細胞的換液與傳代ppt課件(留存版)
【正文】 細胞抗原標記的方法 ? 細胞是否是正常細胞，有無發(fā)生惡性轉化正常細胞二倍體特征，惡性轉化細胞為異倍體。 ? CO2 適應性生長基質：膠原層，血漿纖維蛋白層，多聚右旋賴氨酸，纖維連接蛋白，瓊脂 （三）克隆的分離 克隆化環(huán)分離法 ? 射線照射分離克隆法 ? 將培養(yǎng)瓶倒置放于 X射線或 鈷 60源下，用 2mm厚的鉛片蓋住選中的克隆。 二、細胞系的建立 正常細胞系建立的程序包括： 原代培養(yǎng) 第一次傳代 常規(guī)傳代和凍存、 復蘇等階段。 一、傳代培養(yǎng)（ passage） ? 概念：無論是否稀釋，將細胞從一個培養(yǎng)瓶轉移或移植到另一個培養(yǎng)瓶。 ? 細胞克隆化培養(yǎng) （ cell cloning culture） ：又稱單個細胞分離培養(yǎng) ， 是指將單個細胞在一定支持物上增殖培養(yǎng)而產生細胞群落的過程 。成纖維細胞、胸腺細胞和巨噬細胞。 ? 2）胰蛋白酶消化法 ? 3）胰蛋白酶 檸檬酸鹽 ? 4）用 EDTA洗細胞再用胰蛋白酶 檸檬酸鹽處理 ? 5） EDTA洗再用胰蛋白酶
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