【正文】 27 參考文獻(xiàn) ………………………………………………………….…………………………………... 28 . xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 1 頁(yè) 第 1 章 緒論 厚樸的研究概述 形態(tài)及習(xí)性 厚樸 拉丁名為 Magnolia officinalis Wils，中文名厚樸，拉丁科名為Magnoliaceae， 中文科名為木蘭科，其實(shí)物如圖 11 所示。厚樸為喜光的中生性樹(shù)種，幼齡期需蔭蔽；喜涼爽、濕潤(rùn)、多云霧、相對(duì)濕度大的氣候環(huán)境。內(nèi)表面紫棕色或深紫褐色，較平滑，具細(xì)密縱紋，劃之顯油痕。無(wú)機(jī)成分含 鈣、鈉、鉀、鎂、鐵、錳、鋅、銅等 [2]。 4． 其他 龍飛首次對(duì)厚樸葉化學(xué)成分進(jìn)行了分離鑒定。在超高劑量下， β桉葉油醇和二苯基乙內(nèi)酰脲鈉顯示了更強(qiáng)的阻止電休克癲癇發(fā)作作用， β桉葉油醇有望成為鎮(zhèn)癲劑或二苯基乙內(nèi)酰脲鈉抗癲療法中的協(xié)同治療劑 [4]。厚樸酚（ 1040μmol／ L）可抑制人肺鱗狀癌 CH27細(xì)胞的增殖， 80100μmol／ L時(shí)可誘導(dǎo)其死亡。疏郁化痰、軟堅(jiān)散結(jié)解毒是其治法，半夏厚樸湯療氣解郁，化痰散結(jié)，加夏枯草、連翹、香附是增強(qiáng)其軟堅(jiān)散結(jié)之功及消炎解毒之用 [8]。 厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚提取方法 概況 中藥材厚樸的有效成分和藥理作用是以厚樸酚、和厚樸酚為主，其提取方法也是針對(duì)以上兩種物質(zhì)。鞣質(zhì)是多羥基衍生物，列為親水性化合物。 （ 5） 連續(xù)提取法 為了彌補(bǔ)回流提取法中需要溶劑量大，操作較煩的不足，可采用連續(xù)提取法。此法效率高，質(zhì)量好，保留原藥特性，是先進(jìn)的工業(yè)提取方法 [20,21,22]。 如表 表 乙醇濃度的配置 溶液終濃度（ %） 95%乙醇（ ml） 65 70 368 75 儀器設(shè)備 1． 玻璃儀器 圓底燒瓶 500ml（ 5 個(gè)） 燒杯 500ml（ 2 個(gè)）、 250ml（ 2 個(gè)） xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 16 頁(yè) 燒杯 1000ml（ 2 個(gè)） 錐形瓶 250ml 玻璃棒 無(wú) 量筒 200ml， 500ml 球形冷凝管 無(wú) 抽濾瓶 250ml 2． 電子儀器 罐擺式高速中藥材粉碎機(jī) 浙江省瑞安市東源醫(yī)療設(shè)備機(jī)械廠 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏 實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司 標(biāo)準(zhǔn)樣篩 華東篩網(wǎng)廠 電子精密天平 梅特勒 托利多儀器（上海）有限公司 柱塞式計(jì)量泵 杭州華黎泵業(yè)有限公司 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 RE52A 上海亞榮生化儀器廠 集熱式恒溫加熱磁力攪拌器 鞏義市英峪予華儀器廠 循環(huán)水式真空泵 鞏義市英峪予華儀器廠 冰箱 海爾集團(tuán) 3． 其他 稱(chēng)量紙，軟木塞，布氏漏斗，鐵架臺(tái)，夾子 ，鑰匙。例如，在本實(shí)驗(yàn)中 s=3，在 A 因素所在的第 1 列中， k1=／ 3=。都比試驗(yàn)號(hào) 6 的浸膏得率高，從縮短了提取時(shí)間降低了能耗角度考慮，可以采取 A1B2C1D3 的較優(yōu)方案，即提取時(shí)間 60min，乙醇濃度 70%，乙醇用量 6 倍，提取次數(shù) 3 次。因此試驗(yàn)選取了不含葉綠素的部位，根部。 當(dāng)前，通過(guò)各種技術(shù)手段尋找及研究傳統(tǒng)中藥中活性成分的工作已逐漸成為國(guó)內(nèi)外關(guān)注的重點(diǎn)。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 25 頁(yè) 結(jié) 論 中藥厚樸為木蘭科木蘭屬喬木 (Magnolia officinalis Rehd． et Wils)凹葉厚樸 (Magnolia officinalis Rehd． et Wils． var． biloba Rehd． et Wil)的干燥樹(shù)皮、根皮以及枝皮， 具有行氣燥濕、降逆平喘之功效，用于 治療 脘腹脹痛、宿食不消、嘔吐瀉痢、氣逆喘咳 等疾病， 其主要活性成分 為 厚樸酚與和厚樸酚 (honokiol)，它具有多種藥理作用，包括抗炎，抗心律失常，抗癲癇，抗血小板，抑制肌肉收縮和抗菌作用，此外還可以抑制氮的氧化產(chǎn)物，抑制腫瘤壞死因子 α的表達(dá)活性等。 3． 在需要多次回流的實(shí)驗(yàn)組中，抽濾時(shí)可以暫不關(guān)閉水浴鍋，而將其溫度變化速度調(diào)節(jié)至最小而不關(guān)閉，可以節(jié)省下一次回流時(shí)水浴鍋中水加熱的時(shí)間。 圖 效應(yīng)曲線(xiàn)圖，因素為乙醇用量 由趨勢(shì)圖可以看出，隨乙醇用量水平的變動(dòng)，浸膏得率在降低， 120ml 時(shí)，浸膏得率最高。 2． 優(yōu)方案的確定 優(yōu)方案是指在所做的試驗(yàn)范圍內(nèi)，各因素較優(yōu)的水平組合。 L9（ 34）正交設(shè)計(jì)表如表 所示。 本論文通過(guò)對(duì)正交設(shè)計(jì)表中的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行正交分析，得到各因素的主次關(guān)系， 可為厚樸有效成分工業(yè)化提取工藝的設(shè)計(jì)提供理論依據(jù) ，指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。 4． 乙醇提取法 取厚樸粗粉，用 65%乙醇（乙醇量為藥材量的 5倍），加熱回流3次，每次 2 h，合并提取液。同時(shí)，原料的粉碎度、提取時(shí)間、提取溫度、設(shè)備條件等因素也都能影響提取效率，必須加以考慮。除溶劑外還可利用其他化學(xué)試劑。） d；對(duì)照組分別為（ 177。其中，在抗菌作用方面，厚樸酚對(duì)格蘭氏陽(yáng)性菌、耐酸性菌、絲狀真菌有顯著的抗菌活性。厚樸的初提成分厚樸堿與厚樸揮發(fā)油飽和水溶液對(duì)金黃色葡萄球菌，疊球菌和枯草桿菌有一定的抑菌作用，厚樸對(duì)肺炎雙球菌和痢疾桿菌也有抗菌活性。 2． 鎮(zhèn)痛抗炎藥理作用 厚樸為芳香化濕中藥，辛能散結(jié)；苦能燥濕、溫?zé)犰铒L(fēng)寒，具有鎮(zhèn)痛抗炎活性。十五年生厚樸干皮揮發(fā)油中已經(jīng)鑒定的化學(xué)成分占揮發(fā)油總量的 ％，其主要成分是桉醇 （ eudesmol） 及其異構(gòu)體，總含量高達(dá) ％；其次為丁香烯 （ caryophyllene） 及其異構(gòu)體，總含量為 ％ ；另外，實(shí)驗(yàn)表明在厚樸揮發(fā)油中有茅蒼術(shù)醇 （ hinesol） 存在。質(zhì)脆，易折斷，斷面纖維性。 3．現(xiàn)狀 厚樸為漸危樹(shù)種，是我國(guó)特有的珍貴樹(shù)種，在北亞熱帶地區(qū)分布較廣，樹(shù)皮 可 供藥用?；ㄆ?45 月，花與葉同時(shí)開(kāi)放，單生 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 2 頁(yè) 枝頂，杯狀，白色，芳香，直徑約 15 厘米。 （ 2 周 ） 第二部分 列出實(shí)驗(yàn)方案及所需的藥品，試劑。 乙醇濃度對(duì)浸膏得率的影響最大，乙醇濃度在70%的時(shí)候浸膏得率最高 ； 其次是提取次數(shù)，提取次數(shù)越大，浸膏得率越高 ； 之后是乙醇 用量，用量 6 倍時(shí)最好 ； 影響最小的因素是提取時(shí)間，隨提取時(shí)間的延長(zhǎng)，浸膏得率升高，但在 120min 提取時(shí)間后，再延長(zhǎng)提取時(shí)間，浸膏得率反而降低， 因此 可以考慮縮短提取時(shí)間，以降低能耗，提高經(jīng)濟(jì)效益。其根系發(fā)達(dá)，生長(zhǎng)快，萌生力強(qiáng)。厚樸皮層石細(xì)胞呈不規(guī)則分枝，多個(gè)成群，韌皮部射線(xiàn)寬 13 列細(xì)胞， 纖維多呈束，顆粒性，內(nèi)部紫色或棕色纖維性，可見(jiàn)發(fā)亮的細(xì)小結(jié)晶 [1]。 主要成分 厚樸中含有 5 種酚類(lèi)物質(zhì)，主要成分為木蘭醇（ Magnolo1）和厚樸酚（ Honokid）及揮發(fā)油和生物堿，揮 發(fā)油中含 β桉油醇體及其異構(gòu)體。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 7 頁(yè) 圖 厚樸酚與和厚樸酚的分子結(jié)構(gòu)圖 3． 生物堿 厚樸樹(shù)皮中含有生物堿，王洪燕等對(duì)凹葉厚樸 Magnolia officinalis ，采用離子交換樹(shù)脂法提取總堿，硅膠柱層析法分離純化，最后分得 9個(gè)異喹啉生物堿，分別為 N降荷葉堿、 lirinidine、羅默堿、番荔枝堿、 lysicamine、鵝掌楸堿、瑞枯靈、 isosalsoline和Nmethylisosalsoline[。 3． 中樞性、末梢性肌松弛與抗痙攣?zhàn)饔? 厚樸常用于極度精神緊張、興奮狀態(tài)及原因不明振顫。構(gòu)效關(guān)系研究表明，聯(lián)苯不顯示活性，厚樸酚與和厚樸酚強(qiáng)大的抗齲齒菌作用是由于聯(lián)苯環(huán)上同時(shí)存在親水的烯丙基和親脂的酚羥基，因而使其黏附于變異鏈球菌和其他革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞所致口。方劑以半夏、川厚樸、甘草等，每日 1劑， 2次水煎服。給予厚樸三物湯加味治療，方藥厚樸 15 g，延胡索 10 g，木香 10 g，烏藥 10 g，失笑散 10 g。一些常見(jiàn)溶劑的親水性或親脂性的強(qiáng)弱順序表示如下所示 親脂性 石油醚＞苯＞氯仿＞乙醚＞乙酸乙酯＞丙酮＞乙醇＞甲醇＞水 中藥成分亦可通過(guò)結(jié)構(gòu)去估計(jì)它們的此類(lèi)性質(zhì)。此法簡(jiǎn)便，藥中大部分成分可被不同程度地提出，但含揮發(fā)性成分及有效成分遇熱易破壞的中藥不宜用此法，對(duì)含有多糖類(lèi)中藥，煎煮后，藥液比較粘稠，過(guò)濾比 較困難。此工藝成本低，厚樸酚類(lèi)提取率高，但雜質(zhì)較多 [20]。 75%乙醇， 70%乙醇， 65%乙醇。 Ki 表示任一列上水平號(hào)為 i（本實(shí)驗(yàn)中 i=1， 2 或 3）時(shí)，所對(duì)應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之和。將優(yōu)方案 A2B2C1D3 和較優(yōu)方案A1B2C1D3 與正交表中最好的第 6 號(hào)試驗(yàn) A2B3C1D2 作對(duì)比試驗(yàn)， 如表 所示， 若比第 6 號(hào)試驗(yàn)的試驗(yàn)結(jié)果更好，通常就可以認(rèn)為是真正的優(yōu)方案，否則第 6 號(hào)試驗(yàn)就是所需的優(yōu)方案。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，使用 20 目、 40 目的厚樸在抽濾過(guò)程中比 80 目的容易，但抽濾液仍舊不澄清，說(shuō)明是由于厚樸酚溶解度的改變?cè)诔闉V液中析出的晶體，并不是濾渣中通過(guò)濾紙的固體。擴(kuò)大藥用部位研究，厚樸現(xiàn)應(yīng)用部位為枝、干、根皮及花蕾，種子供育苗用，而厚樸若以葉代替皮入藥，用量應(yīng)為皮 5 倍。同時(shí)溶劑乙醇價(jià)廉，適合工業(yè)生產(chǎn)。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 24 頁(yè) 應(yīng)用前景 厚樸是我國(guó)特有的珍貴中藥材。 討論 1． 原料的目數(shù)的篩選 在提取過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，用 80 目篩篩過(guò)的厚樸，由于顆粒較細(xì)，在回流提取過(guò)程中藥材很粘稠，容易產(chǎn)生暴沸現(xiàn)象，尤其是在 2 次以上回流次數(shù)時(shí)尤其明顯，即使加入沸石也不容易解決。 所以，優(yōu)方案為 A2B2C1D3，即提取時(shí)間 120min，乙醇濃度 70%，乙醇用量 6 倍，提取次數(shù) 3 次。 鑒定過(guò)程如下， ① 用 5%FeCl的甲醇液滴定 ， 可使溶液變成藍(lán)黑色 ； ② 用間苯三酚鹽酸液滴定，可使溶液變成粉紅色 ； ③ 將試液 、 厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品、和厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品分別點(diǎn)于硅膠 G 薄層上，以苯 乙酸乙醋（ 8： 2）展開(kāi) ， 紫外燈下可見(jiàn)樣品液中厚樸酚的蘭紫色熒光舉點(diǎn)及和厚樸酚的紫紅色熒光斑點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)中采用乙醇作為提取試劑，采用連續(xù)回流提取的方法，按照正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表 L9（ 34）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，提取厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚，并通過(guò)極差分析，得到較優(yōu)的實(shí)驗(yàn)條件和各因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響主次順序。經(jīng)過(guò)聚酰胺柱，先用 %、 %、1%NaOH 梯度沖洗，洗液用稀 HCl 溶液調(diào)至酸性，析出結(jié)晶，可將厚樸酚和厚樸酚分離，其 %%NaOH 洗脫部分為和厚樸酚， 1%NaOH 洗脫部分為厚樸酚 [19]。但浸出率較差，特別是用水為容易，其提取液易于發(fā)霉變質(zhì)，須注意加入適當(dāng)?shù)姆栏?劑。 文中提到的提取方法 為 溶劑提取法。） d；兩組比較差異均有顯著性（ P均﹤ ）。用桂枝、杏 仁各 15 g、白芍 30 g、厚樸 12 g每日 1劑，水煎服， 1日 3次，半個(gè)月 1療程，治 3療程，使肺動(dòng)脈壓力減低，減低心臟的前后負(fù)荷。和厚樸酚對(duì)牙齒周?chē)牟≡簿哂酗@著的抑制作用，馮瑾等研究了厚樸活性成分厚樸酚與和厚樸酚對(duì) 5種致齲菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)酸的影響， 5種致齲菌分別為變形鏈球菌、血鏈球菌、內(nèi)氏放線(xiàn)菌、粘性放線(xiàn)菌和乳酸桿菌。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 8 頁(yè) 厚樸酚對(duì)小鼠體內(nèi) A23187引起的胸膜炎具有很好的抗炎療效，厚樸酚在濃度 10 mg／ kg的劑量時(shí)可減輕 A23187引起的蛋白質(zhì)泄漏， A23187引起的分葉核白細(xì)胞的滲透被厚樸酚抑制，同時(shí)，厚樸酚減少了胸膜液體中的前列腺素和白三烯水平，厚樸酚 在濃度為 ／ L時(shí)還抑制由 A23187引起的凝血唔烷 B2（ TXB2）和 LTB4的形成。 表 十五年生厚樸干皮（未發(fā)汗）的揮發(fā)油成分分析結(jié)果 [10] No tR／ min 化合物名稱(chēng) 分子式 相對(duì)含量／ % 1 βp inene C10H16 2 βmyrcene C10H16 3 Αphellandrene C10H16 4 pcymene C10H14 5 Dlimonene C10H16 6 eucalyptol C10H18O 7 linalool C10H18O 8 trans