【正文】 （ 1）溫度（ 2）生物樣品的濃度（ 3） pH（ 4）金屬離子（ 5）離子強度 54. 簡述凝 膠層析有哪些用途？ ① 作為分析工具；作為脫鹽工具 ② 生物大分子的濃縮 ③ 除熱原物質(zhì) ④ 生物大分子的分離純化；分子量的測定 58. 根據(jù)溶解度不同，蛋白質(zhì)有幾種分離純化方法。一般在 0～ 40℃之間，多數(shù)球狀蛋白的溶解度隨溫度的升高而增加； 40～ 50℃以上，多數(shù)蛋白質(zhì)不穩(wěn)定，并開始 變性。陰樹脂易受有機物 污染，可用 10%NaCl+2%～ 5%NaOH 混合溶液浸泡或淋洗 51. 液一液萃取時溶劑的選擇要注意以下幾點 ？ （ 1）選用的溶劑必須具有較高選擇性，各種溶質(zhì)在所選的溶劑中之分配系數(shù)差異愈大愈好。 絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團的過程 ？ 答： 概念：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親 水的有機溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。 ，并簡述其分離原理 ？ 答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴散系數(shù)，以及類似液體的密度（溶解能力強）的特點，利用超臨界流體為萃取劑進行的萃取單元操作。 （ 粘度（擴散系數(shù)） ） ，與液體有相似的 （ 密度 ） 。（ ∨ ） 四、填空 1． 發(fā)酵液常用的固液分離方法有 （ 離心 ） 和 （ 過濾 ） 等。可以促使生化物質(zhì)轉(zhuǎn)入有機相從而提高萃取率。（ ） 49． 有機 溶劑與水混合要在低溫下進行 。（ ） 33． 超聲波破碎法的有效能量利用率極低，操作過程產(chǎn)生大量的熱，因此操作需在冰水或有外 部冷卻的容器中進行 。（ ） 5． 極性 溶劑與 非極性 溶劑互溶。 A、明礬 49．下列哪項不是蛋白質(zhì)的濃度測定的方法（ D ）。 2．針對配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是（ C ）。 2 35．鹽析：是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。 6． 絮凝： 指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團的過程 7． 過濾： 是在某一支撐物上放過濾介質(zhì)，注入含固體顆粒的溶液，使液體通過，固體顆粒留下，是固液分離的常用方法之一。 22．超臨界流體：超臨界流體是狀態(tài)超過氣液共存時的最高壓力和最高溫度下物質(zhì)特有的點 —— 臨界點后的流體。 54． 親和層析：是利用生物活性物質(zhì)之間的專一親和吸附作用而進行的層析方法。 C、萃取劑 29．陰離子交換劑 （ C ） 。 147． 超臨界流體萃取法適用于提?。? B ） B、極性小的成分 148． 分離純化早期，由于提取液中成分復(fù)雜，目的物濃度稀，因而易采用分離量大分辨率低的方法 149． 蛋白質(zhì)類物質(zhì)的分離純化往往是多步驟的，其前期處理手段多采用下列哪類的方法。（√ ） 20． 蛋白質(zhì)變性，一級、二級、三級結(jié)構(gòu)都被破壞。（ √ ） 42． 不同高分子化合物的溶液相互混合可形成兩相或多相系統(tǒng)，如葡聚糖與聚乙二醇（ PEG）按一定比例與水混合后，溶液先呈渾濁狀態(tài)，待靜置平衡后，逐漸分成互不相溶的兩相，下相富含 PEG，上相富含葡聚糖 。（ ） 85．當氣體的溫度超過其臨界溫度，壓力超過臨界壓力之后，物質(zhì)的聚集狀態(tài)就介于氣態(tài)和液態(tài)之間，成為超臨界流體。（ ） 118． 沉淀法 、 吸附法 、 萃取法 、 超濾法 都是進行 初步純化 。 13． 影響離子交換選擇性的因素有 （ 離子化合價 ） ， （ 離子水化半徑 ） ， （ 溶液濃度 ） ， （ 離子強度 ） ， （ 溶液的pH 值 ） ， （ 有機溶劑 ） ， （ 樹脂物理結(jié)構(gòu) ） 和 （ 輔助力 ） 。 5． 簡述軟水和無鹽水的制備方法 ？ 答：①軟水的制備：利用鈉型磺酸樹脂除去水中的鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制得軟水。而在臨界點附近，微小的壓力下降或溫度上升，則溶劑的密度大幅度減少，對溶質(zhì)的溶解度將大幅減少，有利于溶質(zhì)的分離和溶劑的回收。 （ 3）、對生物分子的變性作用小。 11 2)鹽析沉淀 中性鹽對蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定性有顯著的影響。鹽析沉淀的蛋白質(zhì)一般保持著天然構(gòu)象而不變性。 46. 生物分離技術(shù)的基本涵義及內(nèi)容 ？ 基本涵義：生物分離技術(shù)是指從動植物與微生物的有機體或器官、生物工程產(chǎn)物（發(fā)酵液、培養(yǎng)液）及其生物化學(xué)產(chǎn)品中提取、分離、純化有用物質(zhì)的技術(shù)過 程。親和吸附劑的組成包括：惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。 6． 在離子交換色譜操作中，怎樣選擇離子交換樹脂？ 答： 對陰陽離子交換樹脂的選擇：正電荷選擇陽離子交換樹脂，負電荷選擇陰離子 交換樹脂。 16． 膜分離過程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孔徑）不同可分為 （ 微濾膜 ） ，（ 超濾膜 ），（ 納濾膜 ）和（ 反滲透膜 ）。（√ ） 121． 化學(xué)萃取即溶質(zhì)根據(jù)相似相溶的原理在兩相間達到分配平衡，萃取劑與溶質(zhì)之間不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。（√ ） 91． 采用溶劑提取法提取中草藥有效成分時，選擇溶劑的原則是“相似相溶原則”。（ √ ） 44． 鹽析是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的中性鹽，使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù) 。（ ） 25． 離子交換劑是一種不溶于酸、堿及有機溶劑的固態(tài)學(xué)分子化合物。此沉淀方法稱為 （ B ） B、等電點法 152． 針對配基的生 物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是（ C ）。 B、各物質(zhì)分子大小不同 32．洗脫體積是 （ C ） 。 57． 過濾介質(zhì)：是指能使固一液混合料液得以分離的某一介面，通常指濾 布或膜過濾中所用的膜。 24．反滲透：在只有溶劑能通過的滲透膜的兩側(cè)，形成大于滲透壓的壓力差，就可以使溶劑發(fā)生倒流，使溶液達到濃縮的效果，這種操作成為反滲透。 3． 分配系數(shù)：在一定溫度、壓力下，溶質(zhì)分子分布在兩個互不相溶的溶劑里，達到平衡后，它在兩相的濃度為一常數(shù)叫分配 系數(shù) 。 31. 生物分離技術(shù)：是指從動植物與微生物的有機體或器官、生物工程產(chǎn)物（發(fā)酵液、培養(yǎng)液）及其生物化學(xué)產(chǎn)品中提取、分離、純化有用物質(zhì)的技術(shù)過程。 60． 選擇變性沉析：是利用蛋白質(zhì)、酶與核酸等生物大分子對某些物理或化學(xué)因素敏感性不同，而有選擇地使之變性沉析，以達到目的物與雜蛋白分離的技術(shù)，稱為選擇變性沉析。 A. 親和層析 38．純化酶時，酶純度的主要指標是：（ D ） D. 酶的比活力 39．鹽析法純化酶類是根據(jù)（ B ）進行純化。（ √ ） 3． 珠磨法中適當?shù)卦黾友心┑难b量可提高細胞破碎率。（ √ ） 31． 板框壓濾機可過濾所有菌體 。（ √ ） 47． 向含有生化物質(zhì)的水溶液中加入一定量親水性的有機溶劑，能使生化物質(zhì)沉淀析出 。（√ ） 95． 丙酮，介電常數(shù)較低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析時選用丙酮較好。 ( ) 124． 樹脂使用后不可再回收。 19． 影響鹽析的因素有 （ 溶質(zhì)種類 ） ，（ 溶質(zhì)濃度 ），（ pH 值 ）和（ 溫度 ）。 7． 簡述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象 ？ 答： 當中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時可能出現(xiàn)以下兩種情況： （ 1） “ 鹽溶 ” 現(xiàn)象 — 低鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度增大 （ 2） “ 鹽析 ” 現(xiàn)象