【文章內容簡介】 環(huán)境中動物實驗所需要的無菌衣、各種工器具進行濕熱滅菌。 二、 操作規(guī)程： 準備 1． 1 氣源：啟動空氣壓縮機，使壓縮空氣儲罐內充滿額定工作壓力。 1． 2 汽源：打開蒸汽閥門，并排放管路冷凝水及確認汽源壓力正常。 1． 3 水源：打開進水閥，并確認壓力正常。 1． 4 電源：相繼打開進線電源開關、控制電源開關。 開門 2． 1 啟動面板上人機界面（觸摸屏）顯示“神農”商標，按商標進入“主控界面”畫面，按“前門操作”鍵，顯示“前門操作”畫面，按“前門真空”鍵，門圈真空系統(tǒng)（真空泵、門圈真空閥、真空泵用水閥）啟動，抽排門圈內密封用壓縮空氣。 2． 2 約 15 秒鐘以后，按“開前門”鍵，前門鎖緊機構開啟，用手拉開前門。 2． 3 裝載：將需要滅菌的物品裝入滅菌柜，送如滅菌腔。 19 關門：裝載完畢，用手把門關上，并按住門 板，同樣在“前門操作”畫面下，按“關前門”鍵，前門鎖緊機構鎖住。 密封：如果此時前后門均為關閉，準備進行滅菌操作，即可將門圈密封。 自控運行：在“主控界面”畫面中按“自控界面”鍵將轉入自動控制界面，此時按“啟動”操作鍵，設備將按預設程序自動運行，畫面將同時動態(tài)顯示實時工況： 5． 1 準備：前后門關到位，空壓氣到位，觸摸屏顯示“準備”。 5． 2 真空：預熱至一定溫度，按啟動，循環(huán)三次真空轉入升溫。 5． 3 升溫：滅菌室壓力不斷上升至設定壓力。溫度持續(xù)上升設定值，轉入滅菌。 5． 4 滅菌：滅菌壓力、溫度維持在設定 范圍內，到設定滅菌時間，轉入干燥。 5． 5 干燥：排氣 1 分鐘左右，真空泵啟動抽濕熱蒸汽，其間真空、補氣相循環(huán)，到設定干燥時間，結束真空干燥，補百級空氣。 5． 6 結束：滅菌室壓力上升至 OMpa, 結束燈亮，按門真空 15 秒后，開門取物。 6．手控運行： 當有特殊的滅菌需求，或自控程序出現(xiàn)無法滿足滅菌需要時，任何時刻均可經“主控界面”畫面進入“手控界面”操作，利用手控操作鍵繼續(xù)完成 20 滅菌操作。 手控操作是一種非常規(guī)范的程序，需要操作者在理解該設備運行原理的基礎上，不偏離滅菌的常規(guī)原則合理應用該手控操作鍵，達到預期 結果。 1． 開門取物：“按后門真空” 鍵，約 15 秒后，按“開后門”鍵，后門緊鎖機構開啟，用手拉開后門取物。 2． 故障排除： 9． 1 報警處理：在整個工作運行過程中，針對各工作段可能出現(xiàn)的異常情況，設備會列出詳細的報警信息，閃爍于用戶界面，操作者應冷靜而準確地作出判斷，采用相應的處理措施。 9． 2 內室壓力異常：在確認短時間內無法排除的情況下，必須立即停止其它一切操作，將柜內壓力蒸汽迅速排凈，停止自動自動程序的運行，轉入手控操作界面，利用“排氣”操作鍵得以實施。 9． 3 真空泵過熱：原因是真空泵缺水或閥門開啟不良引 起。 3． 維護與保養(yǎng) 10． 1 每次滅菌結束，需對滅菌室進行清理，除去柜內、濾物網上的污物。 10． 2 每天滅菌結束，在手控操作界面排放柜底存水，對滅菌室進行清洗。 10． 3 長時間不用，需將腔內擦洗干凈，保持干燥清潔，并將雙門關閉。 10． 4 安全閥： 是保證設備在設計壓力安全運行的重要部件，每月應反復提拉數(shù)次，保證其靈活狀態(tài)。 10． 5 管路各濾網沒天清洗，確保暢通，壓力表、測溫探頭每年校驗一次，每 21 天排放壓縮空氣管路分水過濾器內存水，密封圈表面保持清潔，及時消除異物，如有殘損及時更換，鎖緊機構應每月檢查一次 ，發(fā)現(xiàn)松動、卡住現(xiàn)象及時調整。 第二章 實驗動物飼養(yǎng)規(guī)范與操作規(guī)程 22 11． 清潔 級大 、 小鼠的飼養(yǎng)管理與操作規(guī)程 1. 清潔 級 大小鼠要求生活在屏障環(huán)境中，嚴格控制各種環(huán)境因素。 2. 根據(jù)營養(yǎng)需要設計飼料配方，蛋白質、能量和維生素等各種營養(yǎng)成分應全面、充分。每天飼喂顆粒飼料應定時定量。 3. 飼養(yǎng)清潔級大小鼠的籠、盒等都必須能耐酸、耐堿、耐高溫。 4. 繁殖種鼠一般是生產五胎后應予以淘汰，留種率為 10— 15%。 5. 補充種子時，應按品系要求進行選種，封閉群要選留父母雙親的生產性能高的后代。仔鼠應個體健壯，被毛光澤，肌肉豐滿，皮膚富有彈性而不松弛，運動靈活，活潑有力 。尾部血管清晰，頭頸、四肢、軀體發(fā)育勻稱，眼耳口鼻無異物，呼吸均勻，食欲旺盛。 6. 操作中對動物的捕捉方法要正確，盡量避免其受驚，減少恐慌。 7. 工作人員每天進入動物室后，都要認真觀察溫濕度變化情況、動物的精神狀態(tài)、采食情況、糞便性狀等，并作好記錄。 8. 動物的發(fā)出應以領單為準，嚴格按照實驗人員要求發(fā)給，不得由其入內自行挑選。 9. 飼養(yǎng)人員在遇節(jié)假日休息或病、事假時，必須先請假，做好交接手續(xù)后方可離開。 10. 嚴禁外單位人員、籠具、動物等進入飼育區(qū)。 23 12． 裸鼠的飼養(yǎng)管理與操作規(guī)程 1. 裸鼠可在清潔級設施條件下層流柜內飼養(yǎng)，飼養(yǎng) 籠盒應帶有過濾帽。 2. 飼養(yǎng)裸鼠的環(huán)境晝夜都不得停電，因短時停電應及時采取應急措施。 3. 裸鼠對溫度要求稍高于其它鼠，范圍在 25~27℃，溫度在 40~60%。 4. 裸鼠對能量的要求稍高于其它小鼠，所以在作飼料配方時應考慮給予補充。飲水采用酸化水。 5. 在生產繁殖上，一般是采用雄性裸鼠和雌性半裸鼠交配的方式。 6. 仔鼠在出生后 3 天，根據(jù)裸鼠胡須少而卷曲的特點將裸鼠與半裸鼠分開。 7. 哺乳 25 天進行離乳，按雌雄分盒飼養(yǎng)。 8. 進入飼養(yǎng)室的一切物品，飼料、墊料、籠盒等都必須經過消毒滅菌。 9. 飼養(yǎng)人員有病時 (如皮膚病，痢疾、感冒、發(fā)熱 )時不得進 入飼養(yǎng)區(qū)。 10. 個人的手表、飾物等都不得帶入飼養(yǎng)區(qū)。 11. 每次進入飼育室時開關門要迅速，每扇門關閉后，才能再開 下一扇門，以防空氣對流。 24 13． 地鼠的飼養(yǎng)管理 與 操作規(guī)程 1. 飼養(yǎng)地鼠的籠盒要牢固，因地鼠牙齒十分堅硬，可咬斷細鐵絲。 2. 地鼠喜愛溫度較高、濕度較大的環(huán)境，一般溫度在 22~28℃，溫度在 60~70%。 3. 每天飼喂顆粒料二次，保證清潔的飲水。另外，補充新鮮的蔬菜和瓜果類。 4. 地鼠有二側頰囊，用于貯存食物，故應經常檢查，防止霉變。 5. 地鼠好斗，難于成群飼養(yǎng)，宜采取單籠飼養(yǎng)，配種時將雄鼠放入雌鼠籠內。 25 14． 豚鼠的飼養(yǎng)管理 與 操作規(guī)程 1. 進入豚鼠室時應小聲、輕動，不要大聲喧嘩。因豚鼠膽小易驚。 2. 每天飼喂顆粒飲料的同時，注意補充維生素 C，或禾木科嫩草。飼喂時應定時定量。 3. 豚鼠對溫度的變化較敏感室內溫度應保持在 18~24℃，濕度以 45~55%。 4. 在飼養(yǎng)過程中應避免用抗菌素，因為豚鼠對抗菌素極敏感。 5. 保持籠具和食具的衛(wèi)生，每天清除籠底板里的積糞，保持清潔的飲水。 6. 繁殖豚鼠以♀ :♂ =6:1 長期同居法。夏季 15 天，冬季 20 天后離乳，離乳后的豚鼠應根據(jù)雌雄、大小、強弱分群飼養(yǎng)。 7. 發(fā)現(xiàn)動物有異常情況應及時隔離飼養(yǎng)，并向技術 人員匯報。 8. 下班前檢查水、電、門窗，再拖地一遍。 26 15． 實驗兔的飼養(yǎng)管理 與 操作規(guī)程 1. 兔喜歡獨居，應單籠飼養(yǎng)。 2. 兔膽小怕驚，喜歡安靜，清潔。故禁止在兔舍內吸煙，進食、隨地吐痰、大聲喧嘩。 3. 每天飼喂二次顆粒飲料，飼喂時應定時定量、同時適當補充維生素 C 或青飼料，霉變飼料不得飼喂。 4. 選擇健壯、營養(yǎng)良好，被毛緊披有光澤，眼睛明亮有神，全身清潔，無疾病，無畸形，母兔要求母性好者進行留種繁殖。 5. 為保證受胎率，在母兔配種之后隔 10— 12 小時再交配一次。 6. 兔的妊娠期為 30 天，產仔前有拉毛現(xiàn)象，故在產仔前要準備好產箱。 7. 45 天離乳。離乳后的仔兔應按體質的強弱，雌雄進行分籠飼養(yǎng)。 8. 每年在春、秋二季進行二次疫苗的預防接種工作。 9. 在整個操作過程中，應認真觀察動物的活動情況，糞便性狀，毛色狀況，飲食、飲水、發(fā)現(xiàn)異常，及時隔離匯報。 10. 領發(fā)動物必須憑領單，由工作人員根據(jù)實驗人員的要求進行發(fā)放，實驗人員不得進入自由挑選。 11. 下班前檢查水、電等，關好門窗。 27 16． 實驗豬的 飼養(yǎng) 管理 與 操作規(guī)程 1 豬的生活習性 豬的嗅覺和聽覺靈敏，視覺不發(fā)達。豬的合群性強，并形成群居位次。豬在群飼時，相互之間有很強的模仿性、爭食性和競爭習性。 豬 喜干燥，愛好清潔。豬通常不在吃睡的地方排泄糞尿，而選擇陰暗潮濕或污濁、有糞尿氣味處排糞尿。 2 飼養(yǎng)環(huán)境要求 為避免發(fā)生疾病，在進豬之前有必要對豬舍、圈欄、用具等進行徹底的消毒。要徹底清掃豬舍走道、豬欄內的糞便、墊草等污物，用水洗刷干凈后再進行消毒。豬欄、走道、墻壁可用 2％～ 3％的苛性鈉（火堿）水溶液噴灑消毒，停半天或１天后再用清水沖洗、晾干。墻壁也可用 20％石灰粉刷。應提前消毒飼槽、飼喂用具、車輛等，消毒后洗刷干凈備用。日?？啥ㄆ谟脤ωi安全的消毒液進行帶豬消毒。 溫度 在適宜溫度下，豬的增重快，飼料利用率高。適宜溫度隨豬只體重的不同而不同。一般豬舍的適宜溫度，哺乳仔豬為 25~30℃、育成豬 20~23℃、成年豬 15~18℃。 濕度 實踐證明，當溫度適宜時，相對濕度從 45％上升到 75％都不會影響豬的采食量、增重和飼料利用率。 豬舍空氣相對濕度以 40％ 75％為宜。 光照 從豬的生物學特性看，豬對光也是不敏感的。因此肉豬舍的光照只要不影響操作和豬的采食就可以了。強烈的光照會影響肉豬的休息和睡眠，從而影響其生長發(fā)育。 28 豬舍的通風 加強通風的措 施有：在自然通風豬舍設置地腳窗、大窗、通風屋脊等；應使進氣口均勻布置，使各處豬均能享受到涼爽的氣流；縮小豬舍跨度，使舍內易形成穿堂風。在自然通風不足時，應增設機械通風。 3 常見豬的種類 我國的地方豬種有民豬、兩廣小花豬、滇南小耳豬、金華豬、華中兩頭烏豬、太湖豬、姜曲海豬、內江豬、榮昌豬、藏豬等。 國外引入豬種主要有大約克夏、長白豬、杜洛克豬、漢普夏豬、皮特蘭豬等。 驅蟲 幼豬轉入后 710 天，用 2%敵百蟲溶液體表噴霧驅蟲。 衛(wèi)生與消毒 每天清掃舍內走廊 、床面和清除糞便 2次。 每周舍內及走廊用有效消毒液帶豬噴霧消毒 2次，人員出入圈舍必須經過門前消毒槽腳踏消毒。 舍內溫度控制在 1618℃，相對濕度 5070%，保持空氣新鮮。 飼養(yǎng)員要隨時觀察豬群精神狀態(tài)、采食情況、糞便變化。發(fā)現(xiàn)異常立即報告，技術人員及時處理。 預防咬尾、耳等不良習慣。在飼喂全價飼料，溫濕度合適的情況下，仍可能有互咬現(xiàn)象，這也是仔豬的一種天性。在圈舍吊上橡膠環(huán)、鐵鏈及塑料瓶等讓它們玩耍，可分散注意力，減少互咬現(xiàn)象。 29 5 疫病防治手段 防疫設施 建防疫墻 豬廠四周建成墻，墻高 米。挖防疫溝，距防疫墻外 5米，挖防疫溝，溝上口寬 8米，底寬 4 米，深 2 米，溝內貯水。 消毒池 豬廠正門入口、出口、設三道消毒池，池內放入 2%苛性鈉溶液。消毒藥經常更換保持有效濃度，室外消毒池在冬季改用生石灰消毒。 消毒室 設可供廠內工作人員出入廠更衣用的更衣柜并安裝 2537 埃紫外線燈 6盞，消毒時照射 15 分鐘，凡進廠人員，必須通過消毒室更衣、換鞋、消毒后方可進廠。 消毒設備 各車間均配備壓縮式噴霧器 24 臺，供圈舍消毒用。備有高壓機動噴霧器 2 臺，供廠區(qū)消毒用。 預防豬的傳染病措施 貫徹自繁自養(yǎng)。更新血液，外引種豬時，須從非疫區(qū)（廠）購入，必須經過檢疫后方能引入。引入后進行兩個月隔離飼養(yǎng)，經觀察確認健康無病時，方許引入實驗豬場。 實驗豬場謝絕參觀。經特殊批準進場人員，須執(zhí)行更衣、換鞋消毒規(guī)定，方準進場。 豬群發(fā)生傳染病或發(fā)生可疑傳染病時，要及時迅速做出診斷以便采取相應措施。如遇疑難病情不能確診時，應及時送檢病料或請專家協(xié) 助確診。 撲滅傳染病要本著早、快、嚴、小的原則，一旦發(fā)生應立即隔離，封鎖發(fā)病圈舍或全場進行封鎖，并全廠緊急大消毒，如豬場周圍地區(qū)發(fā)生豬的傳染病，豬廠受到威脅時，也可進行自衛(wèi)封鎖。 撲殺的傳染病豬或病死豬，不準擅自剖檢，一律火化處理，如需診斷、檢驗剖檢必須由獸醫(yī)人員執(zhí)行，但出入火化間應徹底消毒。 30 6 捕捉方法 站立保定法 用一根筷子粗的紗繩 ,在一端打個活結。保定時 ,一人抓住豬的兩耳并向上提 ,在豬嚎叫時 ,把繩的活結立即套入豬的上領并抽緊 ,然后把繩頭扣在圈欄或木柱上 ,此時豬常后退 ,當豬 退至被繩拉緊時 ,便站住不動。解脫時 ,只需把活結的繩頭一抽便可。此法適用于檢查和肌肉注射。 6..2 提舉保定法 抓住豬的兩耳 ,迅速提起 ,使前肢騰空 ,同時用膝部夾住胸或腰腹部 ,使豬的腹部朝前 ,此法適用于灌藥或肌肉注射。 倒臥保定法 一手抓住豬的一個后肢并提起 ,另一手緊抓該肢同側膝前皺褶，順勢將豬橫臥于地，隨后兩手分別抓住前后肢，助手用繩縛緊四肢而固定。 倒立保定法 用兩手握住豬兩后肢飛節(jié) ,頭