【正文】 聯(lián)苯不顯示活性，厚樸酚與和厚樸酚強(qiáng)大的抗齲齒菌作用是由于聯(lián)苯環(huán)上同時存在親水的烯丙基和親脂的酚羥基，因而使其黏附于變異鏈球菌和其他革蘭氏陽性菌的細(xì)胞所致口。 6． 抗腫瘤作用 厚樸酚與和厚樸酚在體內(nèi)和體外均被發(fā)現(xiàn)可以抑制新生血管及腫瘤生長，并且在有效劑量范圍內(nèi)能夠被宿主很好的耐受，其作用機(jī)制是在人的內(nèi)皮細(xì)胞通過干擾血管內(nèi)皮生長因子受體 2（ VEGFR2）的磷酸化來抑制血管生成 [27,28]。厚樸酚（ 3l0μmol／ L）能抑 制人癌細(xì)胞（ COLO205和 HepG2）的增殖，100μmol／ L時可使 COLO205和 HepG2細(xì)胞出現(xiàn)凋亡。 Fong等通過在體外使用人早幼粒白血病細(xì)胞系 HL60進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察到和厚樸酚在小劑量的 l， 25二羥維生素 D3和全反式維甲酸的協(xié)同下可以作為細(xì)胞分化的強(qiáng)化因子，增強(qiáng)人早幼粒白血病細(xì)胞系HL60細(xì)胞的分化作用 [29] 。厚樸的有效成分為厚樸酚，厚樸酚的藥理作用主要有抗菌、鎮(zhèn)靜中樞神經(jīng)、肌肉松弛等。特別是變形鏈球菌有更加顯著的抗菌作用，其抗菌活性強(qiáng)于典型的抗菌生物堿，而且 [6]。用桂枝、杏 仁各 15 g、白芍 30 g、厚樸 12 g每日 1劑，水煎服， 1日 3次，半個月 1療程，治 3療程，使肺動脈壓力減低，減低心臟的前后負(fù)荷。 3． 厚樸治慢性咽炎 健脾行氣，化痰散結(jié)，養(yǎng)陰利咽。方劑以半夏、川厚樸、甘草等，每日 1劑， 2次水煎服。 4． 厚樸湯治療頸淋巴結(jié)腫大 頸淋巴結(jié)腫大，多由氣、郁、痰、火互結(jié)所致。 5． 促進(jìn)胃十二指腸術(shù)后胃腸功能恢復(fù) 胃、十二指腸術(shù)后患者 68例，隨機(jī)分為兩組。結(jié)果為治療組平均排氣時間為（ 177。） kg，術(shù)后住院時間為（ 177。） h、（ 177。） d；兩組比較差異均有顯著性（ P均﹤ ）。 6． 厚樸三物湯治療腸粘連 腸粘連是腹部手術(shù)后的常見并發(fā)癥，中醫(yī)把腸粘連歸入腹痛腹脹范疇，病機(jī)為 腑氣不通，氣血阻滯。給予厚樸三物湯加味治療，方藥厚樸 15 g，延胡索 10 g，木香 10 g，烏藥 10 g，失笑散 10 g。如此則腑易通，氣乃順，血得和而諸癥愈。以下介紹其提取方法。加入 HCl 溶液調(diào)至 pH23，靜置，收集析出的沉淀，用蒸餾水洗滌沉淀物至 pH67。 溶劑提取法 中藥成分的提取、分離和精制，一般以利用溶劑為多，溶劑不同，浸出的成分也不同。近年來，物理方法，如色譜、逆流分溶進(jìn)展很快，縮短了對中藥有效成分研究的周期。 文中提到的提取方法 為 溶劑提取法。 1． 溶劑提取法的原理 中藥成分在溶劑中的溶解度直接與溶劑性質(zhì)有關(guān)。一些常見溶劑的親水性或親脂性的強(qiáng)弱順序表示如下所示 親脂性 石油醚＞苯＞氯仿＞乙醚＞乙酸乙酯＞丙酮＞乙醇＞甲醇＞水 中藥成分亦可通過結(jié)構(gòu)去估計它們的此類性質(zhì)。生物堿是親脂性化合物，而生物堿鹽，能夠離子化，加大了極性，就變成了親水性化合物。油脂、揮發(fā)油、蠟、脂溶性色素都是強(qiáng)親脂性成分等等。但有時又可能相互生成難溶性化合物，改變了欲提 取成分的溶解性能而提取不出。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 12 頁 2． 溶劑提取法的提取方法 用溶劑提取中藥成分，常用浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)提取法等。 （ 1） 浸漬法 浸漬法是將處理過的藥材，用適當(dāng)?shù)娜軇┰诔鼗驕責(zé)幔?6080℃ ）的情況下浸漬一溶出七種成分。但浸出率較差，特別是用水為容易，其提取液易于發(fā)霉變質(zhì)，須注意加入適當(dāng)?shù)姆栏?劑。當(dāng)溶劑滲進(jìn)要分溶出成分比重加大而向下移動時，上層的溶劑或稀浸液便置換其位置，造成良好的濃度差，使擴(kuò)散能較好地進(jìn)行，故浸出效率較高，浸出液較澄清，但溶劑消耗量大、費(fèi)時長、操作仍嫌麻煩。此法簡便，藥中大部分成分可被不同程度地提出，但含揮發(fā)性成分及有效成分遇熱易破壞的中藥不宜用此法，對含有多糖類中藥，煎煮后，藥液比較粘稠，過濾比 較困難。但受熱易破壞的成分不宜用此法，且溶劑消耗量仍大，操作亦麻煩。實(shí)驗(yàn)室常用脂肪提取器或稱索氏提取器。 3． 水提取法 取厚樸粗粉，加 510倍量的水，揮發(fā)揮發(fā)油后用 NaOH調(diào)成 mol此結(jié)晶再用水重結(jié)晶 1次，產(chǎn)物得率為 4%左右，得率較少 [17]。結(jié)果表明此方法厚樸酚含量高，厚樸浸膏收率高，是傳統(tǒng)的工業(yè)提取方法 [18]。經(jīng)過聚酰胺柱，先用 %、 %、1%NaOH 梯度沖洗，洗液用稀 HCl 溶液調(diào)至酸性，析出結(jié)晶，可將厚樸酚和厚樸酚分離，其 %%NaOH 洗脫部分為和厚樸酚， 1%NaOH 洗脫部分為厚樸酚 [19]。L1HCl溶液調(diào) pH 至 7。此工藝成本低，厚樸酚類提取率高，但雜質(zhì)較多 [20]。一定時間后，有效成分通過分離柱降壓解析，得淡黃色膏狀物，總厚樸酚提取率為80%。 本論文研究目的、內(nèi)容及其意義 研究目的 從 厚樸所具有的重要醫(yī)學(xué)價值 出發(fā)，針對 醇提法提取厚樸中有效成分（主要為厚樸酚與和厚樸酚） 的各種 因素 進(jìn)行研究與分析， 通過研究如何改變實(shí)驗(yàn)條件提高厚樸提取的浸膏得率，學(xué)習(xí)在生產(chǎn)中改進(jìn)生產(chǎn)工 藝的一般研究思路。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 14 頁 研究意義 中藥厚樸為木蘭科木蘭屬喬木 (Magnolia officinalis Rehd． et Wils)凹葉厚樸 (Magnolia officinalis Rehd． et Wils． var． biloba Rehd． et Wil)的干燥樹皮、根皮以及枝皮， 具有行氣燥濕、降逆平喘之功效，用于脘腹脹痛、宿食不消、嘔吐瀉痢、氣逆喘咳等功效。 提取中藥中有效成 分的傳統(tǒng)方法主要有 堿提酸沉法，水提取法，乙醇提取法，聚酰胺分離提取法， 堿提樹脂工藝，超臨界 CO2 萃取等，其中乙醇提取法由于價廉、污染小、適合工業(yè)生產(chǎn)等特點(diǎn)而被廣泛使用。并且 可為深入研究厚樸的藥理活性提供物質(zhì)基礎(chǔ)， 對于厚樸藥材有效成分的提取和進(jìn)一步深入研究具有一定的指導(dǎo)意義。本實(shí)驗(yàn)中采用乙醇作為提取試劑，采用連續(xù)回流提取的方法，按照正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計表 L9（ 34）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，提取厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚，并通過極差分析，得到較優(yōu)的實(shí)驗(yàn)條件和各因素對實(shí)驗(yàn)的影響主次順序。經(jīng)過 80 目篩， 40 目篩， 20 目篩篩選。 75%乙醇， 70%乙醇， 65%乙醇。先加入 95%乙醇xml，再加 入蒸餾水至刻度線，混合均勻。 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 實(shí)驗(yàn)步驟 1． 用電子天平精確稱取 厚樸粗粉 20g 2． 用 量筒量取 x%乙醇 ，乙醇 量為藥材量的 y 倍， 3． 將厚樸粉末，乙醇液加入圓底燒瓶中，將 圓底燒瓶放入水浴鍋，接上冷凝管。 加 熱回流 m 次，每次 n h，合并提取液。 4 因素 3 水平如表 所示。 表 因 素水平表 水平 因素 A 提取時間（ min） B 乙醇濃度（ %） C 乙醇用量（倍） D 提取次數(shù) 1 60 65 6 1 2 120 70 8 2 3 180 75 10 3 表 厚樸 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計 實(shí)驗(yàn)號 因素 A B C D 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 鑒定 薄層層析過程如下，結(jié)晶品的甲醉液在硅膠 G 板上點(diǎn)樣，分別用苯 甲醇（ 27： 1）和石泊醚 乙酸乙酯（ 9： l）展開，碘液顯色。 鑒定過程如下， ① 用 5%FeCl的甲醇液滴定 ， 可使溶液變成藍(lán)黑色 ； ② 用間苯三酚鹽酸液滴定，可使溶液變成粉紅色 ； ③ 將試液 、 厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品、和厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品分別點(diǎn)于硅膠 G 薄層上，以苯 乙酸乙醋（ 8： 2）展開 ， 紫外燈下可見樣品液中厚樸酚的蘭紫色熒光舉點(diǎn)及和厚樸酚的紫紅色熒光斑點(diǎn)。 結(jié)果與討論 實(shí)驗(yàn) 結(jié)果 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表 所示 。 Ki 表示任一列上水平號為 i（本實(shí)驗(yàn)中 i=1， 2 或 3）時，所對應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果之和。 ki=Ki／ s，其中 s 為任一列上各水平出現(xiàn)的次數(shù)，所以 ki 表示任一列上因素取水平 i時所得試驗(yàn)結(jié)果的算術(shù)平均值。同 理可以計算出其他列中的 ki，結(jié)果如表 中所示。例如，在第一列上，最大的 ki 為 k2（ ），最小的 ki為 k1（ ），所以 R==，或 R==。在本實(shí)驗(yàn)中，由于 RBRDRCRA,所以各因素的從主到次的順序?yàn)?B（ 乙醇濃度）， D（ 提取次數(shù)）， C（ 乙醇用量）， A（ 提取時間）。各因素優(yōu)水平的確定與試驗(yàn)指標(biāo)有關(guān)，若指標(biāo)越大越好，則應(yīng)選取指標(biāo)較大的水平，即各列 Ki 中最大的那個值對應(yīng)的水平；反之，若指標(biāo)越小越好，則應(yīng)選取使指標(biāo)小的那個水平。 所以，優(yōu)方案為 A2B2C1D3，即提取時間 120min，乙醇濃度 70%，乙醇用量 6 倍，提取次數(shù) 3 次。例如，本實(shí)驗(yàn)的 A 因素（提取時間）的重要性排在末尾，則可以考慮采用水平 1 的提取時間， xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 20 頁 即 60 分鐘，縮短了提取時間降低了能耗，即方案組合為 A1B2C1D3，可以做實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其浸膏得率，確定是否為較優(yōu)方案。將優(yōu)方案 A2B2C1D3 和較優(yōu)方案A1B2C1D3 與正交表中最好的第 6 號試驗(yàn) A2B3C1D2 作對比試驗(yàn)， 如表 所示， 若比第 6 號試驗(yàn)的試驗(yàn)結(jié)果更好，通常就可以認(rèn)為是真正的優(yōu)方案，否則第 6 號試驗(yàn)就是所需的優(yōu)方案。 表 驗(yàn)證試驗(yàn)設(shè)計表 實(shí)驗(yàn)號 因素 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 A B C D 浸膏得率（ %） 1 2 3 1 2 2 2 2 1 3 3 1 2 1 3 通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得到，如預(yù)期分析的一樣， A2B2C1D3 為最優(yōu)方案， A1B2C1D3為較優(yōu)方案。 4． 趨勢圖 浸膏得率對提取時間做趨勢圖，如圖 所示。 浸膏得率對乙醇濃度做趨勢圖，如圖 所示。 浸膏得率對乙醇用量做趨勢圖，如圖 所示。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 22 頁 浸膏得率對提取次數(shù)做趨勢圖，如圖 所示。 討論 1． 原料的目數(shù)的篩選 在提取過程中發(fā)現(xiàn)，用 80 目篩篩過的厚樸，由于顆粒較細(xì)，在回流提取過程中藥材很粘稠，容易產(chǎn)生暴沸現(xiàn)象，尤其是在 2 次以上回流次數(shù)時尤其明顯，即使加入沸石也不容易解決?？紤]降低過篩目數(shù)是否可以解決這一問題，于是設(shè)計實(shí)驗(yàn)，用同一厚樸原料分別過 20 目、 40 目、 80 目的篩，選正交設(shè)計表中 1 號試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行對比試驗(yàn)，如表 所示。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，使用 20 目、 40 目的厚樸在抽濾過程中比 80 目的容易，但抽濾液仍舊不澄清，說明是由于厚樸酚溶解度的改變在抽濾液中析出的晶體，并不是濾渣中通過濾紙的固體。植物的許多部位都含有葉綠素，葉綠素在醇提過程中，會被大量的提取出來，使抽濾液變?yōu)榫G色干擾試驗(yàn)，并且會使實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。 3． 對提取時間水平的選擇 提取時間 是 影響最小的 因素，隨提取時間的延長，浸膏得率升高，但在 120min 提取時間后，再延長提取時間，浸膏得率反而降低，說明提取時間不是越長越好，由于提取時間影響比較小，可以考慮縮短提取時間，這樣可以降低能耗，提高經(jīng)濟(jì)效益 。尤其在需要回流多次的時候，在第二次回流時，由于是使用前一次的濾渣進(jìn)行回流，因此藥材很粘稠，需要加沸石。 在抽濾結(jié)束后，要先拔抽濾管，再關(guān)閉機(jī)器，否則會發(fā)生倒吸。 4． 抽濾過后的濾液由于時間不足，有需要過夜才旋蒸的，在旋蒸前要加熱下錐形瓶，使其中由于溫度降低析出的厚樸酚重新溶解，再轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中進(jìn)行旋蒸，避免浸膏的損失。 xxxxxx 大學(xué)本科 畢業(yè)論文 第 24 頁 應(yīng)用前景 厚樸是我國特有的珍貴中藥材。因此，需要尋找和擴(kuò)大新的藥用資源。擴(kuò)大藥用部位研究，厚樸現(xiàn)應(yīng)用部位為枝、干、根皮及花蕾，種子供育苗用，而厚樸若以葉代替皮入藥，用量應(yīng)為皮 5 倍。厚樸是我國特有的珍貴中藥材，對其栽培技術(shù)研究很少，為了保護(hù)和發(fā)展厚樸資源，建議要把厚樸的科學(xué)研究作為中藥資源開發(fā)工作的一項(xiàng)重要措施來抓，近期內(nèi)加強(qiáng)厚樸生產(chǎn)技術(shù)研究，加強(qiáng)厚樸種源保護(hù)和收集，加強(qiáng)以利用為主的綜合開發(fā)研究以發(fā)揮厚樸的多種經(jīng)濟(jì)效益。對厚樸的化學(xué)成分研究尚不十分深入。 醇提取厚樸中的厚樸酚與和厚樸酚，工藝簡單，價廉， 可 作為 厚樸有效成分工業(yè)化提取 的提取方法。具有廣闊的發(fā)展前景。 用于提取傳統(tǒng)中藥厚樸中厚樸酚與和厚樸酚，有多種方法，如 堿 提酸沉法，水提取法，乙醇提取法，聚酰胺分離提取法， 堿提樹脂工藝，超臨界 CO2 萃取等。同時溶劑乙醇價廉，適合工業(yè)生產(chǎn)