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細胞的換液與傳代ppt課件(專業(yè)版)

2025-06-14 03:42上一頁面

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【正文】 (一) 克隆培養(yǎng)技術(shù) 稀釋鋪板法 飼養(yǎng)層克隆法 膠原膜板 瓊脂克隆法等 分類: :最常用 消化 — 低密度細胞懸液制備 — 接種 — 標記與培養(yǎng) — 分離擴大培養(yǎng) — 觀察 — 移植瓶或皿內(nèi)培養(yǎng) 稀釋鋪板法圖解 ? 注意事項: ? 1)確保一個細胞 ? 2)輪廓清晰完整,體積適宜健康 ? 3)不需換液 飼養(yǎng)層克隆法 ? 飼養(yǎng)細胞( feeder cell):也稱滋養(yǎng)細胞,是一層經(jīng)過射線或絲裂霉素 C處理過的供其它細胞附著的細胞層。 ?(一)傳代培養(yǎng)的方法 ? 從生長器皿上解離細胞的方法: ? 1)震蕩法。 盡量少傳代,避免轉(zhuǎn)化。 HamF12k ? 血清 ? 飼養(yǎng)細胞 ? 激素和生長因子:胰島素,地塞米松, EGF, BFGF。 ? 4 、 細胞有無交叉污染 。 教學目的: ? 掌握傳代培養(yǎng)的概念和方法 ? 了解細胞系的建立過程 ? 掌握克隆細胞的幾種方法 細胞系 cell line:原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代后即成。 ? 明確細胞系的組織來源
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