20xx年醫(yī)學(xué)專題—免疫細(xì)胞的分離與檢測(cè)-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 胞組分。ng)選擇法）,N,S,第十三頁(yè)，共七十五頁(yè)。,第十六頁(yè)，共七十五頁(yè)。bāo)。 用于過(guò)繼性腫瘤免疫治療 用于疫苗療效的監(jiān)測(cè),第十七頁(yè)，共七十五頁(yè)。,MHC I類(左)和Ⅱ類(右)分子(fēnzǐ)四聚體結(jié)構(gòu)示意圖,第十九頁(yè)，共七十五頁(yè)。在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。 細(xì)胞復(fù)蘇的原理與方法：細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)速度要快，使之迅速通過(guò)細(xì)胞最易受損的－5～0℃，細(xì)胞仍能生長(zhǎng)，活力受損不大。bāo)凍存罐,第二十一頁(yè)，共七十五頁(yè)。bi233。)方法 熒光抗體法 酶免疫檢測(cè)法 免疫金銀染色法 補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒試驗(yàn)（CDC） 花環(huán)形成試驗(yàn),第二十四頁(yè)，共七十五頁(yè)。,補(bǔ)體(bǔtǐ)依賴的細(xì)胞毒試驗(yàn)（CDC）,染料(rǎnli224。bāo),B細(xì)胞(x236。h233。,第三節(jié) 免疫細(xì)胞(x236。 混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)：混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(MLC)或稱混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)常用于器官移植前的組織配型，以測(cè)定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。)、增殖試驗(yàn),第三十三頁(yè)，共七十五頁(yè)。ng),3HTdR,絲裂原（抗原(k224。,T細(xì)胞(x236。bāo)功能測(cè)定,第三十六頁(yè)，共七十五頁(yè)。y224。,K細(xì)胞(x236。 K細(xì)胞活性檢測(cè)的方法有同位素釋放試驗(yàn)法，溶血空斑法，細(xì)胞剝離法和靶細(xì)胞接合試驗(yàn)。nlǐ),將靶細(xì)胞用51Cr標(biāo)記后，再與特異性的IgG抗體結(jié)合，加入K細(xì)胞后即可發(fā)生ADCC效應(yīng)，引起靶細(xì)胞的溶解并釋放51Cr。,第三十九頁(yè)，共七十五頁(yè)。 最大釋放對(duì)照管：標(biāo)記的靶細(xì)胞0.1ml 加蒸餾水 1.9ml（靶細(xì)胞會(huì)裂解，完全釋放同位素）。,第四十頁(yè)，共七十五頁(yè)。f224。y242。在這里以檢測(cè)小鼠脾臟NK細(xì)胞活性為例，說(shuō)明本試驗(yàn)方法。 jiě)紅細(xì)胞淋巴細(xì)胞洗滌配置懸液（1640完全培養(yǎng)基2106/ml）。 37℃ 5%CO2培養(yǎng)18小時(shí)（NK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞）； 每孔加終濃度為0.15%的胰酶和0.0125%DNA酶37℃處理30min（消化細(xì)胞和處理掉死亡(sǐw225。 三、結(jié)果計(jì)算 NK細(xì)胞活性以特異性殺傷率表示： 特異性殺傷率（%）＝（1－試驗(yàn)組cpm/對(duì)照組cpm）100%,第四十四頁(yè)，共七十五頁(yè)。ngtǐ)形成試驗(yàn),第四十五頁(yè)，共七十五頁(yè)。nɡ xu232。)空斑試驗(yàn),第四十八頁(yè)，共七十五頁(yè)。,吞噬(tūnsh236。)的吞噬細(xì)胞數(shù),吞噬指數(shù) =,吞噬細(xì)胞吞噬的總顆粒數(shù),計(jì)數(shù)的吞噬細(xì)胞數(shù),第五十一頁(yè)，共七十五頁(yè)。nlǐ)：,NN C + H+ N=NR,NNH2 C N=NH,四氮唑基（淡黃色）,甲月簪基（紫黑色）,第五十二頁(yè)，共七十五頁(yè)。C孵育(fū y249。,第四節(jié) 免疫細(xì)胞(x236。nɡ)的概念與原理,細(xì)胞(x236。ng)死亡過(guò)程，也稱程序性死亡。表現(xiàn)為細(xì)胞 脹大，胞膜破裂，細(xì)胞內(nèi)容(n232。其細(xì)胞及組織的變化與壞死有明顯的不同。nɡ)的原理,凋亡信號(hào)——凋亡受體——信號(hào)傳導(dǎo)——凋亡基因啟動(dòng)——編碼程序性死亡蛋白——細(xì)胞結(jié)構(gòu)(ji233。nɡ)機(jī)制（動(dòng)畫）,第六十頁(yè)，共七十五頁(yè)。,細(xì)胞(x236。n 233。 ②細(xì)胞內(nèi)活性氧增多。 流式細(xì)胞儀檢測(cè)法,第六十三頁(yè)，共七十五頁(yè)。而細(xì)胞壞死是一種被動(dòng)的細(xì)胞死亡過(guò)程，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)常有RNA的損失。nɡ)的檢測(cè)方法,第六十四頁(yè)，共七十五頁(yè)。,第六十五頁(yè)，共七十五頁(yè)。,（3）透射電子顯微鏡：已經(jīng)用于凋亡細(xì)胞的檢測(cè)。晚期的凋亡細(xì)胞，清晰可見(jiàn)細(xì)胞核裂解產(chǎn)生的凋亡小體。n)分光光度法,二、細(xì)胞凋亡的檢測(cè)(jiǎn c232。利用這一特性，可通過(guò)DNA凝膠電泳來(lái)判定凋亡的發(fā)生和發(fā)展情況。)單個(gè)細(xì)胞水平的凋亡。,TUNEL染色：細(xì)胞核固縮有的呈碎片狀，不規(guī)則，大小不一致，呈棕黃色顆粒(kēl236。n)分光光度法,原理：細(xì)胞凋亡可產(chǎn)生(chǎnshēng)低分子量DNA，通過(guò)超速離心可與細(xì)胞核的高分子量DNA分離，分別測(cè)定兩種DNA，即可得出凋亡百分率。ndi224。ng)總結(jié),一、免疫細(xì)胞的特征。意外事故(y236。)性細(xì)胞死亡，被動(dòng)進(jìn)行（他殺性）
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