20xx年醫(yī)學(xué)專題—免疫細(xì)胞的分離與檢測-免費閱讀
【正文】 )性細(xì)胞死亡，被動進行（他殺性）。ng)總結(jié),一、免疫細(xì)胞的特征。n)分光光度法,原理：細(xì)胞凋亡可產(chǎn)生(chǎnshēng)低分子量DNA，通過超速離心可與細(xì)胞核的高分子量DNA分離，分別測定兩種DNA，即可得出凋亡百分率。)單個細(xì)胞水平的凋亡。n)分光光度法,二、細(xì)胞凋亡的檢測(jiǎn c232。,（3）透射電子顯微鏡：已經(jīng)用于凋亡細(xì)胞的檢測。nɡ)的檢測方法,第六十四頁，共七十五頁。 流式細(xì)胞儀檢測法,第六十三頁，共七十五頁。n 233。nɡ)機制（動畫）,第六十頁，共七十五頁。其細(xì)胞及組織的變化與壞死有明顯的不同。ng)死亡過程，也稱程序性死亡。,第四節(jié) 免疫細(xì)胞(x236。nlǐ)：,NN C + H+ N=NR,NNH2 C N=NH,四氮唑基（淡黃色）,甲月簪基（紫黑色）,第五十二頁，共七十五頁。,吞噬(tūnsh236。nɡ xu232。 三、結(jié)果計算 NK細(xì)胞活性以特異性殺傷率表示： 特異性殺傷率（%）＝（1－試驗組cpm/對照組cpm）100%,第四十四頁，共七十五頁。 jiě)紅細(xì)胞淋巴細(xì)胞洗滌配置懸液（1640完全培養(yǎng)基2106/ml）。y242。,第四十頁，共七十五頁。,第三十九頁，共七十五頁。 K細(xì)胞活性檢測的方法有同位素釋放試驗法，溶血空斑法，細(xì)胞剝離法和靶細(xì)胞接合試驗。y224。,T細(xì)胞(x236。)、增殖試驗,第三十三頁，共七十五頁。,第三節(jié) 免疫細(xì)胞(x236。bāo),B細(xì)胞(x236。)方法 熒光抗體法 酶免疫檢測法 免疫金銀染色法 補體依賴的細(xì)胞毒試驗（CDC） 花環(huán)形成試驗,第二十四頁，共七十五頁。bāo)凍存罐,第二十一頁，共七十五頁。在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。 用于過繼性腫瘤免疫治療 用于疫苗療效的監(jiān)測,第十七頁，共七十五頁。,第十六頁，共七十五頁。分選柱離開磁場，即可獲得被標(biāo)記的細(xì)胞組分。ng)分離法,（1）磁鐵吸引法：利用單核細(xì)胞具有吞噬的特性，在單個核細(xì)胞懸液中加直徑為3μm的羰基鐵顆粒，置37℃溫箱內(nèi)短時旋轉(zhuǎn)搖動，待單核細(xì)胞充分吞噬羰基鐵顆粒后，用磁鐵將細(xì)胞吸至管底，上層液中含較純的淋巴細(xì)胞。 吸附柱法：將單個核細(xì)胞懸液注入裝有玻璃纖維或葡聚糖凝膠SephadexG10的柱層中，凡有粘附能力的細(xì)胞絕大部分被吸附而粘滯在柱層中，從柱上洗脫下來的細(xì)胞主要是淋巴細(xì)胞。,第八頁，共七十五頁。xīn)前,離心(l237。,密度梯度離心法,聚蔗糖(Ficoll)泛影葡胺(Urografin)(F/H)分層液 Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，親水性高，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g/ml仍未超出正常生理性滲透壓，也不穿過生物膜。ng) 免疫細(xì)胞的膜分子特征 CD分子,第一頁，共七十五頁。,第二頁，共七十五頁。 紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重(bǐzh242。xīn)后,稀釋(xīsh236。,黏附(ni225。此法簡單易行，對細(xì)胞極少損害。 （2）磁激活細(xì)胞分離術(shù)MACs：是一種特異性細(xì)胞分選技術(shù)，其高度特異性來自抗體對抗原的特異性識別。,第十二頁，共七十五頁。,其他(q237。,抗原(k224。貯存(zh249。,第二節(jié) 免疫細(xì)胞膜分子(fēnzǐ)的檢測,一、免疫細(xì)胞膜分子(fēnzǐ)檢測的原理與類型 二、免疫細(xì)胞膜分子的檢測方法,第二十二頁，共七十五頁。,SmIg的熒光(y237。bāo),花環(huán)形成細(xì)胞,綿羊紅細(xì)胞,第二十八頁，共七十五頁。bāo)功能測定,一、轉(zhuǎn)化、增殖試驗 二、細(xì)胞毒試驗 三、抗體形成試驗 四、細(xì)胞吞噬(tūnsh236。,第三十四頁，共七十五頁。bāo)介導(dǎo)的細(xì)胞(x236。n)原理示意,靶細(xì)胞,效應(yīng)(xi224。僅介紹同位素釋放法。,（2）方法(fāngfǎ),試驗管：效應(yīng)細(xì)胞(淋巴細(xì)胞懸液) ，標(biāo)記的靶細(xì)胞(Cr51標(biāo)記的雞紅細(xì)胞)和亞凝集單位的抗體(兔抗雞紅細(xì)胞抗體)各0.1ml，加RPMI 1640完全培養(yǎng)基1.7ml（ADCC）。,（3）結(jié)果判斷(p224。ng)不需要抗體、補體的參加，所殺傷靶細(xì)胞通常指腫瘤細(xì)胞和病毒感染
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