【正文】 不可再回收。（ ∨ ） 四、填空 1． 發(fā)酵液常用的固液分離方法有 （ 離心 ） 和 （ 過(guò)濾 ） 等。 3． 陽(yáng)離子交換樹(shù)脂按照活性基團(tuán)分類，可分為 （強(qiáng) 酸 型） ， （弱 酸 型） 和 （中等強(qiáng)度） ；其典型的活性基團(tuán)分別有 （磺酸基團(tuán)） ， （羧基） ， （磷酸基） 。 6． 為使過(guò)濾進(jìn)行的順利通 常要加入 （惰性助濾劑） 。 8． 陰離子交換樹(shù)脂按照活性基團(tuán)分類，可分為 （強(qiáng)堿型），（弱堿型）和（中等強(qiáng)度） ；其典型的活性基團(tuán)分別有 （ 季氨基 ） 、 （ 伯、仲、叔氨 ） 、 （ 強(qiáng)弱基團(tuán)都具備 ） 。 12． DEAE Sepharose 是 （ 陰 ） 離子交換樹(shù)脂，其活性基團(tuán)是 （ 二乙基氨基乙基 ） 。 14． CM Sepharose 是 （ 陽(yáng) ） 離子交換樹(shù)脂，其活性基團(tuán)是 （ 羧甲基 ） 15． 工業(yè)離心設(shè)備從形式上可分為（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。 17． 工業(yè)上常用的超濾裝置有 （ 板式 ） ，（ 管式 ），（ 螺旋卷式 ）和（ 中空纖維式 ）。 19． 影響鹽析的因素有 （ 溶質(zhì)種類 ） ，（ 溶質(zhì)濃度 ），（ pH 值 ）和（ 溫度 ）。 （ 粘度（擴(kuò)散系數(shù)） ） ，與液體有相似的 （ 密度 ） 。 （ 板框壓濾機(jī) ）和（ 真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾機(jī) ）。 （ 過(guò)飽和溶液的形成 ）、（ 晶核的形成 ）和（ 晶體的生長(zhǎng) ）。 －液萃取從機(jī)理上分析可分為 （ 物理萃取 ）和（ 化學(xué)萃取 ） 兩類； ，常用的膜可分為 （ 對(duì)稱性膜 ）、（ 非對(duì)稱膜 ）和（ 復(fù)合膜 ） 三類； 五、 簡(jiǎn)答 2． 試述凝膠色譜的原理 ？ 答：將混合原料加在柱上并用流動(dòng)相洗脫，則無(wú)法進(jìn)入孔隙內(nèi)部的大分子直接被洗脫下來(lái)，小分子因?yàn)榭梢赃M(jìn)入孔隙內(nèi)部而受到很大的阻滯，最晚被洗脫下來(lái)，而中等大小的分子，雖然可以進(jìn)入孔隙內(nèi)部但并不深入，受到的阻滯作用不強(qiáng)，因而在兩者之間被洗脫下來(lái)。 液體環(huán)境：為了保持被分離物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的均一 性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙內(nèi)部和外部液體環(huán)境的一致，所以進(jìn)行液體環(huán)境的平衡。 ②無(wú)鹽水的制備：將原水通過(guò)氫型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和羥型強(qiáng)堿或弱堿性陰離子交換樹(shù)脂的組合， 8 經(jīng)過(guò)離子交換反應(yīng)，將水中所有的陰、陽(yáng)離子除去，從而制得純度很高的無(wú)鹽純水。 對(duì)離子交換樹(shù)脂強(qiáng)弱的選擇：較強(qiáng)的酸性或堿性，選擇選用弱酸性或弱堿性樹(shù)脂。 7． 簡(jiǎn)述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象 ？ 答： 當(dāng)中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時(shí)可能出現(xiàn)以下兩種情況： （ 1） “ 鹽溶 ” 現(xiàn)象 — 低鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度增大 （ 2） “ 鹽析 ” 現(xiàn)象 — 高鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度隨之下降，原因如下： （ a）無(wú)機(jī)離子與蛋白質(zhì)表面電荷中和，形成離子對(duì)，部分中和了蛋白質(zhì)的電性，使蛋白質(zhì)分子之間的排斥力減弱，從而能夠相互靠攏； （ b）中性 鹽的親水性大，使蛋白質(zhì)脫去水化膜，疏水區(qū)暴露，由于疏水區(qū)的相互作用導(dǎo)致沉淀； ？ 答 : 利用溶質(zhì)與吸附劑之間的分子吸附力 (范德華力，包括色散力、誘導(dǎo)力、定向力以及氫鍵 )的差異而實(shí)現(xiàn)分離 過(guò)飽和溶液形成的 方法 ？ 答： （ 1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結(jié)晶） 適用于溶解度隨溫度升高而增加的體系；同時(shí)，溶解度隨溫度變化的幅度要適中； （ 2）部分溶劑蒸發(fā)法（等溫結(jié)晶法） 適用于溶解度隨溫度降低變化不大的體系，或隨溫度升高溶解度降低的體系； （ 3）真空蒸發(fā)冷卻法 使溶劑在真空下迅速蒸 發(fā)，并結(jié)合絕熱冷卻，是結(jié)合冷卻和部分溶劑蒸發(fā)兩種方法的一種結(jié)晶方法。 ，并簡(jiǎn)述其分離原理 ？ 答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴(kuò)散系數(shù)，以及類似液體的密度（溶解能力強(qiáng)）的特點(diǎn)，利用超臨界流體為萃取劑進(jìn)行的萃取單元操作。 ？ 答： 凝膠排阻色譜的分離介質(zhì)（填料）具有均勻的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)，其分離原理是具有不同分子量的溶質(zhì)分子，在流經(jīng)柱床是，由于大分子難以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，而從凝膠顆粒之間流 出，保留時(shí)間短；而小分子溶質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，由于凝膠多孔結(jié)構(gòu)的阻滯作用，流經(jīng)體積變大，保留時(shí)間延長(zhǎng)。 ，有那些原因會(huì)造成膜污染，如何處理？ 答：（ 1）膜污染主要有兩種情況：一是附著層被濾餅、有機(jī)物凝膠、無(wú)機(jī)物水垢膠體物質(zhì)或微生物等吸附于表面；另一種是料液中溶質(zhì)結(jié)晶或沉淀造成堵塞。（ 2 分） （ 3）膜污染所引起的通量衰減往往是不可逆的，只能通過(guò)清洗的處理方式消除 ，包括物理方法沖洗和化學(xué)藥品溶液清洗等。在臨界點(diǎn)附近，微小的壓力增加或溫度下降，則溶劑的密度大幅度增加，對(duì)溶質(zhì)的溶解度將大幅度增加，有利于溶質(zhì)的萃取。 優(yōu)點(diǎn)：無(wú)毒無(wú)腐蝕性，不可燃燒，價(jià)格低廉，傳質(zhì)好萃取快，臨界溫度和臨界壓力較低適合于熱敏生物制品，可獲萃取 物或萃余物 ，有何特點(diǎn)？ 答：親和吸附是吸附單元操作的一種，它是利用親和吸附劑與目標(biāo)物之間的特殊的化學(xué)作用實(shí)現(xiàn)的高效分離手段。 親和吸附的特點(diǎn)是高效、簡(jiǎn)便、適用范圍廣、分離速度快、條件溫和，但載體制備難度大，通用性差，成本較高。 凝聚：簡(jiǎn)單電解質(zhì)降低膠體間的排斥力。 絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團(tuán)的過(guò)程 ？ 答： 概念：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親 水的有機(jī)溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。 （ 2）由于有機(jī)溶劑的水合作用，降低了自由水的濃度，降低了親水溶質(zhì)表面水化層的厚度，降低了親水性，導(dǎo)致脫水凝聚。不同的分離對(duì)象需要采用不同的分離方法才能有效地被分離。 對(duì)原料液進(jìn)行高度濃縮。 （ 1）、是否與水互溶，在水中是否有很大的溶解度；（ 2）、介電常數(shù)小，沉析作用強(qiáng)。（ 4）、毒性小，揮發(fā)性適中。 內(nèi)容主要包括：離心分離、過(guò)濾分離、泡沫分離、萃取分離、沉淀（析）分離、膜分離、層析（色譜）分離、電泳分離技術(shù)以及產(chǎn)品的濃縮、結(jié)晶、干燥等技術(shù) 。再生 方法可根據(jù)污染情況和條件而定，一般陽(yáng)樹(shù)脂在軟化中易受 Fe3+污染，清除鐵化合物的方法，通常是用加抑制劑的高濃度鹽酸（ 10%～ 15%）浸泡樹(shù)脂 5～ 12h，甚至更長(zhǎng)。陰樹(shù)脂易受有機(jī)物 污染，可用 10%NaCl+2%～ 5%NaOH 混合溶液浸泡或淋洗 51. 液一液萃取時(shí)溶劑的選擇要注意以下幾點(diǎn) ？ （ 1）選用的溶劑必須具有較高選擇性，各種溶質(zhì)在所選的溶劑中之分配系數(shù)差異愈大愈好。 （ 3）、兩種溶劑的密度相差不大時(shí)，易形成乳化，不利于萃取液的分離，選用溶劑時(shí)應(yīng)注意。 52. 影響有機(jī)溶劑沉析的因素 ？ （ 1）溫度（ 2）生物樣品的濃度（ 3） pH（ 4）金屬離子（ 5）離子強(qiáng)度 54. 簡(jiǎn)述凝 膠層析有哪些用途？ ① 作為分析工具；作為脫鹽工具 ② 生物大分子的濃縮 ③ 除熱原物質(zhì) ④ 生物大分子的分離純化；分子量的測(cè)定 58. 根據(jù)溶解度不同，蛋白質(zhì)有幾種分離純化方法。影響蛋白質(zhì)溶解度的主要因素有溶液的 pH值、離子強(qiáng)度、溶劑的介電常數(shù)和溫度等。單純使用此法不易使蛋白質(zhì)沉淀完全，常與其他方法配合使用。一定濃度的中性鹽可破壞蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素 而使蛋白質(zhì)鹽析沉淀。有時(shí)不同的鹽濃度可有效地使蛋白質(zhì)分級(jí)沉淀。 3)低溫有機(jī)溶劑沉淀法在一定量的有機(jī)溶劑中，蛋白質(zhì)分子間極性基團(tuán)的靜電引力增加，而水化作用降低，促使蛋白質(zhì)聚集沉淀。一般在 0～ 40℃之間，多數(shù)球狀蛋白的溶解度隨溫度的升高而增加； 40～ 50℃以上，多數(shù)蛋白質(zhì)不穩(wěn)定，并開(kāi)始 變