【正文】 在今后，對生物炭利用的研究仍需進(jìn)一步深入開展。隨著生物炭研究的開展，會對這些現(xiàn)象的改善產(chǎn)生積極作用。將容量瓶移至自來水流下冷卻3min。該溶液需要現(xiàn)用現(xiàn)配。幾乎在所有生物體內(nèi)都有過氧化氫酶，在某些細(xì)菌里，其數(shù)量約為細(xì)胞干重的1%。稱取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。 生物炭對土壤蔗糖酶活性影響測定 實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)驗(yàn)使用一種土壤（磚紅壤），設(shè)置三個實(shí)驗(yàn)組（低生物炭組：培養(yǎng)一定量的土壤，含有一定量的有機(jī)肥和少量的生物炭；中生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和中量（2%)的生物炭；高生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和高量（5%)的生物炭），一個純土壤組（添加等量土壤但不添加任何有機(jī)肥和生物炭），一個無生物炭組（添加等量土壤和有機(jī)肥但不添加任何生物炭），每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，共35n？個樣。低生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%%的生物炭。實(shí)驗(yàn)需要重復(fù)3次。中生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%的有機(jī)肥和2%的生物炭。 土壤預(yù)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)將所需土壤的含水量調(diào)整到約田間持水量的60%（一般加水量為土壤量的15%到20%之間，以不粘結(jié)但很濕潤為準(zhǔn)），將土壤容器用塑料薄膜封蓋以免水分過快損失，將塑料薄膜用針扎一些小孔，以保持氣體流通，保證土壤重要酶的活性。通過向預(yù)培養(yǎng)的不同組土壤中注入等量的蔗糖溶液并都加入磷酸緩沖液和甲苯。與此同時，也有深入細(xì)化地研究：在土壤中施用生物炭可對玉米、小麥等作物產(chǎn)生積極的影響，能夠增加土壤中主要微生物的數(shù)量[12]；但在土壤中施用高量（5%)生物炭對植物生長可能會有抑制作用[19]。在土壤營養(yǎng)成分轉(zhuǎn)化、土壤腐殖質(zhì)形成過程中，土壤微生物是的重要參與者。 當(dāng)前的研究表明，土壤施用一定量的生物炭后，一方面，酸性土壤的通過提高pH 值從而土壤肥力得到增強(qiáng)[2]，另一方面，借助其陽離子吸附從而使土壤營養(yǎng)物質(zhì)的持有量得到增加[3]。關(guān)鍵詞：磚紅壤，有機(jī)肥，生物炭，酶活性 Effect of biochar on soil organic fertilization important enzyme activityAuthor：Li hongjiTutor：Shi yunfeng（書寫格式應(yīng)與中文摘要對應(yīng)，題目一律用大寫字母）ABSTRACT(空一行)（小四號Times New Roman，行距20磅，首行縮進(jìn)2字符）..（空1行）Keywords: Latosol, Organic Fertilizer, Biochar, Activity 目 錄1 前言 1 生物炭簡介 1 土壤酶簡介 2 生物炭對土壤酶影響國內(nèi)外研究現(xiàn)狀 2 國外研究現(xiàn)狀 2 國內(nèi)研究現(xiàn)狀 3 研究的目的與意義 3 3 研究的意義 3 研究內(nèi)容與技術(shù)路線 4 研究內(nèi)容 4 技術(shù)路線 52 實(shí)驗(yàn)部分 6 實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備 6 生物炭的制備 6 有機(jī)肥的處理 6 土壤的處理方法 6 實(shí)驗(yàn)方法 6 生物炭對土壤過氧化氫酶活性影響測定 6 生物炭對土壤脲酶活性影響測定 8 生物炭對土壤蔗糖酶活性影響測定 10 檢測方法 11 溶液中H2O2含量的測定方法 12 溶液中尿素含量的測定方法 12 溶液中葡萄糖含量的測定方法 133 結(jié)果與分析 15 生物炭對土壤主要酶活性的影響 15 生物炭對土壤過氧化氫酶活性的影響 15 生物炭對土壤脲酶活性的影響 16 生物炭對土壤蔗糖酶活性的影響 17 生物炭對土壤主要酶活性的整體影響 184 結(jié)論與展望 20 結(jié)論 20 展望 20參考文獻(xiàn) 22致謝 24附錄 251 前言近年來研究表明，生物炭對農(nóng)業(yè)、環(huán)境保護(hù)、能源利用等領(lǐng)域有著積極的作用，其本質(zhì)是高度芳香化難熔性固態(tài)高聚產(chǎn)物，在完全或部分缺氧的情況下，動植物遺體或其他生物質(zhì)在低于700 ℃的環(huán)境下熱解炭化產(chǎn)生[1]。同時，生物炭在一定程度上也提高了土壤微生物量氮水平，但當(dāng)施用量達(dá)到一定程度量時，反而會顯著降低土壤微生物量氮的含量。與此同時，在土壤中添加生物炭會對菌根真菌產(chǎn)生積極的影響，使菌根真菌的豐度有所增加，促進(jìn)菌根真菌對植物根部的侵染[17]。在恒溫條件下培養(yǎng)5h。 實(shí)驗(yàn)方法 生物炭對土壤過氧化氫酶活性影響測定 實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)驗(yàn)使用一種土壤（磚紅壤），設(shè)置三個實(shí)驗(yàn)組（低生物炭組：培養(yǎng)一定量的土壤，含有一定量的有機(jī)肥和少量的生物炭；中生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和中量（2%)的生物炭；高生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和高量（5%)的生物炭），一個純土壤組（添加等量土壤但不添加任何有機(jī)肥和生物炭），一個無生物炭組（添加等量土壤和有機(jī)肥但不添加任何生物炭），每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，共35n個樣。低生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%%的生物炭。實(shí)驗(yàn)不能及時測定的土壤樣品在4℃保存，可認(rèn)為土壤酶活性和微生物學(xué)性質(zhì)不會發(fā)生較大變化，但不宜長期儲存。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。用NH3N標(biāo)準(zhǔn)溶液做標(biāo)準(zhǔn)曲線，取濾液加入顯色劑待其顯色后，測定各處理NH3N生成量脲酶活性采用單位時間（h），單位質(zhì)量土壤（1g）所催化生成的NH3N的量（mg）表示，即mg/（g稱取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。蔗糖酶活性以單位時間（1h）、單位土壤（1g）生成的葡萄糖的質(zhì)量（mg）表示，即mg/(g通?？梢酝ㄟ^測定生成的氨的數(shù)目以表示土壤脲酶的活性。 操作步驟標(biāo)準(zhǔn)曲線做法：取0、定容到50ml，其濃度分別為含有葡萄糖0、10mg/L。土壤中生物炭對不同酶影響情況差別很大，酶活性增強(qiáng)幅度從10%到200%，其中對脲酶活性影響最大，過氧化氫酶影響最小。實(shí)驗(yàn)證明生物炭能夠在不同程度上增加土壤重要酶活性，并延長土壤重要酶活性持續(xù)時間，在改善土壤的生境，增加土壤的肥力，促進(jìn)作物的生長方面有著積極影響。未來，將在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步開展對生物炭的研究。但其促進(jìn)效果差別巨大，土壤重要酶活性增強(qiáng)幅度從5%到150%不等。應(yīng)用Excel軟件以實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)曲線的吸光度（y軸）對濃度（x軸）作圖，擬合其方程，得出吸光度B和濃度的關(guān)系，并計算各處理樣品的濃度[20]。 操作步驟標(biāo)準(zhǔn)曲線：取6支50ml容量瓶，分別加入NH3N標(biāo)準(zhǔn)溶液0、10ml，定容后，NH3N的含量分別為0、1120mg/L。：。稱取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。 土壤預(yù)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)將所需土壤的含水量調(diào)整到約田間持水量的60%（一般加水量為土壤量的15%到20%之間，以不粘結(jié)但很濕潤為準(zhǔn)），將土壤容器用塑料薄膜封蓋以免水分過快損失，將塑料薄膜用針扎一些小孔，以保持氣體流通，保證土壤重要酶的活性。將三角瓶密封，置于38℃恒溫中培養(yǎng)。按照各要求處理，將一定量土壤、所需有機(jī)肥及生物炭混勻，做好補(bǔ)水（即補(bǔ)充所加入的干燥有機(jī)肥和生物炭所需的水量），放入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。高生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%的有機(jī)肥和5%的生物炭。 溶液配制酶促反應(yīng)試劑的配制：準(zhǔn)確量取1ml的30%H2O2溶液，放入100ml的容量瓶中，稀釋至100ml，并定溶。整合三方面的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，通過Excel作圖，研究在不同量生物炭下施用有機(jī)肥土壤中重要酶的活性情況，探索生物炭對土壤和土壤酶產(chǎn)生積極影響的最適量。 研究的目的與意義測定不同量生物炭對施用有機(jī)肥的磚紅壤中重要酶活性的變化情況，探索適量生物炭對磚紅壤中重要酶活性的積極影響。土壤作為適合微生物生存的微環(huán)境，具有六大特點(diǎn)[13]：土壤中的微生物種類多樣，微生物量巨大；存在復(fù)雜的營養(yǎng)交互作用；活微生物在土壤中占據(jù)的空間較小，僅占土壤中生物有效空間的5%以下；土壤膠體能吸附重要的生物大分子如DNA、蛋白質(zhì)等；微生物在土壤固相中居于核心地位；并存著生物調(diào)節(jié)和非生物調(diào)節(jié)的生物化學(xué)反應(yīng)。本文在此基礎(chǔ)上，通過實(shí)驗(yàn)不同量生物炭對施用有機(jī)肥的磚紅壤中重要酶活性的影響，研究探討施用有機(jī)肥后的磚紅壤最適生物炭施用量，選擇合適的生物炭，以期使施用有