【正文】 27 參考文獻(xiàn) ………………………………………………………….…………………………………... 28 . xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 1 頁 第 1 章 緒論 厚樸的研究概述 形態(tài)及習(xí)性 厚樸 拉丁名為 Magnolia officinalis Wils，中文名厚樸，拉丁科名為Magnoliaceae， 中文科名為木蘭科，其實(shí)物如圖 11 所示。厚樸為喜光的中生性樹種，幼齡期需蔭蔽；喜涼爽、濕潤、多云霧、相對濕度大的氣候環(huán)境。內(nèi)表面紫棕色或深紫褐色，較平滑，具細(xì)密縱紋，劃之顯油痕。無機(jī)成分含 鈣、鈉、鉀、鎂、鐵、錳、鋅、銅等 [2]。 4． 其他 龍飛首次對厚樸葉化學(xué)成分進(jìn)行了分離鑒定。在超高劑量下， β桉葉油醇和二苯基乙內(nèi)酰脲鈉顯示了更強(qiáng)的阻止電休克癲癇發(fā)作作用， β桉葉油醇有望成為鎮(zhèn)癲劑或二苯基乙內(nèi)酰脲鈉抗癲療法中的協(xié)同治療劑 [4]。厚樸酚（ 1040μmol／ L）可抑制人肺鱗狀癌 CH27細(xì)胞的增殖， 80100μmol／ L時可誘導(dǎo)其死亡。疏郁化痰、軟堅(jiān)散結(jié)解毒是其治法，半夏厚樸湯療氣解郁，化痰散結(jié)，加夏枯草、連翹、香附是增強(qiáng)其軟堅(jiān)散結(jié)之功及消炎解毒之用 [8]。 厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚提取方法 概況 中藥材厚樸的有效成分和藥理作用是以厚樸酚、和厚樸酚為主，其提取方法也是針對以上兩種物質(zhì)。鞣質(zhì)是多羥基衍生物，列為親水性化合物。 （ 5） 連續(xù)提取法 為了彌補(bǔ)回流提取法中需要溶劑量大，操作較煩的不足，可采用連續(xù)提取法。此法效率高，質(zhì)量好，保留原藥特性，是先進(jìn)的工業(yè)提取方法 [20,21,22]。 如表 表 乙醇濃度的配置 溶液終濃度（ %） 95%乙醇（ ml） 65 70 368 75 儀器設(shè)備 1． 玻璃儀器 圓底燒瓶 500ml（ 5 個） 燒杯 500ml（ 2 個）、 250ml（ 2 個） xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 16 頁 燒杯 1000ml（ 2 個） 錐形瓶 250ml 玻璃棒 無 量筒 200ml， 500ml 球形冷凝管 無 抽濾瓶 250ml 2． 電子儀器 罐擺式高速中藥材粉碎機(jī) 浙江省瑞安市東源醫(yī)療設(shè)備機(jī)械廠 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏 實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司 標(biāo)準(zhǔn)樣篩 華東篩網(wǎng)廠 電子精密天平 梅特勒 托利多儀器（上海）有限公司 柱塞式計(jì)量泵 杭州華黎泵業(yè)有限公司 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 RE52A 上海亞榮生化儀器廠 集熱式恒溫加熱磁力攪拌器 鞏義市英峪予華儀器廠 循環(huán)水式真空泵 鞏義市英峪予華儀器廠 冰箱 海爾集團(tuán) 3． 其他 稱量紙，軟木塞，布氏漏斗，鐵架臺，夾子 ，鑰匙。例如，在本實(shí)驗(yàn)中 s=3，在 A 因素所在的第 1 列中， k1=／ 3=。都比試驗(yàn)號 6 的浸膏得率高，從縮短了提取時間降低了能耗角度考慮，可以采取 A1B2C1D3 的較優(yōu)方案，即提取時間 60min，乙醇濃度 70%，乙醇用量 6 倍，提取次數(shù) 3 次。因此試驗(yàn)選取了不含葉綠素的部位，根部。 當(dāng)前，通過各種技術(shù)手段尋找及研究傳統(tǒng)中藥中活性成分的工作已逐漸成為國內(nèi)外關(guān)注的重點(diǎn)。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 25 頁 結(jié) 論 中藥厚樸為木蘭科木蘭屬喬木 (Magnolia officinalis Rehd． et Wils)凹葉厚樸 (Magnolia officinalis Rehd． et Wils． var． biloba Rehd． et Wil)的干燥樹皮、根皮以及枝皮， 具有行氣燥濕、降逆平喘之功效，用于 治療 脘腹脹痛、宿食不消、嘔吐瀉痢、氣逆喘咳 等疾病， 其主要活性成分 為 厚樸酚與和厚樸酚 (honokiol)，它具有多種藥理作用，包括抗炎，抗心律失常，抗癲癇，抗血小板，抑制肌肉收縮和抗菌作用，此外還可以抑制氮的氧化產(chǎn)物，抑制腫瘤壞死因子 α的表達(dá)活性等。 3． 在需要多次回流的實(shí)驗(yàn)組中，抽濾時可以暫不關(guān)閉水浴鍋，而將其溫度變化速度調(diào)節(jié)至最小而不關(guān)閉，可以節(jié)省下一次回流時水浴鍋中水加熱的時間。 圖 效應(yīng)曲線圖，因素為乙醇用量 由趨勢圖可以看出，隨乙醇用量水平的變動，浸膏得率在降低， 120ml 時，浸膏得率最高。 2． 優(yōu)方案的確定 優(yōu)方案是指在所做的試驗(yàn)范圍內(nèi)，各因素較優(yōu)的水平組合。 L9（ 34）正交設(shè)計(jì)表如表 所示。 本論文通過對正交設(shè)計(jì)表中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行正交分析，得到各因素的主次關(guān)系， 可為厚樸有效成分工業(yè)化提取工藝的設(shè)計(jì)提供理論依據(jù) ，指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。 4． 乙醇提取法 取厚樸粗粉，用 65%乙醇（乙醇量為藥材量的 5倍），加熱回流3次，每次 2 h，合并提取液。同時，原料的粉碎度、提取時間、提取溫度、設(shè)備條件等因素也都能影響提取效率，必須加以考慮。除溶劑外還可利用其他化學(xué)試劑。） d；對照組分別為（ 177。其中，在抗菌作用方面，厚樸酚對格蘭氏陽性菌、耐酸性菌、絲狀真菌有顯著的抗菌活性。厚樸的初提成分厚樸堿與厚樸揮發(fā)油飽和水溶液對金黃色葡萄球菌，疊球菌和枯草桿菌有一定的抑菌作用，厚樸對肺炎雙球菌和痢疾桿菌也有抗菌活性。 2． 鎮(zhèn)痛抗炎藥理作用 厚樸為芳香化濕中藥，辛能散結(jié)；苦能燥濕、溫?zé)犰铒L(fēng)寒，具有鎮(zhèn)痛抗炎活性。十五年生厚樸干皮揮發(fā)油中已經(jīng)鑒定的化學(xué)成分占揮發(fā)油總量的 ％，其主要成分是桉醇 （ eudesmol） 及其異構(gòu)體，總含量高達(dá) ％；其次為丁香烯 （ caryophyllene） 及其異構(gòu)體，總含量為 ％ ；另外，實(shí)驗(yàn)表明在厚樸揮發(fā)油中有茅蒼術(shù)醇 （ hinesol） 存在。質(zhì)脆，易折斷，斷面纖維性。 3．現(xiàn)狀 厚樸為漸危樹種，是我國特有的珍貴樹種，在北亞熱帶地區(qū)分布較廣，樹皮 可 供藥用。花期 45 月，花與葉同時開放，單生 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 2 頁 枝頂，杯狀，白色，芳香，直徑約 15 厘米。 （ 2 周 ） 第二部分 列出實(shí)驗(yàn)方案及所需的藥品，試劑。 乙醇濃度對浸膏得率的影響最大，乙醇濃度在70%的時候浸膏得率最高 ； 其次是提取次數(shù)，提取次數(shù)越大，浸膏得率越高 ； 之后是乙醇 用量，用量 6 倍時最好 ； 影響最小的因素是提取時間，隨提取時間的延長，浸膏得率升高，但在 120min 提取時間后，再延長提取時間，浸膏得率反而降低， 因此 可以考慮縮短提取時間，以降低能耗，提高經(jīng)濟(jì)效益。其根系發(fā)達(dá)，生長快，萌生力強(qiáng)。厚樸皮層石細(xì)胞呈不規(guī)則分枝，多個成群，韌皮部射線寬 13 列細(xì)胞， 纖維多呈束，顆粒性，內(nèi)部紫色或棕色纖維性，可見發(fā)亮的細(xì)小結(jié)晶 [1]。 主要成分 厚樸中含有 5 種酚類物質(zhì)，主要成分為木蘭醇（ Magnolo1）和厚樸酚（ Honokid）及揮發(fā)油和生物堿，揮 發(fā)油中含 β桉油醇體及其異構(gòu)體。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 7 頁 圖 厚樸酚與和厚樸酚的分子結(jié)構(gòu)圖 3． 生物堿 厚樸樹皮中含有生物堿，王洪燕等對凹葉厚樸 Magnolia officinalis ，采用離子交換樹脂法提取總堿，硅膠柱層析法分離純化，最后分得 9個異喹啉生物堿，分別為 N降荷葉堿、 lirinidine、羅默堿、番荔枝堿、 lysicamine、鵝掌楸堿、瑞枯靈、 isosalsoline和Nmethylisosalsoline[。 3． 中樞性、末梢性肌松弛與抗痙攣?zhàn)饔? 厚樸常用于極度精神緊張、興奮狀態(tài)及原因不明振顫。構(gòu)效關(guān)系研究表明，聯(lián)苯不顯示活性，厚樸酚與和厚樸酚強(qiáng)大的抗齲齒菌作用是由于聯(lián)苯環(huán)上同時存在親水的烯丙基和親脂的酚羥基，因而使其黏附于變異鏈球菌和其他革蘭氏陽性菌的細(xì)胞所致口。方劑以半夏、川厚樸、甘草等，每日 1劑， 2次水煎服。給予厚樸三物湯加味治療，方藥厚樸 15 g，延胡索 10 g，木香 10 g，烏藥 10 g，失笑散 10 g。一些常見溶劑的親水性或親脂性的強(qiáng)弱順序表示如下所示 親脂性 石油醚＞苯＞氯仿＞乙醚＞乙酸乙酯＞丙酮＞乙醇＞甲醇＞水 中藥成分亦可通過結(jié)構(gòu)去估計(jì)它們的此類性質(zhì)。此法簡便，藥中大部分成分可被不同程度地提出，但含揮發(fā)性成分及有效成分遇熱易破壞的中藥不宜用此法，對含有多糖類中藥，煎煮后，藥液比較粘稠，過濾比 較困難。此工藝成本低，厚樸酚類提取率高，但雜質(zhì)較多 [20]。 75%乙醇， 70%乙醇， 65%乙醇。 Ki 表示任一列上水平號為 i（本實(shí)驗(yàn)中 i=1， 2 或 3）時，所對應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之和。將優(yōu)方案 A2B2C1D3 和較優(yōu)方案A1B2C1D3 與正交表中最好的第 6 號試驗(yàn) A2B3C1D2 作對比試驗(yàn)， 如表 所示， 若比第 6 號試驗(yàn)的試驗(yàn)結(jié)果更好，通常就可以認(rèn)為是真正的優(yōu)方案，否則第 6 號試驗(yàn)就是所需的優(yōu)方案。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，使用 20 目、 40 目的厚樸在抽濾過程中比 80 目的容易，但抽濾液仍舊不澄清，說明是由于厚樸酚溶解度的改變在抽濾液中析出的晶體，并不是濾渣中通過濾紙的固體。擴(kuò)大藥用部位研究，厚樸現(xiàn)應(yīng)用部位為枝、干、根皮及花蕾，種子供育苗用，而厚樸若以葉代替皮入藥，用量應(yīng)為皮 5 倍。同時溶劑乙醇價廉，適合工業(yè)生產(chǎn)。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 24 頁 應(yīng)用前景 厚樸是我國特有的珍貴中藥材。 討論 1． 原料的目數(shù)的篩選 在提取過程中發(fā)現(xiàn)，用 80 目篩篩過的厚樸，由于顆粒較細(xì)，在回流提取過程中藥材很粘稠，容易產(chǎn)生暴沸現(xiàn)象，尤其是在 2 次以上回流次數(shù)時尤其明顯，即使加入沸石也不容易解決。 所以，優(yōu)方案為 A2B2C1D3，即提取時間 120min，乙醇濃度 70%，乙醇用量 6 倍，提取次數(shù) 3 次。 鑒定過程如下， ① 用 5%FeCl的甲醇液滴定 ， 可使溶液變成藍(lán)黑色 ； ② 用間苯三酚鹽酸液滴定，可使溶液變成粉紅色 ； ③ 將試液 、 厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品、和厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品分別點(diǎn)于硅膠 G 薄層上，以苯 乙酸乙醋（ 8： 2）展開 ， 紫外燈下可見樣品液中厚樸酚的蘭紫色熒光舉點(diǎn)及和厚樸酚的紫紅色熒光斑點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)中采用乙醇作為提取試劑，采用連續(xù)回流提取的方法，按照正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表 L9（ 34）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，提取厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚，并通過極差分析，得到較優(yōu)的實(shí)驗(yàn)條件和各因素對實(shí)驗(yàn)的影響主次順序。經(jīng)過聚酰胺柱，先用 %、 %、1%NaOH 梯度沖洗，洗液用稀 HCl 溶液調(diào)至酸性，析出結(jié)晶，可將厚樸酚和厚樸酚分離，其 %%NaOH 洗脫部分為和厚樸酚， 1%NaOH 洗脫部分為厚樸酚 [19]。但浸出率較差，特別是用水為容易，其提取液易于發(fā)霉變質(zhì)，須注意加入適當(dāng)?shù)姆栏?劑。 文中提到的提取方法 為 溶劑提取法。） d；兩組比較差異均有顯著性（ P均﹤ ）。用桂枝、杏 仁各 15 g、白芍 30 g、厚樸 12 g每日 1劑，水煎服， 1日 3次，半個月 1療程，治 3療程，使肺動脈壓力減低，減低心臟的前后負(fù)荷。和厚樸酚對牙齒周圍的病原菌也具有顯著的抑制作用，馮瑾等研究了厚樸活性成分厚樸酚與和厚樸酚對 5種致齲菌的生長和產(chǎn)酸的影響， 5種致齲菌分別為變形鏈球菌、血鏈球菌、內(nèi)氏放線菌、粘性放線菌和乳酸桿菌。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 8 頁 厚樸酚對小鼠體內(nèi) A23187引起的胸膜炎具有很好的抗炎療效，厚樸酚在濃度 10 mg／ kg的劑量時可減輕 A23187引起的蛋白質(zhì)泄漏， A23187引起的分葉核白細(xì)胞的滲透被厚樸酚抑制，同時，厚樸酚減少了胸膜液體中的前列腺素和白三烯水平，厚樸酚 在濃度為 ／ L時還抑制由 A23187引起的凝血唔烷 B2（ TXB2）和 LTB4的形成。 表 十五年生厚樸干皮（未發(fā)汗）的揮發(fā)油成分分析結(jié)果 [10] No tR／ min 化合物名稱 分子式 相對含量／ % 1 βp inene C10H16 2 βmyrcene C10H16 3 Αphellandrene C10H16 4 pcymene C10H14 5 Dlimonene C10H16 6 eucalyptol C10H18O 7 linalool C10H18O 8 trans