20xx年醫(yī)學(xué)專題—免疫細(xì)胞分泌研究進(jìn)展-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 疫熒光標(biāo)記法: 多巴胺β羥化酶(DBH)在嗜鉻細(xì)胞分泌囊泡中是一種主要的膜蛋白,由于它在胞吐中會(huì)出現(xiàn)在細(xì)胞膜的表面, 隨著它與胞外液中熒光標(biāo)記的DBH抗體的結(jié)合, 就能觀察到胞吐位點(diǎn)在細(xì)胞膜上的分布以及囊泡膜的回收過(guò)程。神經(jīng)遞質(zhì)的分泌與細(xì)胞鈣離子濃度緊密偶聯(lián)(與鈣離子濃度的3～4次方成正相關(guān))。通過(guò)控制激發(fā)紫外光的強(qiáng)度, 可以用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度滴定,也可用于鈣結(jié)合力測(cè)定以及其他許多鈣依賴的細(xì)胞功能活動(dòng)。 2 免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞和分子機(jī)制 2amp。在大多數(shù)淋巴細(xì)胞上存在有不同的離子通道, 這些離子通道類似于神經(jīng)細(xì)胞以及肌肉細(xì)胞的離子通道,但又有其自身的特點(diǎn)。絲裂酶原刺激后24 h可使K電流增大。但T淋巴細(xì)胞上存在一種非電壓依賴性的Ca2 通道, 由T細(xì)胞抗原所激活, 然后通過(guò)第二信使IP3, 引發(fā)細(xì)胞內(nèi)Ca2 庫(kù)釋放,增強(qiáng)Ca2 離子跨膜內(nèi)流或Ca2 依賴性滅活。鈣信號(hào)的頻率特性可通過(guò)幾種非線性反饋系統(tǒng)來(lái)調(diào)控, 如PKC介導(dǎo)的CD3γ亞基的磷酸化負(fù)反饋(可反饋抑制TCR/CD3的功能)、 ca2 信號(hào)放大正反饋(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2 的釋放和同時(shí)發(fā)生的CRAC以及PLC的進(jìn)一步激活)、 ca2 離子的自身負(fù)反饋。46。人的中性粒白細(xì)胞是成功應(yīng)用wholecell和oncell膜片鉗法進(jìn)行研究的少數(shù)免疫細(xì)胞之一［10］。當(dāng)向細(xì)胞導(dǎo)入高濃度Ca2 時(shí),分泌過(guò)程呈現(xiàn)2種不同的動(dòng)力學(xué)成分, 第一相只需要1～10 μmol/L的Ca2 , 而第二相則需要100～300 μmol/L的Ca2 濃度,他們分別對(duì)應(yīng)免疫細(xì)胞內(nèi)不同性質(zhì)的囊泡, 即不同的Ca2 濃度控制不同的囊泡分泌, 以適應(yīng)不同的細(xì)胞功能。46。免疫細(xì)胞融合孔也存在閃爍開(kāi)閉(flicker)的現(xiàn)象［11,12］, 這表明小囊泡的胞吐是可逆的。關(guān)于膜融合孔調(diào)控的分子機(jī)制研究還剛剛起步。該研究的進(jìn)一步深入, 有望揭開(kāi)囊泡融合晚期分子活動(dòng)的神秘面紗, 這不但對(duì)細(xì)胞免疫學(xué)而且對(duì)神經(jīng)科學(xué)和內(nèi)分泌學(xué)都意義深遠(yuǎn)。 2amp。肥大細(xì)胞激活后,細(xì)胞內(nèi)多個(gè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被激活, 導(dǎo)致炎癥前細(xì)胞因子立即釋放和其他細(xì)胞因子的延遲性釋放。46。 最近的一項(xiàng)研究［19］表明, Ly49A受體能調(diào)控NK細(xì)胞的囊泡胞吐和細(xì)胞因子的分泌,在NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用過(guò)程中， 作為MHCI分子的一個(gè)抑制性受體而存在, 而且僅通過(guò)由Ly49A介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程就足以產(chǎn)生抑制效應(yīng)。小囊泡由于其Ca2 閾值高和分泌速率快, 瞬間升高的Ca2 信號(hào)更能有效地觸發(fā)其分泌。許多免疫細(xì)胞如T細(xì)胞、 B細(xì)胞、 肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等受到刺激后可以立即脫顆粒, 釋放其炎癥因子,amp。 最近, Paumet等［23］在RBL2H3肥大細(xì)胞株上對(duì)細(xì)胞胞吐的SNARE分子機(jī)制進(jìn)行了研究, 發(fā)現(xiàn)了幾種SNARE蛋白質(zhì)復(fù)合體的異構(gòu)體表達(dá),其中一種23 kDa的SNAP (SNAP23)對(duì)SNARE的形成非常重要。這一研究首次表明,非神經(jīng)元性的VAMP8異構(gòu)體(最早在早期內(nèi)體上發(fā)現(xiàn))參與分泌囊泡的調(diào)控。在抗syntaxin抗體中,只有syntaxin 2抗體可以抑制致密囊泡的釋放, 免疫沉淀印跡的結(jié)果證明在體內(nèi)2個(gè)syntaxin 2和SNAP23結(jié)合形成一個(gè)復(fù)合體。免疫細(xì)胞的分泌活動(dòng)除了受自身的調(diào)控外, 還受神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。而生長(zhǎng)激素(GH)對(duì)幾乎所有免疫細(xì)胞如淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、 NK細(xì)胞、 胸腺細(xì)胞等都有促進(jìn)分化和加強(qiáng)功能的作用。基因點(diǎn)突變的研究表明: IL2分子具有相互獨(dú)立的免疫功能位點(diǎn)和鎮(zhèn)痛功能位點(diǎn),而作為神經(jīng)遞質(zhì)的內(nèi)啡肽也有相互獨(dú)立的鎮(zhèn)痛和免疫調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域。內(nèi)容總結(jié)
（1）摘要：細(xì)胞分泌活動(dòng)涉及一系列復(fù)雜的分子活動(dòng)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程, 它是許多重要生命活動(dòng)如神經(jīng)遞質(zhì)的釋放、 內(nèi)分泌激素分泌、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)等的基礎(chǔ)
（2）另一種方法是通過(guò)基因轉(zhuǎn)染方法將熒光基因如綠色熒光蛋白(GFP)基因轉(zhuǎn)入靶細(xì)胞中并選擇性地在囊泡中表達(dá),然后用激光掃描共聚焦熒光顯微鏡等檢測(cè)囊泡的運(yùn)動(dòng)過(guò)程［5］
（3）區(qū)分不同囊泡動(dòng)力學(xué)特性和Ca2 依賴性有助于了解不同分泌囊泡的分泌調(diào)控機(jī)
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