【正文】 在今后，對(duì)生物炭利用的研究仍需進(jìn)一步深入開(kāi)展。隨著生物炭研究的開(kāi)展，會(huì)對(duì)這些現(xiàn)象的改善產(chǎn)生積極作用。將容量瓶移至自來(lái)水流下冷卻3min。該溶液需要現(xiàn)用現(xiàn)配。幾乎在所有生物體內(nèi)都有過(guò)氧化氫酶，在某些細(xì)菌里，其數(shù)量約為細(xì)胞干重的1%。稱(chēng)取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。 生物炭對(duì)土壤蔗糖酶活性影響測(cè)定 實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)驗(yàn)使用一種土壤（磚紅壤），設(shè)置三個(gè)實(shí)驗(yàn)組（低生物炭組：培養(yǎng)一定量的土壤，含有一定量的有機(jī)肥和少量的生物炭；中生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和中量（2%)的生物炭；高生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和高量（5%)的生物炭），一個(gè)純土壤組（添加等量土壤但不添加任何有機(jī)肥和生物炭），一個(gè)無(wú)生物炭組（添加等量土壤和有機(jī)肥但不添加任何生物炭），每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，共35n？個(gè)樣。低生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%%的生物炭。實(shí)驗(yàn)需要重復(fù)3次。中生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%的有機(jī)肥和2%的生物炭。 土壤預(yù)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)將所需土壤的含水量調(diào)整到約田間持水量的60%（一般加水量為土壤量的15%到20%之間，以不粘結(jié)但很濕潤(rùn)為準(zhǔn)），將土壤容器用塑料薄膜封蓋以免水分過(guò)快損失，將塑料薄膜用針扎一些小孔，以保持氣體流通，保證土壤重要酶的活性。通過(guò)向預(yù)培養(yǎng)的不同組土壤中注入等量的蔗糖溶液并都加入磷酸緩沖液和甲苯。與此同時(shí)，也有深入細(xì)化地研究：在土壤中施用生物炭可對(duì)玉米、小麥等作物產(chǎn)生積極的影響，能夠增加土壤中主要微生物的數(shù)量[12]；但在土壤中施用高量（5%)生物炭對(duì)植物生長(zhǎng)可能會(huì)有抑制作用[19]。在土壤營(yíng)養(yǎng)成分轉(zhuǎn)化、土壤腐殖質(zhì)形成過(guò)程中，土壤微生物是的重要參與者。 當(dāng)前的研究表明，土壤施用一定量的生物炭后，一方面，酸性土壤的通過(guò)提高pH 值從而土壤肥力得到增強(qiáng)[2]，另一方面，借助其陽(yáng)離子吸附從而使土壤營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的持有量得到增加[3]。關(guān)鍵詞：磚紅壤，有機(jī)肥，生物炭，酶活性 Effect of biochar on soil organic fertilization important enzyme activityAuthor：Li hongjiTutor：Shi yunfeng（書(shū)寫(xiě)格式應(yīng)與中文摘要對(duì)應(yīng)，題目一律用大寫(xiě)字母）ABSTRACT(空一行)（小四號(hào)Times New Roman，行距20磅，首行縮進(jìn)2字符）..（空1行）Keywords: Latosol, Organic Fertilizer, Biochar, Activity 目 錄1 前言 1 生物炭簡(jiǎn)介 1 土壤酶簡(jiǎn)介 2 生物炭對(duì)土壤酶影響國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀 2 國(guó)外研究現(xiàn)狀 2 國(guó)內(nèi)研究現(xiàn)狀 3 研究的目的與意義 3 3 研究的意義 3 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線(xiàn) 4 研究?jī)?nèi)容 4 技術(shù)路線(xiàn) 52 實(shí)驗(yàn)部分 6 實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備 6 生物炭的制備 6 有機(jī)肥的處理 6 土壤的處理方法 6 實(shí)驗(yàn)方法 6 生物炭對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性影響測(cè)定 6 生物炭對(duì)土壤脲酶活性影響測(cè)定 8 生物炭對(duì)土壤蔗糖酶活性影響測(cè)定 10 檢測(cè)方法 11 溶液中H2O2含量的測(cè)定方法 12 溶液中尿素含量的測(cè)定方法 12 溶液中葡萄糖含量的測(cè)定方法 133 結(jié)果與分析 15 生物炭對(duì)土壤主要酶活性的影響 15 生物炭對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性的影響 15 生物炭對(duì)土壤脲酶活性的影響 16 生物炭對(duì)土壤蔗糖酶活性的影響 17 生物炭對(duì)土壤主要酶活性的整體影響 184 結(jié)論與展望 20 結(jié)論 20 展望 20參考文獻(xiàn) 22致謝 24附錄 251 前言近年來(lái)研究表明，生物炭對(duì)農(nóng)業(yè)、環(huán)境保護(hù)、能源利用等領(lǐng)域有著積極的作用，其本質(zhì)是高度芳香化難熔性固態(tài)高聚產(chǎn)物，在完全或部分缺氧的情況下，動(dòng)植物遺體或其他生物質(zhì)在低于700 ℃的環(huán)境下熱解炭化產(chǎn)生[1]。同時(shí)，生物炭在一定程度上也提高了土壤微生物量氮水平，但當(dāng)施用量達(dá)到一定程度量時(shí)，反而會(huì)顯著降低土壤微生物量氮的含量。與此同時(shí)，在土壤中添加生物炭會(huì)對(duì)菌根真菌產(chǎn)生積極的影響，使菌根真菌的豐度有所增加，促進(jìn)菌根真菌對(duì)植物根部的侵染[17]。在恒溫條件下培養(yǎng)5h。 實(shí)驗(yàn)方法 生物炭對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性影響測(cè)定 實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)驗(yàn)使用一種土壤（磚紅壤），設(shè)置三個(gè)實(shí)驗(yàn)組（低生物炭組：培養(yǎng)一定量的土壤，含有一定量的有機(jī)肥和少量的生物炭；中生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和中量（2%)的生物炭；高生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和高量（5%)的生物炭），一個(gè)純土壤組（添加等量土壤但不添加任何有機(jī)肥和生物炭），一個(gè)無(wú)生物炭組（添加等量土壤和有機(jī)肥但不添加任何生物炭），每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，共35n個(gè)樣。低生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%%的生物炭。實(shí)驗(yàn)不能及時(shí)測(cè)定的土壤樣品在4℃保存，可認(rèn)為土壤酶活性和微生物學(xué)性質(zhì)不會(huì)發(fā)生較大變化，但不宜長(zhǎng)期儲(chǔ)存。稱(chēng)取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。用NH3N標(biāo)準(zhǔn)溶液做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，取濾液加入顯色劑待其顯色后，測(cè)定各處理NH3N生成量脲酶活性采用單位時(shí)間（h），單位質(zhì)量土壤（1g）所催化生成的NH3N的量（mg）表示，即mg/（g稱(chēng)取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。蔗糖酶活性以單位時(shí)間（1h）、單位土壤（1g）生成的葡萄糖的質(zhì)量（mg）表示，即mg/(g通常可以通過(guò)測(cè)定生成的氨的數(shù)目以表示土壤脲酶的活性。 操作步驟標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)做法：取0、定容到50ml，其濃度分別為含有葡萄糖0、10mg/L。土壤中生物炭對(duì)不同酶影響情況差別很大，酶活性增強(qiáng)幅度從10%到200%，其中對(duì)脲酶活性影響最大，過(guò)氧化氫酶影響最小。實(shí)驗(yàn)證明生物炭能夠在不同程度上增加土壤重要酶活性，并延長(zhǎng)土壤重要酶活性持續(xù)時(shí)間，在改善土壤的生境，增加土壤的肥力，促進(jìn)作物的生長(zhǎng)方面有著積極影響。未來(lái)，將在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步開(kāi)展對(duì)生物炭的研究。但其促進(jìn)效果差別巨大，土壤重要酶活性增強(qiáng)幅度從5%到150%不等。應(yīng)用Excel軟件以實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的吸光度（y軸）對(duì)濃度（x軸）作圖，擬合其方程，得出吸光度B和濃度的關(guān)系，并計(jì)算各處理樣品的濃度[20]。 操作步驟標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：取6支50ml容量瓶，分別加入NH3N標(biāo)準(zhǔn)溶液0、10ml，定容后，NH3N的含量分別為0、1120mg/L。：。稱(chēng)取2g土樣，置于50ml三角瓶中，注入15ml 8%蔗糖溶液，5ml ，搖勻混合物。 土壤預(yù)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)將所需土壤的含水量調(diào)整到約田間持水量的60%（一般加水量為土壤量的15%到20%之間，以不粘結(jié)但很濕潤(rùn)為準(zhǔn)），將土壤容器用塑料薄膜封蓋以免水分過(guò)快損失，將塑料薄膜用針扎一些小孔，以保持氣體流通，保證土壤重要酶的活性。將三角瓶密封，置于38℃恒溫中培養(yǎng)。按照各要求處理，將一定量土壤、所需有機(jī)肥及生物炭混勻，做好補(bǔ)水（即補(bǔ)充所加入的干燥有機(jī)肥和生物炭所需的水量），放入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。高生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%的有機(jī)肥和5%的生物炭。 溶液配制酶促反應(yīng)試劑的配制：準(zhǔn)確量取1ml的30%H2O2溶液，放入100ml的容量瓶中，稀釋至100ml，并定溶。整合三方面的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，通過(guò)Excel作圖，研究在不同量生物炭下施用有機(jī)肥土壤中重要酶的活性情況，探索生物炭對(duì)土壤和土壤酶產(chǎn)生積極影響的最適量。 研究的目的與意義測(cè)定不同量生物炭對(duì)施用有機(jī)肥的磚紅壤中重要酶活性的變化情況，探索適量生物炭對(duì)磚紅壤中重要酶活性的積極影響。土壤作為適合微生物生存的微環(huán)境，具有六大特點(diǎn)[13]：土壤中的微生物種類(lèi)多樣，微生物量巨大；存在復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)交互作用；活微生物在土壤中占據(jù)的空間較小，僅占土壤中生物有效空間的5%以下；土壤膠體能吸附重要的生物大分子如DNA、蛋白質(zhì)等；微生物在土壤固相中居于核心地位；并存著生物調(diào)節(jié)和非生物調(diào)節(jié)的生物化學(xué)反應(yīng)。本文在此基礎(chǔ)上，通過(guò)實(shí)驗(yàn)不同量生物炭對(duì)施用有機(jī)肥的磚紅壤中重要酶活性的影響，研究探討施用有機(jī)肥后的磚紅壤最適生物炭施用量，選擇合適的生物炭，以期使施用有