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細(xì)胞的換液與傳代ppt課件(更新版)

2025-06-11 03:42上一頁面

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【正文】 ficiency)是指向底物接種單細(xì)胞懸液能形成細(xì)胞小群的百分?jǐn)?shù) ? 影響因素: ? 細(xì)胞密度。 HamF12k ? 血清 ? 飼養(yǎng)細(xì)胞 ? 激素和生長因子:胰島素,地塞米松, EGF, BFGF。 DNA指紋技術(shù)也可以鑒定。 盡量少傳代,避免轉(zhuǎn)化。 連續(xù)細(xì)胞系 continuous cell line:可連續(xù)傳代的細(xì)胞系,即已建成的細(xì)胞系。 ?(一)傳代培養(yǎng)的方法 ? 從生長器皿上解離細(xì)胞的方法: ? 1)震蕩法。 ? 證明細(xì)胞系的種系。 (一) 克隆培養(yǎng)技術(shù) 稀釋鋪板法 飼養(yǎng)層克隆法 膠原膜板 瓊脂克隆法等 分類: :最常用 消化 — 低密度細(xì)胞懸液制備 — 接種 — 標(biāo)記與培養(yǎng) — 分離擴(kuò)大培養(yǎng) — 觀察 — 移植瓶或皿內(nèi)培養(yǎng) 稀釋鋪板法圖解 ? 注意事項(xiàng): ? 1)確保一個(gè)細(xì)胞 ? 2)輪廓清晰完整,體積適宜健康 ? 3)不需換液 飼養(yǎng)層克隆法 ? 飼養(yǎng)細(xì)胞( feeder cell):也稱滋養(yǎng)細(xì)胞,是一層經(jīng)過射線或絲裂霉素 C處理過的供其它細(xì)胞附著的細(xì)
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