【正文】 ,Thanks for your attention!,第四十八頁，共四十九頁。細胞生長抑制率（%）=[1OD(cisplatin＋）/OD(cisplatin－)] 100%,第四十一頁，共四十九頁。,Transwell原理(yu225。)實驗,第三十三頁，共四十九頁。,轉(zhuǎn)染及篩選(shāixuǎn),脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染48h后用含0.4μg/ml的G418的完全(w225。li232。)路線,技 術(shù) 路 線,第二十一頁，共四十九頁。i)中CD147的表達,日本Toyama大學(xué)的Zheng HC等研究表明：在正常胃黏膜發(fā)展為增生性或化生性胃黏膜，最后(zu236。并且腫瘤的惡性程度越高，CD147的表達水平也越高。u),CD147屬單次跨膜糖蛋白，胞外段中的4個半胱氨酸殘基形成2個二硫鍵，構(gòu)成(g242。MMP的主要功能是降解細胞外基質(zhì)。o)內(nèi)容,研究背景(b232。i 225。,20世紀(jì)80年代，Biswas實驗室從人肺癌細胞株LX1的細胞膜上分離得到(d233。)是32~44kDa、45~65kDa。,2. 誘導(dǎo)腫瘤血管(xu232。,二. 研究(y225。ng)，該細胞表面CD147是高表達的。,CD147 shRNA表達(biǎod225。,第三十頁，共四十九頁。)細胞上清中MMP2和MMP9的活性,明膠酶包括72 kDa的明膠酶A（基質(zhì)金屬蛋白酶2，MMP2）和92 kDa的明膠酶B (基質(zhì)金屬蛋白酶9，MMP9)。,Transwell結(jié)果(jiē guǒ),穿過Transfer侵襲(qīnx237。,成功構(gòu)建了靶向CD147的shRNA真核表達載體； 成功轉(zhuǎn)染了人胃癌細胞(x236。轉(zhuǎn)染SGC7901細胞，篩選(shāixuǎn)穩(wěn)定表達干擾載體的SGC7901細胞株。,下一步(yī b249。n),抗腫瘤藥物(y224。n jī)和亮度可判定明膠酶的活性。ibiǎo)高糖基化形式的CD147，LG代表低糖基化形式的CD147。nd236。,干擾(gānrǎo)靶序列的選擇,參考陳翔等的報道，選取CD147mRNA 370390和808828作為靶序列，相應(yīng)的shRNA分別命名為shRNA1和shRNA2。,三、研究(y225。)PI3K/AKT細胞存活信號通路。,第十一頁，共四十九頁。y236。),腫瘤的侵襲(qīnx237。RNA干擾抑制CD147表達對人胃癌細胞(x236。,MMP簡介(jiǎn ji232。 第六屆人類白細胞分化抗原協(xié)作組會議(hu236。)廣泛，參與精子發(fā)生、胚胎發(fā)育、腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移、炎癥反應(yīng)、病毒感染等多種生理和病理過程，是一個多功能的分子。CD147可激活(jī hu243。,第十九頁，共四十九頁。bǎn)的設(shè)計示意圖,第二十四頁，共四十九頁。,重組質(zhì)粒測序鑒定(ji224。,Lane 1: SGC7901. Lane 2: SGC7901/shRNAcontrol Lane 3: SGC7901/shRNA1 Lane 4: SGC7901/shRNA2,HG代表(d224。收集細胞培養(yǎng)上清液，用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法可將這兩種明膠酶按分子量大小分開，顯示兩條負染條帶，根據(jù)條