【正文】 酸 慶 大霉素 √ √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸阿米卡星 √ √ HPLCUV阿米卡星 √ HPLCUV原料 有關(guān)物 質(zhì) （包括特定 雜質(zhì) ）組 分 硫酸 鹽 含量 測 定TLC HPLCELSDHPLCUVHPLCELSDHPLCUVHPLCELSD滴定硫酸奈替米星 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸依替米星 √ √ HPLCELSD硫酸核糖霉素 √ 微 1硫酸 鏈 霉素 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸新霉素 新霉胺√ 微生物（ Ⅰ）鹽 酸大 觀 霉素 √ 微生物（ Ⅱ）l （ 1） TLCl 2023年版藥典首先在抗生素類滴眼液 硫酸卡那霉素滴眼液標(biāo)準(zhǔn)中列入滲透壓檢查，l l HPLC（限度： l 2023年 版藥典有 7個原料及其制劑共 23品種采用HPLCELSD方法檢查有關(guān)物質(zhì)、組分、特定雜質(zhì)。l 阿米卡星混合溶液的分離色譜圖圖 分子中存在酚羥基和烯醇型羥基，顯弱酸性；同時含有二甲胺基，顯弱堿性，故遇酸及堿，均能生成相應(yīng)的鹽，臨床上大多采用鹽酸鹽。 堿性條件下 :l 四環(huán)素已知雜質(zhì)含量用加校正因子的自身對照法計算，l 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰， l 用醋酸銨和乙腈替代草酸胺及 N,N－二甲基甲酰胺，l L 1EDTA鈉鹽 三乙胺（ 100： 10： 1）用醋酸調(diào)節(jié) pH值至 ]－乙腈 (83： 17) 鹽酸多西環(huán)素醋酸鹽緩沖液 [試驗過堿性流動相，效果不理想。l 表 流動相配比見下表 : 表 含量測定流動相 （ 2023年版）鹽酸土霉素醋酸鹽緩沖液 [該色譜條件下首次檢出了土霉素，含量很少，三批樣品均在 % 以下，l 三批樣品中 2乙酰 2去酰胺土霉素的含量約為 % ，有文獻報道 2乙酰 2去酰胺土霉素的抗菌活性很低 [2]，但未見其毒性的相關(guān)報道，故本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定其限度為 % ，l 鹽酸多西環(huán)素（ Doxycycline雜質(zhì)含量計算方法l l 硫酸核糖霉素及其制劑共 5個標(biāo)準(zhǔn)的含量測定采用微生物檢定法管碟法 .l （ 4）鹽酸大觀霉素及其制劑共 2個標(biāo)準(zhǔn)的含量測定采用微生物檢定法濁度法l （ 5）其他 21個標(biāo)準(zhǔn)的含量測定均采用微生物檢定法管碟法和微生物檢定法濁度法兩法并列，可任選一方法。柱前衍生 HPLC法可以在同一色譜條件下同時檢出卡那霉素、雜質(zhì) B、雜質(zhì) A以及其它雜質(zhì)，并可參考 BP2023阿米卡星項下系統(tǒng)適用性色譜圖定位，且藥廠出口采用此法，對本法的可行性已有數(shù)據(jù)可證明。硫酸新霉素滴眼液（滲透壓摩爾濃度比為）。l （供注射用）l 見表 。l 十四元環(huán)有紅霉素及其衍生物，具有結(jié)構(gòu)相近 ,無紫外吸收 ,特征性反應(yīng)不明顯的特點，以紅霉素、琥乙紅霉素、克拉霉素、羅紅霉素為代表 .l 十五元環(huán)有阿奇霉素；l 十六元環(huán)有乙酰螺旋霉素、吉他霉素等， 收 載 情況 原料 制劑 總計2023年版藥典收載品種 13 35 48其中 新增品種 2 4 6 品種收 載 情況 見 表 表 2023年版 藥 典大 環(huán) 內(nèi) 酯類 品種收 載 情況l 新增品種：l 原料： 制劑：l 交沙霉素、 交沙霉素片、l 丙酸交沙霉素、 丙酸交沙霉素顆粒、l 麥白霉素膠囊。l 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 甲醇（ 19:1）為流動相；檢測波長為 254nm。l 水分 l 本類藥物原料藥均采用水分測定法第一法 A測定水分，l 制劑中輔料對水分測定法有干擾時，則改為干燥失重。 ％l 應(yīng)用 HPCE測定鹽酸頭孢吡肟中 N甲基吡咯烷的含量，是本版藥典正文收載應(yīng)用HPCE的 2個品種之一。（見圖 ，圖 ）圖 （ 2023年版新增 19個品種） 原料 制 劑 頭孢唑肟鈉 注射用頭孢唑肟鈉 頭孢替唑鈉 注射用頭孢替唑鈉 頭孢尼西鈉 注射用頭孢尼西鈉 頭孢噻吩鈉 注射用頭孢噻吩 磺芐西林鈉 注射用磺芐西林鈉 阿洛西林鈉 注射用阿洛西林鈉 美洛西林鈉 注射用美洛西林鈉 氯唑西林鈉 注射用氯唑西林鈉 苯唑西林鈉 注射用苯唑西林鈉 普魯卡因青霉素 表 HPLC測 定高分子聚合物 （ 2023年版新增 2個品種） 原料 制 劑 頭孢 地 嗪鈉 注射用 頭孢 地 嗪鈉l 國內(nèi)關(guān)于 β 內(nèi)酰胺類抗生素高分子雜質(zhì)的研究工作是于 70年代開始，經(jīng)歷了近 40年的研究，于 2023年版藥典在 4個品種 8個藥品標(biāo)準(zhǔn)中正式收載了高分子雜質(zhì)檢查。l l 原料： l 另由于生產(chǎn)工藝的不同，各生產(chǎn)廠使用的有機溶媒也不同，同一品種中可能有幾十種的溶媒，為方便操作、經(jīng)試驗在標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定各溶劑的相對調(diào)整保留時間（ RART），檢查時可先做供試品，從供試品中檢出的溶媒的 RART與規(guī)定的 RART比較，確定為何種溶媒時，再進行對照品測定，可減少工作量，大大降低檢驗 成本 ， 提高工作效率。l 4. β 內(nèi)酰胺類抗生素的有關(guān)物質(zhì)檢查方法與國外藥典基本一致，在分離度試驗中根據(jù)實際情況進行修改，更有利方法的可操作性。 如 : 硫酸依替米星及制劑的有關(guān)物質(zhì) ,硫酸鹽及含量測定。 硫酸卡那霉素及制劑的有關(guān)物質(zhì)卡 B以及含量測定， 硫酸慶大霉素及制劑的慶大霉素 C組分及有關(guān)物質(zhì)測定， 硫酸小諾霉素及其制劑的組分測定。l 有很多品種采用 HPLC梯度洗脫法測定有關(guān)物質(zhì)，如：頭孢地尼，頭孢唑林鈉，拉氧頭孢鈉 , 阿莫西林及其復(fù)方制劑，氨芐西林等。l 11. 為保證臨床使用的安全有效，供注射用 β內(nèi)酰胺抗生素，除檢查有關(guān)物質(zhì)外，增加高分子聚合物的檢查。 l 2023年版藥典擴大到 11個品種的 21個藥品標(biāo)準(zhǔn)中均有高分子雜質(zhì)檢查。l 標(biāo)準(zhǔn)中增加有機溶媒檢查的品種較多l(xiāng) 本檢查法大多采用涂層毛細管柱為色譜柱，等溫，程序升溫，頂空進樣，l 內(nèi)標(biāo)法，外標(biāo)法計算結(jié)果。l 如 :注射用頭孢他啶，因含有 10%的碳酸鈉對水分測定有干擾，改為 60℃ 真空減壓干燥，l 頭孢地尼膠囊也改為 60℃ 真空減壓干燥。取拉氧頭孢對照品適量，加水溶解并稀釋制成每 1ml中約含 ， 取上述溶液適量，在 80℃ 水浴中加熱 30分鐘，冷卻，取 10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，拉氧頭孢 R異構(gòu)體、拉氧頭孢 S異構(gòu)體依次流出；拉氧頭孢 R異構(gòu)體和拉氧頭孢 S異構(gòu)體的分離度應(yīng)不小于，兩主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度均應(yīng)符合要求 。l 紅霉素腸溶膠囊 訂項 目概況 見 表 表 2023年版 藥 典大 環(huán) 內(nèi) 酯類 品種增修 訂項 目 項目 修訂 增訂 刪去結(jié) 構(gòu)式 1含量限度 5性狀 3鑒別 3（ HPLC 1項 和 IR 2 項 ）23(HPLC 11項 ， 顏 色反應(yīng) 和 TLC各 6項 ) 3（IR）釋 放度 /溶出度 13 1組分與有關(guān)物質(zhì) 26 3殘留溶 劑 1干燥失重 2可 見 異物和不溶性微粒 1含量 37 其中 濁 度法增 訂 21項 l 本類抗生素質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要點l 鑒別 l 標(biāo)準(zhǔn)中凡用 HPLC法測定組分含量以及有關(guān)物質(zhì)的品種均采用 HPLC法作為鑒別，并增加部分品種的 TLC法鑒別，大部分品種 HPLC法和 TLC法并列，可任選一項；l 原料藥也有用 IR作為鑒別，如羅紅霉素；l 有紫外吸收特性的品種也可用 UV法作為鑒別，如麥白霉素、交沙霉素；l 部分品種采用顯色反應(yīng)。表 有關(guān)物質(zhì)測定 (1) 品種 方法（ HPLC）丙酸交沙霉素 對 照 波 長 231nm交沙霉素 對 照 波 長 231nm克拉霉素 克拉霉素片克拉霉素膠囊克拉霉素 顆 粒 對 照2． 檢測 波 長 210nm阿奇霉素阿奇霉素干混 懸劑阿奇霉素片阿奇霉素分散片阿奇霉素膠囊阿奇霉素 顆 粒 TLC法修 訂為 HPLC法，無 該項檢查 的已增 訂（阿奇霉素 Gx為 紅 霉素 A偕 亞 胺 醚為 ）與不加校正因子（阿奇霉素 B和其他 單 個 雜質(zhì) ）的自身 對 照 波 長 210nm 劑 用，不同限度 劑 扣除相 對 保留 時間 輔 料峰紅 霉素 （ 紅 霉素 烯 醇 醚為 雜質(zhì) 1為 ）與不加校正因子的自身 對 照 波 長 215nm乳糖酸 紅 霉素注射用乳糖酸 紅 霉素（ 紅 霉素 烯 醇 醚為 雜質(zhì) 1為 ）與不加校正因子的自身 對 照 波 長 215nm表 有關(guān)物質(zhì)測定 (2) 品種 方法（ HPLC）硬脂酸 紅 霉素硬脂酸 紅 霉素片硬脂酸 紅 霉素膠囊（ 紅 霉素 烯 醇 醚為 雜質(zhì) 1為 ）與不加校正因子的自身 對 照 波 長 215nm依托 紅 霉素 紅 霉素 標(biāo) 法 計 算 檢測 波 長 190nm麥白霉素 A1為 基準(zhǔn) ,外 標(biāo) 法 計 算各有關(guān)物 質(zhì)總 量（不得 過 25%）檢測 波 長 232nm麥白霉素片 A1為 基準(zhǔn) ,外 標(biāo) 法 計 算各有關(guān)物 質(zhì)總 量（不得 過 30%） 波 長 232nm麥白霉素膠囊 A1為 基準(zhǔn) ,外 標(biāo) 法 計 算各有關(guān)物 質(zhì)總 量（不得 過 30%） 波 長 232nm羅紅 霉素羅紅 霉素片羅紅 霉素分散片羅紅 霉素膠囊 對 照 酰 胺峰外，并 對該 峰定位。 照品外 標(biāo) 法 計 算羅紅 霉素片羅紅 霉素分散片 , 照品外 標(biāo) 法 計 算 ,羅紅 霉素干混 懸劑 , , 照品外 標(biāo) 法 計 算 ,羅紅 霉素膠囊 , , 照品外 標(biāo) 法 計 算 , 酶 的加量以 單 位表示 ,羅紅 霉素 顆 粒（非包衣） , , 照品外 標(biāo) 法 計 算 ,克拉霉素片 , , 照品外 標(biāo) 法 計 算 ,克拉霉素膠囊 , , 照品外 標(biāo) 法 計 算 ,表 (2) 溶出度 測 定 (溶出液 HPLC法 測 定 )l 含量測定l 除個別品種（如克拉霉素、羅紅霉素、阿奇霉素）采用 HPLC法外，其他品種均采用微生物檢定法測定效價，見表 。l 少數(shù)品種有顯色反應(yīng)鑒別。阿米卡星 l 2023年版藥典除硫酸卡那霉素，硫酸慶大霉素 ,硫酸小諾霉素三個原料及其制劑共 9個品種的組分、特定雜質(zhì)檢查方法為 HPLCELSD方法，l 圖 表 含量測定HPLC ELSD法柱前衍生化 HPLCUV法微生物 檢 定法 ( 管碟法 )微生物 檢 定法 (濁 度法 ) 微生物 檢 定法 ( 管碟法 或 濁 度法 ) 7 4 5 2 21l 四環(huán)素類抗生素l 四環(huán)類抗生素的基本特點，l 在無菌檢查去抑菌作用時可以利用該性質(zhì)。一般采用 TLC/HPLC、 IR和氯化物反應(yīng)，部分品種增加了紫外鑒別。Hyclate）中有 6個潛在雜質(zhì)，分別命名為雜質(zhì) A、 B、 C、 D、 E、 F，其中雜質(zhì) A2023年版藥典的起草時對流動相作了較大修改，對多西環(huán)素及其制劑色譜分離的影響因素包括水相緩沖鹽的種類和濃度、 pH值、掃尾劑、有機相、柱溫等進行了系統(tǒng)的考察，確定了新的流動相 . l L 1醋酸銨 圖 .金霉素分離圖圖 4.. 金。采用酸性流動相：氯酸 二甲亞砜 水(8:525:467)(pH小于 )取代了 2023年版的流動相，分離效果如下。l (1)L 1醋酸銨 三批樣品中不存在 2乙酰 2去酰胺四環(huán)素雜質(zhì)，如其他樣品含有 2乙酰 2去酰胺四環(huán)素時，可將該雜質(zhì)作為其他雜質(zhì)控制，規(guī)定其他雜質(zhì)限度為 % ， 限度為： 可能是多西環(huán)素在溶液或放置過程中生成的差向異構(gòu)體。(2)四環(huán)類抗生素的游離堿，在水中的溶解度很小，當(dāng) pH值低于 4或高于 8時，可以得到高濃度的四環(huán)類化合物的水溶液。是兩性化合物。2023年版中測定硫酸鹽含量采用的是容量法與傳統(tǒng)的重量法測定相比，有其先進性，但滴定終