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正文內(nèi)容

血清蛋白質(zhì)濃度定量測(cè)定(留存版)

  

【正文】 同繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方法,在一支試管中加入待測(cè)樣品 ,然后加入,立即在漩渦混合器上混合,測(cè)吸光度 A,查標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出待測(cè)樣品中蛋白質(zhì)濃度( g/L)。 ? 試劑 B: 4%硫酸銅。 ? (二) 以測(cè)定管吸光度值,查找標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出待測(cè)血清中蛋白質(zhì)濃度 (g/L)。目前 BCA法的 試劑盒 市面有售。 操作步驟 ? 1. 先將 solutionA 搖晃混勻,根據(jù)樣品數(shù)量,按 50體積 solution A加 1體積 solutionB試劑( 50:1)配制成 BCA工作液,充分混勻。BCA工作液在 24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。 ? 總之,雖然蛋白質(zhì)含量的測(cè)定方法很多,但是,還沒有一個(gè)完美的方法。 ? (三) 再?gòu)臉?biāo)準(zhǔn)管中選擇一管與測(cè)定管光密度相接近者,求出待測(cè)血清中蛋白質(zhì)濃度(g/L)。 ? 【 試劑 】 ? 試劑 A: 1% BCA二鈉鹽 ? 2%無(wú)水碳酸鈉 ? %酒石酸鈉 ? %氫氧化鈉 ? %碳酸氫鈉 ? 混合調(diào) PH值至 。(純度可經(jīng)凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量而確定) : ? 取 6支試管,編號(hào)后分別加入 0mL、 、 、 、 、 蛋白質(zhì)溶液 (BSA),然后各管分別用去離子水補(bǔ)充到 ,最后各試管中分別加入, 每加完一管 , 立即 在漩渦混合器上 混合 ( 注意不要太劇烈,以免產(chǎn)生大量氣泡而難于消除 ),以蛋白質(zhì)的蛋白含量為橫坐標(biāo)、吸光度 A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 ? 試劑 B: 4%硫酸銅。 ? 6孔板底面積 ,加培養(yǎng)液的量 , ? 12孔板底面積 ,加培養(yǎng)液的量 2ml, ?
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