【正文】 熒光探針定量 PCR技術在臨床 實驗室診斷中的應用 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院檢驗科 胥飚 38,200,000 (PCR) 8,800,000 (周杰倫） 內 容 提 要 一、基因診斷技術在醫(yī)學檢驗中的地位 二、熒光探針定量 PCR的技術特點 三、熒光探針定量 PCR在臨床醫(yī)學中的應用 臨床實驗醫(yī)學發(fā)展 三個時代 標志技術 性質 生化診斷時代 生化分析 表象 免疫學診斷時代 酶免、放免 表象 分子 (基因 )診斷時代 基因體外擴增 (PCR) 本質 基因診斷技術的發(fā)展及在臨床診斷中的地位 基因診斷（分子診斷）：以核酸作為診斷的物質基礎 主要包括： 遺傳性疾病 有遺傳趨向疾病的連鎖分析 疾病及腫瘤易感基因的分析 病原體的檢測 親子鑒定和個人認定 人類基因組計劃（ HGP）與基因診斷 基因診斷技術： PCR技術為其標志性技術 聚合酶鏈反應（ PCR） PCR： Polymerase Chain Reaction 基因體外擴增技術 Saiki PK 等 1985年 Science 230： 1350 Mullis K 1993年 諾貝爾化學獎 PCR循環(huán)次數與 DNA產量關系 循環(huán)次數 DNA的鏈數 1 222 2 2 232 6 3 242 14 10 2112 2046 15 2162 65534 20 2212 2097150 25 2262 67,108,864 30 2312 2,147,483,646 熒光探針定量 PCR的技術特點 第一代 PCR技術：變性、退火、延伸 結果判斷：電泳 缺點：假陽性（污染）、 假陰性（靈敏度低） 定性檢測 第二代 PCR技術：常規(guī) PCR+探針 例如：熒光探針 PCR技術 PCRELISA ? ? 熒光探針定量 PCR技術的 原理 及過