn)、人員等），去除非蚊蟲的標(biāo)本，于含有變色硅膠干燥劑的干燥器內(nèi)干燥，通過(guò)顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定，對(duì)于形態(tài)相近、難以鑒別的按蚊標(biāo)本（如中華按蚊、嗜人按蚊、八代按蚊等）可進(jìn)一步應(yīng)用分子生物學(xué)方法鑒定。 （二）分子生物學(xué)鑒定 1. 蚊蟲基因組 DNA抽提 （ 1）勻漿液（ NaCl ， EDTA ， SDS ， Tris HCl ，蔗糖 ，加 H2O 至100ml） 65℃ 預(yù)熱。 （ 2）單個(gè)蚊蟲置于 ml 離心管中，加入 100 μ l 預(yù)熱的勻漿液 ,用塑料研磨棒研磨至勻漿狀。 65℃孵育 30 min。 （ 3）加 5M(25μ l)乙酸鉀至終濃度 1M，混勻。 4℃ 置 30 min。 （ 4） 4℃ ， 13200轉(zhuǎn) /分 (rpm)冷凍離心 10 min。取上清液，可抽取大約 100 μ l110 μ l 上清液，注意不要抽到沉淀。 （ 5） 加 100%冰乙醇 (20℃ )沉淀核酸。 4℃ 靜置 30 min3 h。 （ 6） 4℃ ， 13200 rpm 冷凍離心 10 min。棄上清液，加 75%乙醇 200 μ l300 μ l(4℃ )。 （ 7） 13200 rpm 冷凍離心 10 min，棄上清液， 37℃ 恒溫箱烘干。 （ 8） 加 50μ l100μ l 雙蒸滅菌水 (ddH2O)溶解， 0℃ 冰箱待用。 2. PCR 分子鑒別 （ 1） PCR 鑒別引物 引物序列見(jiàn)下表： PCR 鑒別所用引物 引物 序列（ 5?－ 3?） PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度 共用引物 UP CCATGACGTACACATACTTG 中華按蚊種特異性 SP GTTGTCCAGCCCGCTAACAT 425 bp 嗜人按蚊種特異性 AP GCTCCATCTACACACAGCGT 253 bp 八代按蚊種特異性 YP GCTTAACACCGCGTTTCTTCA 141 bp （ 2） PCR 反應(yīng)體系 反應(yīng)體系中含 10 mmol/L Tris (pH )， 50 mmol/L KCl， mmol/L MgCl2， mg/mL BSA， dNTPs各 mmol/L， DNA Taq 聚合酶 2 U，引物各 μ mol/L，以及模板 μ L。 PCR 反應(yīng)條件為： 94℃ 2 min； 94℃ 30 s、 45℃ 30 s、 72℃ 30 s，共 30個(gè)循環(huán)； 72℃ 8 min。 （ 3）凝膠電泳 采用 TBE 緩沖電泳液，取 8 μ l PCR 產(chǎn)物，混合 6 加樣緩沖液 1 μ l， 1%瓊脂糖凝膠 (含