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厚樸中厚樸酚與和厚樸酚提取工藝研究畢業(yè)論文(文件)

 

【正文】 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 19 頁(yè) 例如,在表 中,在 B 因素所在的第 2 列上,第 1, 4, 7 號(hào)試驗(yàn)中 B 取 B1 水平,所以 K1 為第 1, 4, 7 號(hào)試驗(yàn)結(jié)果之和,即 K1=++=;第 2, 5, 8號(hào)試驗(yàn)中 B 取 B2 水平,所以 K2 為第 2 , 5 , 8 號(hào)試 驗(yàn)結(jié)果 之和,即K2=++=;第 3, 6, 9 號(hào)試驗(yàn)中 B 取 B3 水平,所以 K3 為第 3, 6, 9號(hào)試驗(yàn)結(jié)果之和,即 K3=++11=;同理可以計(jì)算出其他列中的 Ki,結(jié)果如表 所示。 R 稱為極差,在任一列上 R=max{K1, K2, K3}min{K1, K2, K3},或 R=max{k1,k2, k3}min{k1, k2, k3}。 2. 優(yōu)方案的確定 優(yōu)方案是指在所做的試驗(yàn)范圍內(nèi),各因素較優(yōu)的水平組合。 另外,實(shí)際確定優(yōu)方案時(shí),還應(yīng)區(qū)分因素的主次,對(duì)于主要因素,一定要按有利于指標(biāo)的要切選取最好的水平,而對(duì)于不重要的因素,由于其水平改變對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響較小,則可以根據(jù)有利于降低消耗、提高效率等目的來(lái)考慮別的水平。若 出現(xiàn)后一種情況,一般來(lái)說(shuō)可能是沒(méi)有考慮交互作用或者試驗(yàn)誤差較大所引起的,需要作進(jìn)一步的研究,可能還有提取試驗(yàn)指標(biāo)的能力。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 21 頁(yè) 圖 效應(yīng)曲線圖,因素為提取時(shí)間 由趨勢(shì)圖可以看出,隨提取時(shí)間水平的變動(dòng),浸膏得率在提高, 120min 時(shí)最高,之后得率降低。 圖 效應(yīng)曲線圖,因素為乙醇用量 由趨勢(shì)圖可以看出,隨乙醇用量水平的變動(dòng),浸膏得率在降低, 120ml 時(shí),浸膏得率最高。抽濾時(shí),過(guò)濾的溶液不是很澄清 ,懷疑是由于顆粒細(xì), 而濾紙孔徑有限, 但這種輕盈 也 可能 與厚樸酚的水溶性有關(guān),厚樸酚在沸騰的乙醇中溶解度大,隨著抽濾的進(jìn)行,溫度降低,在抽濾瓶中可能出現(xiàn)重結(jié)晶的想象。 2. 原料厚樸部位的篩選 原料厚樸選取的部位對(duì)試驗(yàn)也會(huì)產(chǎn)生一定的影響。 提取過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題 1. 在提取過(guò)程中由于厚樸比較粘稠,沸點(diǎn)又較高,在回流過(guò)程中 需 添加沸石,防止暴沸現(xiàn)象發(fā)生。 3. 在需要多次回流的實(shí)驗(yàn)組中,抽濾時(shí)可以暫不關(guān)閉水浴鍋,而將其溫度變化速度調(diào)節(jié)至最小而不關(guān)閉,可以節(jié)省下一次回流時(shí)水浴鍋中水加熱的時(shí)間。長(zhǎng)期以來(lái),藥用厚樸主要利用野生資源,因此,一方面因資源過(guò)度消耗,日益枯竭被列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)中藥材,另一方面因利用野生資源,與大多數(shù)中藥材一樣,存在有效成分含量低、不穩(wěn)定,難以滿足中藥現(xiàn)代化、國(guó)際化對(duì)植物藥品和產(chǎn)品提出的 “安全、有效、可控、穩(wěn)定 ”的要求。而厚樸的木材目前尚未供藥用,有望在擴(kuò)大藥源、改進(jìn)栽培技術(shù)。藥理活性上,主要集中在厚樸酚與和厚樸酚上,而對(duì)厚樸中其它成分藥理活性的研究不夠深入,因此,應(yīng)加強(qiáng)厚樸的化學(xué)成分研究,同時(shí)對(duì)除厚樸酚與和厚樸酚外的化合物進(jìn)行全面的活性篩選,以使厚樸這一寶貴的中藥資源具有更好的利用價(jià)值。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 25 頁(yè) 結(jié) 論 中藥厚樸為木蘭科木蘭屬喬木 (Magnolia officinalis Rehd. et Wils)凹葉厚樸 (Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rehd. et Wil)的干燥樹(shù)皮、根皮以及枝皮, 具有行氣燥濕、降逆平喘之功效,用于 治療 脘腹脹痛、宿食不消、嘔吐瀉痢、氣逆喘咳 等疾病, 其主要活性成分 為 厚樸酚與和厚樸酚 (honokiol),它具有多種藥理作用,包括抗炎,抗心律失常,抗癲癇,抗血小板,抑制肌肉收縮和抗菌作用,此外還可以抑制氮的氧化產(chǎn)物,抑制腫瘤壞死因子 α的表達(dá)活性等。 本 論文 采用乙醇回流提取的方法對(duì)厚樸進(jìn)行了提取和分離 , 以 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)為工具,采用 4 因素 3 水平 9 次實(shí)驗(yàn)來(lái)對(duì)各個(gè)因素進(jìn)行研究,以浸膏得率作為質(zhì)量指標(biāo),考察 醇法提取 厚樸中厚樸酚與和厚樸酚的提取工藝條件,著重研究乙醇濃度、回流時(shí)間、提取次數(shù)、乙醇用量等因素對(duì)浸膏得率的影響,得到其較優(yōu)的提取工藝條件為提取時(shí)間 120min,乙醇濃度 70%,乙醇用量 6 倍。其中乙醇提取法,根據(jù)文獻(xiàn)記載,提取結(jié)果中厚樸酚含量高,厚樸浸膏收率高,是傳統(tǒng)的工業(yè)提取方法。具有高經(jīng)濟(jì)效益,小環(huán)境污染,設(shè)備易維護(hù)等優(yōu)點(diǎn)。 當(dāng)前,通過(guò)各種技術(shù)手段尋找及研究傳統(tǒng)中藥中活性成分的工作已逐漸成為國(guó)內(nèi)外關(guān)注的重點(diǎn)。目前,雖厚樸栽培面積大,資源分布豐富,由于生長(zhǎng)速度慢,樸林更新時(shí)間長(zhǎng),加之社會(huì)需求量大,目前市場(chǎng) 供應(yīng)日趨緊張,現(xiàn)狀一時(shí)難以滿足。 5. 在旋蒸時(shí)要控制真空度,溫度,避免由于沸騰使液體沖入回收瓶中,如果發(fā)生就需要重新旋蒸,在旋蒸快結(jié)束時(shí),回收瓶中無(wú)液滴滴下要及時(shí)終 止,如果再繼續(xù)旋蒸,此時(shí)浸膏中的液體已蒸發(fā)完,會(huì)使浸膏糊化,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。 2. 由于藥材粘度大,在抽濾時(shí),濾紙可能會(huì)破,經(jīng)過(guò)與同學(xué)的探討,發(fā)現(xiàn)解決辦法可以 在抽濾時(shí)增加濾紙層數(shù)。因此試驗(yàn)選取了不含葉綠素的部位,根部。 表 原料的目數(shù)的篩選對(duì)比試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)號(hào) 因素 目數(shù) A B C D 1 1 1 1 1 20 2 1 1 1 1 40 3 1 1 1 1 80 注 實(shí)驗(yàn)號(hào) 1 中即 20 目的提取實(shí)驗(yàn)采用 200ml 的乙醇用量,因?yàn)?120ml 的乙醇不能將藥品充 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 23 頁(yè) 分浸泡,會(huì)產(chǎn)生糊化。 圖 效應(yīng)曲線圖,因素為提取次數(shù) 由趨勢(shì)圖可以看出,隨提取次數(shù)水平的變動(dòng),浸膏得率在提高, 2 次時(shí)最高,之后緩慢提升。 圖 效應(yīng)曲線圖,因素為乙醇濃度 由趨勢(shì)圖可以看出,隨乙醇濃度水平的變動(dòng),浸膏得率在提高, 70%時(shí)最高,之后得率降低。都比試驗(yàn)號(hào) 6 的浸膏得率高,從縮短了提取時(shí)間降低了能耗角度考慮,可以采取 A1B2C1D3 的較優(yōu)方案,即提取時(shí)間 60min,乙醇濃度 70%,乙醇用量 6 倍,提取次數(shù) 3 次。 3. 進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn),作進(jìn)一步的分析 上述優(yōu)方案是通過(guò)理論分析得到,但它實(shí)際上是不是真正的優(yōu)方案還需要作進(jìn)一步的驗(yàn)證。 在本實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)指標(biāo)是浸膏得率,指標(biāo)越大越 好,所以應(yīng)挑選每個(gè)因素的 K1,K2, K3 中最大的值對(duì)應(yīng)的那個(gè)水平,由于 A 因素列中 K2K3K1; B 因素列中K2K3K1; C 因素列中 K1K3K2; D 因素列中 K3K2K1。 一般來(lái)說(shuō),各列的極差是不相等的,這說(shuō)明各因素的水平改變對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響是不相同的,極差越大,表示該列因素的數(shù)值在試驗(yàn)范圍內(nèi)的變化,會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)指標(biāo)在數(shù)值上更大的改變,所以極差最大的那一列,就是因素的水平對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響最大的因素,也就是最主要的因素。例如,在本實(shí)驗(yàn)中 s=3,在 A 因素所在的第 1 列中, k1=/ 3=。 表 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)號(hào) 因素 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 A B C D 浸膏得率( %) 浸膏重量 /g 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 11 K1 K2 K3 k1 k2 k3 極差 R 因素主 → 次 B D C A 結(jié)果 分析 1. 極差分析 , 確定因素的主次順序 首先解釋表 中引入的三個(gè)符號(hào) Ki, ki,R。厚樸酚,和厚樸酚均各顯一班點(diǎn) 。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 17 頁(yè) 5.. 提取厚樸酚, 計(jì)算厚樸浸膏收率。 如表 表 乙醇濃度的配置 溶液終濃度( %) 95%乙醇( ml) 65 70 368 75 儀器設(shè)備 1. 玻璃儀器 圓底燒瓶 500ml( 5 個(gè)) 燒杯 500ml( 2 個(gè))、 250ml( 2 個(gè)) xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 16 頁(yè) 燒杯 1000ml( 2 個(gè)) 錐形瓶 250ml 玻璃棒 無(wú) 量筒 200ml, 500ml 球形冷凝管 無(wú) 抽濾瓶 250ml 2. 電子儀器 罐擺式高速中藥材粉碎機(jī) 浙江省瑞安市東源醫(yī)療設(shè)備機(jī)械廠 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏 實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司 標(biāo)準(zhǔn)樣篩 華東篩網(wǎng)廠 電子精密天平 梅特勒 托利多儀器(上海)有限公司 柱塞式計(jì)量泵 杭州華黎泵業(yè)有限公司 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 RE52A 上海亞榮生化儀器廠 集熱式恒溫加熱磁力攪拌器 鞏義市英峪予華儀器廠 循環(huán)水式真空泵 鞏義市英峪予華儀器廠 冰箱 海爾集團(tuán) 3. 其他 稱量紙,軟木塞,布氏漏斗,鐵架臺(tái),夾子 ,鑰匙。 主要試劑 95%乙醇(分析純),蒸餾水。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 15 頁(yè) 第 2 章 厚樸中厚樸酚與和厚樸酚提取工藝研究 實(shí)驗(yàn) 原理 厚樸酚與和厚樸酚屬于酚類物質(zhì),由于 酚羥基的存在,其易溶于水、醇等極性溶劑。 厚樸酚與和厚樸酚 (honokiol)為其主要活性成分之一,它具有多種藥理作用,包括抗炎,抗心律失常,抗癲癇,抗血小板,抑制肌肉收縮和抗菌作用,此外還可以抑制氮的氧化產(chǎn)物,抑制腫瘤壞死因子 α的表達(dá)活性等。此法效率高,質(zhì)量好,保留原藥特性,是先進(jìn)的工業(yè)提取方法 [20,21,22]。將藥液過(guò)樹(shù)脂柱,用 95%、 75%乙醇先后洗脫(最后洗脫液近無(wú)色),合并洗液,濃得結(jié)晶。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 13 頁(yè) 聚酰胺分離提取法 取藥材粉末,用乙醇提取,回收乙醇得稠膏。L1的堿溶液,放置 24 h,離心過(guò)濾,將濾液用乙醚萃 取 3次,水層用稀 HCl溶液調(diào)至 pH23,用乙醚再萃取 5次,合并醚液后用 2%Na2CO3洗滌并用無(wú)水乙醇 Na2SO4干燥,放置過(guò)夜,揮去醚液得結(jié)晶。 ( 5) 連續(xù)提取法 為了彌補(bǔ)回流提取法中需要溶劑量大,操作較煩的不足,可采用連續(xù)提取法。 ( 3) 煎煮法 煎煮法是將中藥粗粉加水加熱煮沸,將中藥成分提取出來(lái)的方法。本法適用于有效成分遇熱不易破壞以及含多量淀粉、樹(shù)膠、果膠、粘液質(zhì)的中藥的提取。這一問(wèn)題在復(fù)方研究中更為突出。鞣質(zhì)是多羥基衍生物,列為親水性化合物。溶劑可分為水、親水性溶劑和親脂性有機(jī)溶劑。但無(wú)論用何種方法,首先應(yīng)掌握中藥中所含各種成分的理化性質(zhì) ,尤其是對(duì)于不同溶劑包括酸、堿等的溶解性能,以及各種提取、分離的原理,即可靈活運(yùn)用。得粗提物干燥后,用環(huán)己烷,索氏提取,提取液濃縮后放冷析出白色結(jié)晶 [16]。 厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚提取方法 概況 中藥材厚樸的有效成分和藥理作用是以厚樸酚、和厚樸酚為主,其提取方法也是針對(duì)以上兩種物質(zhì)。方中厚樸行氣導(dǎo)滯,再加理氣的延胡索、木香使之與厚樸相得益彰;白芍緩急止痛;桃仁善治下焦蓄血;失笑散活血止痛。) kg和( 177。) h,術(shù)后體重下降( 177。疏郁化痰、軟堅(jiān)散結(jié)解毒是其治法,半夏厚樸湯療氣解郁,化痰散結(jié),加夏枯草、連翹、香附是增強(qiáng)其軟堅(jiān)散結(jié)之功及消炎解毒之用 [8]。慢性咽炎突出癥狀表現(xiàn)均有咽中異物感、舌苔白膩、脈弦滑等 , 而這些癥狀正是半夏厚樸湯的辨證要點(diǎn)。 2. 治療慢性肺心痛 患者肺氣腫體征,咳痰氣促,心律失常,肺動(dòng)脈高壓和右心室增大,桂枝加厚樸杏子湯能溫中散寒,活血逐淤,助心陽(yáng)化水飲,疏通絡(luò)脈,改 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 10 頁(yè) 善微循環(huán)。 臨床研究 1. 厚樸防齲 齲病是一種多因素的慢性細(xì)菌性疾病,口腔內(nèi)主要致齲細(xì)菌為 變形鏈球菌,對(duì)主要致齲菌為變形鏈球菌有抑制作用的中藥,其中作用力最強(qiáng)的是厚樸。厚樸酚( 1040μmol/ L)可抑制人肺鱗狀癌 CH27細(xì)胞的增殖, 80100μmol/ L時(shí)可誘導(dǎo)其死亡。 Ho等人的研究表明,厚樸酚與和厚樸酚對(duì)牙周致病菌伴放線放線桿菌、牙齦卟啉菌、中問(wèn)普氏
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