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20xx年醫(yī)學(xué)專題—免疫細(xì)胞的分離與檢測(留存版)

2024-11-04 23:07上一頁面

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【正文】 物分為非特異性(如植物血凝素、刀豆素A等)和特異性刺激因子(如抗原);檢測方法為形態(tài)學(xué)檢測法和3HTdR摻入法及MTT法等。,SmIg的酶免疫檢測法,,第二十六頁,共七十五頁。n)在130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。bāo)分層液分離細(xì)胞(x236。MACS微珠是與高度特異性單克隆抗體相偶聯(lián)的超順磁化微粒。)分離法:淋巴細(xì)胞亞群的分離,尼龍毛法:混合(h249。ng)小于或等于分層液比重(bǐzh242。bāo)的特征,免疫細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征 理化性狀 生物學(xué)特性(t232。,第六頁,共七十五頁。 T細(xì)胞得率為2030%左右。)僅標(biāo)記極少量微珠的目的細(xì)胞。 可溶性MHC肽四聚體法:mhc肽四聚體復(fù)合物的原理是通過增強t細(xì)胞受體與mhc肽復(fù)合物親和力,達(dá)到可直接特異性檢測t細(xì)胞的目的。,第二十頁,共七十五頁。,E花環(huán)(huā hu225。bāo)的分化,因此又是免疫調(diào)節(jié)研究中常用的實驗?zāi)P?。d236。ndu224。,NK細(xì)胞(x236。 各孔細(xì)胞收集后依次通過生理鹽水,5%三氯乙酸和無水乙醇(獲得了存活的靶細(xì)胞的標(biāo)記DNA)。)功能試驗 細(xì)胞殺菌功能試驗,細(xì)胞吞噬與殺傷(shāshāng)功能試驗,第四十九頁,共七十五頁。 推片染色、鏡檢。ng)物外溢,核變化較慢,DNA降解不充分,引起局部嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。,二、細(xì)胞凋亡(diāo w225。)這一特點,可應(yīng)用試劑甲基綠對DNA染色的特異性和派諾寧對RNA的親和性,使甲基綠對固縮細(xì)胞核內(nèi)的脫氧核糖核酸著染,如果細(xì)胞質(zhì)內(nèi)核糖核酸呈派諾寧陽性染色者為凋亡細(xì)胞,呈陰性染色者為壞死細(xì)胞。,生化(shēnɡ hu224。 即凋亡的細(xì)胞,第七十二頁,共七十五頁。i sh236。各孔細(xì)胞收集后依次通過生理鹽水,5%三氯乙酸和無水乙醇(獲得了存活的靶細(xì)胞的標(biāo)記DNA)。,第七十頁,共七十五頁。ngji233。ngt224。bāo)凋亡的特點,(1)細(xì)胞(x236。,雖然凋亡與壞死的最終結(jié)果極為相似,但它們的過程與表現(xiàn)卻有很大差別。n yu225。,SPASRBC溶血(r243。,第四十三頁,共七十五頁。ndu224。,第三十八頁,共七十五頁。bāo)毒試驗 ADCC作用測定 NK活性測定,二、細(xì)胞毒檢測(jiǎn c232。)與殺傷試驗,第三十二頁,共七十五頁。ngguāng)抗體檢測法,第二十五頁,共七十五頁。ctā)分離法,花環(huán)沉降法:本法是將淋巴細(xì)胞與一定比例的綿羊紅細(xì)胞混合,待淋巴細(xì)胞形成E花環(huán)后,繼用淋巴細(xì)胞(x236。主要組成成分為MACS微珠、MACS分選柱和MACS分選器。nf249。ng)大,離心后沉于管底;淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重(bǐzh242。x236。,離心(l237。 親和板法:利用親和層析法分離淋巴細(xì)胞亞群,其原理是各種淋巴細(xì)胞亞群具有不同的抗原性,將相應(yīng)抗體結(jié)合于塑料平板上,繼加細(xì)胞懸液,凡抗原陽性的細(xì)胞則與相應(yīng)抗體結(jié)合,抗原陰性的細(xì)胞可從未吸附的細(xì)胞懸液中獲取。用緩沖液沖洗分選柱,所有未標(biāo)記的細(xì)胞被沖洗掉。 作為臨床診斷工具,定量檢測外周血及組織中抗原特異性CTLs的比率,并進(jìn)行表型及功能分析。,細(xì)胞(x236。n):利用T細(xì)胞膜上的異種動物紅細(xì)胞受體,T細(xì)胞(x236。,一、轉(zhuǎn)化(zhuǎnhu224。ng),細(xì)胞毒試驗(sh236。n)K細(xì)胞活性的高低。bāo)活性測定,NK細(xì)胞是具有天然殺傷靶細(xì)胞活性的淋巴樣細(xì)胞,其殺傷作用(zu242。 待濾膜干燥后用γ液閃計數(shù)儀測定cpm值。,第五十頁,共七十五頁。,正常值:,NBT陽性細(xì)胞 7.515%,第五十三頁,共七十五頁。 凋亡是細(xì)胞對環(huán)境的生理性病理性刺激信號,環(huán)境條件的變化或緩和性損傷產(chǎn)生的應(yīng)答有序變化的死亡過程。nɡ)的檢測方法,形態(tài)觀察法:凋亡的細(xì)胞皺縮,質(zhì)膜完整,胞漿致密,細(xì)胞器密集,不同程度退變;核染色質(zhì)致密,形成形狀不一,大小不等的團(tuán)塊邊集于核膜處,進(jìn)而(j236。,二、細(xì)胞凋亡(diāo w225。)檢測法,(1)凝膠電泳法: (2)原位末端標(biāo)記法 (3)二苯胺(běn 224。,(3)二苯胺(běn 224。 ɡ249
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