20xx年醫(yī)學專題—免疫細胞的分離與檢測-預覽頁
【正文】 胞組分。ng)選擇法）,N,S,第十三頁，共七十五頁。,第十六頁，共七十五頁。bāo)。 用于過繼性腫瘤免疫治療 用于疫苗療效的監(jiān)測,第十七頁，共七十五頁。,MHC I類(左)和Ⅱ類(右)分子(fēnzǐ)四聚體結(jié)構(gòu)示意圖,第十九頁，共七十五頁。在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細胞。 細胞復蘇的原理與方法：細胞復蘇時速度要快，使之迅速通過細胞最易受損的－5～0℃，細胞仍能生長，活力受損不大。bāo)凍存罐,第二十一頁，共七十五頁。bi233。)方法 熒光抗體法 酶免疫檢測法 免疫金銀染色法 補體依賴的細胞毒試驗（CDC） 花環(huán)形成試驗,第二十四頁，共七十五頁。,補體(bǔtǐ)依賴的細胞毒試驗（CDC）,染料(rǎnli224。bāo),B細胞(x236。h233。,第三節(jié) 免疫細胞(x236。 混合淋巴細胞培養(yǎng)：混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)或稱混合淋巴細胞反應(MLR)常用于器官移植前的組織配型，以測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。)、增殖試驗,第三十三頁，共七十五頁。ng),3HTdR,絲裂原（抗原(k224。,T細胞(x236。bāo)功能測定,第三十六頁，共七十五頁。y224。,K細胞(x236。 K細胞活性檢測的方法有同位素釋放試驗法，溶血空斑法，細胞剝離法和靶細胞接合試驗。nlǐ),將靶細胞用51Cr標記后，再與特異性的IgG抗體結(jié)合，加入K細胞后即可發(fā)生ADCC效應，引起靶細胞的溶解并釋放51Cr。,第三十九頁，共七十五頁。 最大釋放對照管：標記的靶細胞0.1ml 加蒸餾水 1.9ml（靶細胞會裂解，完全釋放同位素）。,第四十頁，共七十五頁。f224。y242。在這里以檢測小鼠脾臟NK細胞活性為例，說明本試驗方法。 jiě)紅細胞淋巴細胞洗滌配置懸液（1640完全培養(yǎng)基2106/ml）。 37℃ 5%CO2培養(yǎng)18小時（NK細胞殺傷靶細胞）； 每孔加終濃度為0.15%的胰酶和0.0125%DNA酶37℃處理30min（消化細胞和處理掉死亡(sǐw225。 三、結(jié)果計算 NK細胞活性以特異性殺傷率表示： 特異性殺傷率（%）＝（1－試驗組cpm/對照組cpm）100%,第四十四頁，共七十五頁。ngtǐ)形成試驗,第四十五頁，共七十五頁。nɡ xu232。)空斑試驗,第四十八頁，共七十五頁。,吞噬(tūnsh236。)的吞噬細胞數(shù),吞噬指數(shù) =,吞噬細胞吞噬的總顆粒數(shù),計數(shù)的吞噬細胞數(shù),第五十一頁，共七十五頁。nlǐ)：,NN C + H+ N=NR,NNH2 C N=NH,四氮唑基（淡黃色）,甲月簪基（紫黑色）,第五十二頁，共七十五頁。C孵育(fū y249。,第四節(jié) 免疫細胞(x236。nɡ)的概念與原理,細胞(x236。ng)死亡過程，也稱程序性死亡。表現(xiàn)為細胞 脹大，胞膜破裂，細胞內(nèi)容(n232。其細胞及組織的變化與壞死有明顯的不同。nɡ)的原理,凋亡信號——凋亡受體——信號傳導——凋亡基因啟動——編碼程序性死亡蛋白——細胞結(jié)構(gòu)(ji233。nɡ)機制（動畫）,第六十頁，共七十五頁。,細胞(x236。n 233。 ②細胞內(nèi)活性氧增多。 流式細胞儀檢測法,第六十三頁，共七十五頁。而細胞壞死是一種被動的細胞死亡過程，細胞質(zhì)內(nèi)常有RNA的損失。nɡ)的檢測方法,第六十四頁，共七十五頁。,第六十五頁，共七十五頁。,（3）透射電子顯微鏡：已經(jīng)用于凋亡細胞的檢測。晚期的凋亡細胞，清晰可見細胞核裂解產(chǎn)生的凋亡小體。n)分光光度法,二、細胞凋亡的檢測(jiǎn c232。利用這一特性，可通過DNA凝膠電泳來判定凋亡的發(fā)生和發(fā)展情況。)單個細胞水平的凋亡。,TUNEL染色：細胞核固縮有的呈碎片狀，不規(guī)則，大小不一致，呈棕黃色顆粒(kēl236。n)分光光度法,原理：細胞凋亡可產(chǎn)生(chǎnshēng)低分子量DNA，通過超速離心可與細胞核的高分子量DNA分離，分別測定兩種DNA，即可得出凋亡百分率。ndi224。ng)總結(jié),一、免疫細胞的特征。意外事故(y236。)性細胞死亡，被動進行（他殺性）
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