【正文】 l (3)添加了少量三乙胺可以封閉柱填料中部分殘余硅羥基的影響，減少拖尾。l l l 如：鹽酸土霉素《歐洲藥典》 ： 4差向土霉素 ≤% ，四環(huán)素 ≤% ， 2乙酰 2去酰胺土霉素 ≤% ，其他雜質(zhì)總和 ≤% ，l 金霉素用雜質(zhì)對照品外標法計算已知雜質(zhì)的含量。l 鑒別 l l 硫酸西索霉素、l 硫酸慶大霉素、l 硫酸奈替米星l 硫酸依替米星l 均采用 HPLCELSD方法測定硫酸鹽含量。l 幾乎對所有的化合物均有響應(yīng)，流動相和環(huán)境溫度對響應(yīng)值的影響小 ,適宜用于無特征紫外吸收化合物的定性和定量分析，l 有關(guān)物質(zhì)、組分、特定雜質(zhì)檢查方法修改為HPLCELSD方法的品種較多 ，l 但有些品種如新霉素、鹽酸大觀霉素仍采用TLC法。妥布霉素滴眼液 兩種表示方法并列 :l 取本品，加 ％無菌氯化鈉溶液制成每1ml中含阿米卡星 8mg的供試液，經(jīng)薄膜過濾法處理，用 －蛋白胨緩沖液分次沖洗（每膜不少于 500ml），以金黃色葡萄球菌為陽性對照菌，依法檢查（附錄 XIl 可見異物 （ 4）硫酸鹽鑒別反應(yīng)。 l 如 :麥白霉素片 ,麥白霉素膠囊 ,吉他霉素片l 溶出度介質(zhì)可加酶，如麥白霉素膠囊和羅紅霉素膠囊，后者還規(guī)定了胰酶的加量以單位表示（每 1ml中含胰蛋白酶不少于 位、胰淀粉酶不少于 不少于 ） ,更為科學(xué)合理。同 紅 霉素按 紅 霉素 C、 紅 霉素 A、 雜質(zhì) 紅 霉素 B、 紅 霉素 烯醇 醚 峰的 順 序出峰（必要時 ，用 紅 霉素 C、 紅 霉素 B、 紅 霉素 烯 醇 醚對 照品進 行峰定位）。 ） 甲醇（ 80： 20）為流動相；檢測波長為 270nm.取經(jīng)紫外光燈（ 254nm）下照射 24小時后的本品適量，加流動相溶解并稀釋制成每 1ml中約含1mg的溶液，量取 20μl 注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氨曲南峰與氨曲南 E異構(gòu)體峰（相對保留時間約 ）的分離度應(yīng)大于 。l 含量測定l 本類共 127個品種的含量測定均采用 HPLC法或 HPLC梯度洗脫。l 對照品溶液的制備 根據(jù)試驗確定的具體檢測對象，制備對照品溶液。以 sephadexG10為填充劑，柱內(nèi)徑的縮小，柱床體積隨之也變小。l 高分子聚合物l 高分子聚合物是 β 內(nèi)酰胺類抗生素臨床過敏反應(yīng)的一個主要因素，故在注射用原料及其制劑標準中增加檢查高分子聚合物，控制一定的限度，對臨床用藥安全有效具有重大的意義。l 如：頭孢丙烯規(guī)定：l 頭孢丙烯 (Z)異構(gòu)體峰的保留時間約為 23～ 30分鐘，頭孢丙烯（ E）異構(gòu)體峰的保留時間約為 30～ 40分鐘，理論板數(shù)按頭孢丙烯（ Z）異構(gòu)體峰計算應(yīng)不小于 10000， 頭孢丙烯（ Z）異構(gòu)體峰與相鄰雜質(zhì)峰間的分離度應(yīng)符合要求。l l 檢查溶液的澄清度與顏色是控制 β 內(nèi)酰胺類注射用的原料藥與制劑內(nèi)在質(zhì)量的一個重要指標。l 單環(huán) β 內(nèi)酰胺類新增品種：l 原料： l 。l 8. 紅霉素類經(jīng)對幾種 HPLC方法比較后，采用同一 HPLC方法檢查紅霉素與其衍生物以及制劑中紅霉素 A、 B、 C及有關(guān)物質(zhì)。l l 該混合對照品用于系統(tǒng)適用性試驗，測得的色譜圖應(yīng)與標準圖譜一致。有利于基層檢驗機構(gòu)的選擇。l 對檢查有關(guān)物質(zhì)與含量測定的 HPLC方法的系統(tǒng)適用性試驗進行修改并完善。l 檢出的雜質(zhì)與 。本版藥典增加球狀蛋白親水硅膠為色譜柱填充劑的高分子聚合物分析方法l 12. 2023年版藥典氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類的含量測定方法為微生物檢定法的管碟法，本版藥典增加微生物檢定法濁度法，二法并列。 ；l 少數(shù)品種有用 UV鑒別。l 其中有阿莫西林、阿莫西林鈉、青霉素鈉 (鉀 )、青霉素 V鉀、氨芐西林、氨芐西林鈉、氨曲南等原料及其制劑共 27個品種采用梯度洗脫方法。l 頭孢拉定、頭孢氨芐、頭孢羥氨芐中 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）及頭孢哌酮鈉中雜質(zhì) A等均采用雜質(zhì)對照品外標法。因此在研究建立新的方法時，我們?nèi)圆捎媚z色譜的分離模式，并采用原方法中的自身對照外標法，進行高分子聚合物雜質(zhì)的測定。% 頭孢 拉定 均 值 F=10 3 (n=5)　均 值 ： F=10 3(n=5)177。l 內(nèi)標溶液的制備 取正丙醇適量，用二甲基亞砜稀釋制成每 1ml中約含 200μg 的溶液，作為內(nèi)標溶液。m以上的微粒不得過 600粒；l 規(guī)格 （包括 ）的制劑按每 1個供試品容器中含 10181。按外標法以峰面積計算，即得。具體見 表 。l 一般采用 TLC法與硫酸鹽反應(yīng)，l l 每 1g供試品中，含 10μm以上的微粒不得過 6000粒，含 25μm以上的微粒不得過600粒。本版藥典將其擴大為 4個滴眼液，l 本版藥典對氨基糖苷類抗生素滴眼液中常用防腐劑如羥苯乙酯、丙酯、苯扎氯胺等進行檢查。l 例 2.l 、組分l l BP2023阿米卡星項下系統(tǒng)適用性色譜l 本品分子結(jié)構(gòu)中具有多個不對稱碳原子，因此有旋光性。本版四環(huán)類抗生素修訂情況概要l l 米諾環(huán)素、土霉素、多西環(huán)素用已知雜質(zhì)對照品定位，用不加校正因子的自身對照法計算，l 、 、 、 ）分別不得大于對照溶液主峰面積的 倍（ % ）、 （ % ）、 （ %）、 （ % ）、 （ % ），其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的 （ % ）。并在流動相中添加了少量的 EDTA，用經(jīng)于競爭性抑制色譜填料中殘留重金屬離子與四環(huán)素類及雜質(zhì)的絡(luò)合，l L 1醋酸銨 在土霉素、多西環(huán)素中都存在，故在系統(tǒng)適用性試驗中應(yīng)規(guī)定與其的分離度。圖中代號 EP代號 峰名稱1 E 雜質(zhì) E(土霉素 )2 D 雜質(zhì) D（ 4差向 6差向多西環(huán)素 ,3 C 雜質(zhì) C（ 4差向多西環(huán)素）4 B 雜質(zhì) B（美他環(huán)素）5 A 雜質(zhì) A(β 多西環(huán)素 )多西環(huán)素6 F 雜質(zhì) F(2乙酰 6脫碳酰胺多西環(huán)素 )圖 .鹽酸四環(huán)素 ,經(jīng)試驗，國內(nèi)樣品 4差向四環(huán)素的含量均小于 % ，故將《中國藥典》 2023年版標準規(guī)定的 4差向四環(huán)素 ≤% 的限度改為 % 。國內(nèi)樣品 4差向土霉素和四環(huán)素的含量很少，故將其作為其他雜質(zhì)控制，不再單獨規(guī)定限度，其他雜質(zhì)總和 ≤% ；l l 有關(guān)物質(zhì)測定方法仍以 HPLC為主，但測定條件隨含量測定方法修改有所改變。(3) 四環(huán)類抗生素能與許多金屬離子形成有色絡(luò)合物。四環(huán)類在較酸溶液中特別在加熱情況下， 有以下五種形式，表 l （ 1）硫酸卡那霉素，硫酸依替米星及其制劑共 7個標準的含量測定為 HPLCELSD方法。HPLCELSD方法擴大應(yīng)用，l 妥布霉素滴眼液、慶大霉素滴眼液和硫酸卡那霉素滴眼液（均為滲透壓摩爾濃度為 260320mOsmol/kg）l l （ 3）硫酸鹽鑒別反應(yīng)。l l 測定方法 :HPLC，色譜柱 C1檢測波長 232nml 紅霉素、乳糖酸紅霉素、硬脂酸紅霉素l 紅霉素、乳糖酸紅霉素、硬脂酸紅霉素主要組分均為紅霉素 A、 B、 C .l 測定方法： HPLC法，色譜柱 C18 , l 檢測波長 215 nm；l l 3個品種規(guī)定限度相同：l 紅霉素 A: 以無水物計不得少于 %，用對照品外標法計算 .l 紅霉素 B: 不得大于 5%,用加校正因子（ ）的自身對照法計算。l 標準中涉及的已知雜質(zhì)，在標準最后列出其化學(xué)命名，便于與國外藥典標準中的雜質(zhì)比較。利用該類藥物遇光照或加熱能產(chǎn)生反式異構(gòu)體或 E異構(gòu)體等有關(guān)物質(zhì)。l 測定法 首先取甲烷氣體頂空進樣，記錄甲烷的保留時間作為色譜系統(tǒng)的死時間（ t0）再取供試品溶液頂空進樣，記錄色譜圖，供試品溶液色譜圖中如有色譜峰，按下式計算各色譜峰的保留時間（ tR）相對于正丙醇保留時間（ tR（正丙醇））的相對調(diào)整保留時間（ RART）；l 將得到的 RART值與下表的 RART值比較，確定供試品中的殘留溶劑種類；再制備相應(yīng)的對照品溶液，取對照品溶液頂空進樣，記錄色譜圖，按內(nèi)標法以峰面積比值計算，甲基異丁基酮不得過 %；、其他均應(yīng)符合規(guī)定。 ％頭孢唑 林 鈉 比 對樣 品（ 蘇 州制 藥 ） 均 值 ： % (n=2)　均 值 ： % (n=6)　177。（見圖 ，圖 ）l 在系統(tǒng)適用性試驗中規(guī)定分離度的要求，在高分子雜質(zhì)檢查時，某些藥物分子單體與高聚物不能達到基線分離時，其分離度計算公式為：l R=聚合體的峰高 /單體與聚合體之間的谷高l （分離度 R應(yīng)大于 ）。表 凝膠色 譜測 定高分子聚合物（ 200５年版已收 載 21個品種 ） 原料 制 劑 頭孢哌酮鈉 注射用 頭孢哌酮鈉 頭孢唑 林 鈉 注射用 頭孢唑 林 鈉 頭孢 曲松 鈉 注射用 頭孢 曲松 鈉 頭孢噻肟鈉 注射用 頭孢噻肟鈉 頭孢呋 辛 鈉 注射用 頭孢呋 辛 鈉 頭孢 他 啶 注射用 頭孢 他 啶 青霉素 鈉 注射用青霉素 鈉 青霉素 V鉀 青霉素 V鉀 膠囊 阿莫西林 阿莫西林膠囊 頭孢 拉定表 .以免基線噪音影響結(jié)果正確性。l 有關(guān)物質(zhì) l 頭孢菌素類藥物原料 27個品種均規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)，制劑 42個品種除 6個品種顆粒與干混懸劑由于輔料干擾未規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)外 , 其他品種均有有關(guān)物質(zhì)檢查。l 內(nèi)酰胺類抗生素 本類抗生素包括：頭孢菌素類、青霉素類、酶抑制劑類、碳青霉烯類與單環(huán) β 內(nèi)酰胺類共 127個品種，占抗生素品種的 %。根據(jù)各品種雜質(zhì)的情況，在同一品種中可以同時應(yīng)用 2種或 3種的計算方法?？衫脤φ掌啡芤荷V圖中雜質(zhì)的保留時間，對特定雜質(zhì)進行控制。 應(yīng)用 HPLCELSD測定氨基糖苷類抗生素的組分，有關(guān)物質(zhì)，特定雜質(zhì)及含量的品種進一步增加。l 3. 本版藥典抗生素類增修訂有關(guān)物質(zhì)項較多， β 內(nèi)酰胺類抗生素 127個品種中有 116個品種采用 HPLC測定有關(guān)物質(zhì)。雜質(zhì) A用 HPLC檢測 ,靈敏度與正確性均優(yōu)于 TLC法。l 阿莫西林克拉維酸鉀分散片；l 注射用氨曲南l 2023年版藥典本類抗生素藥質(zhì)量標準要點 l 性狀 l 本類藥物均為半合成的頭孢菌素及其制劑，原料藥外觀性狀一般為白色至微黃色粉末或結(jié)晶性粉末。用雜質(zhì)對照品外標法計算已知雜質(zhì)的含量 ,用加校正因子與不加校正因子的自身對照法計算已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì)的含量和雜質(zhì)的總量。即兩種不同規(guī)格柱并列，可根據(jù)實際條件選擇，測定結(jié)果是一致的。l 如：頭孢泊肟酯l 殘留溶劑 甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷、異丙醇、丁酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、乙酸丁酯、1,2二氯乙烷、乙酸異丙酯、苯、四氯化碳、環(huán)己烷、二氧六環(huán)、甲基異丁基酮、吡啶、甲苯 照殘留溶劑測定法（附錄 Ⅷ P ）測定。 l 本類藥物制劑規(guī)格較多，最多有 11個規(guī)格。l 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 %四甲基氫氧化銨溶液（用磷酸調(diào)節(jié) pH值至 ） 乙腈 甲醇（ 900： 60： 40），每 1000ml中加入 ，檢測波長為 254nm。圖 130347202303批乙酰螺旋霉素標準品組分測定典型色譜圖l 由于原料的水溶性較差，因此要求口服制劑檢查溶出度或釋放度。 品種收載情況： 表 品種收載情況原料 制劑注射液 注射用 滴眼液 口服液 片 緩釋片 顆粒妥布霉素 √ √*硫酸小諾霉素 √ √ √硫酸巴龍霉素 √硫酸卡那霉素 √ √ √硫酸西索霉素 √硫酸慶大霉素 √ √ √ √ √硫酸阿米卡星 √ √*為新增品種原料 制 劑注射液 注射用 滴眼液 口服液片 緩釋片顆 粒阿米卡星硫酸奈替米星 √硫酸依替米星 √ √硫酸核糖霉素 √硫酸 鏈 霉素 √硫酸新霉素 √ √鹽 酸大 觀 霉素 √總計 14 8 6 4 1 4 1 1 關(guān)鍵檢測項目方法一覽：表 檢測項目方法原料 有關(guān)物 質(zhì) （包括特定 雜質(zhì) ）組 分 硫酸 鹽 含量 測 定TLC HPLCELSDHPLCUV HPLCELSDHPLCUVHPLCELSD滴定妥布霉素 √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸小 諾 霉素 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸巴 龍 霉素 √ 無 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸卡那霉素 卡 B √ ELSD硫酸西索霉素 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫