【正文】 稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。 溶液配制10%尿素：準(zhǔn)確稱量10g尿素溶解并定容為100ml1mol/L氫氧化鈉：準(zhǔn)確稱取4g氫氧化鈉溶解并定容為100ml檸檬酸鈉緩沖液：；；將兩溶液混勻，用1mol/，定容為200ml。 土壤預(yù)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)將所需土壤的含水量調(diào)整到約田間持水量的60%（一般加水量為土壤量的15%到20%之間，以不粘結(jié)但很濕潤(rùn)為準(zhǔn)），將土壤容器用塑料薄膜封蓋以免水分過(guò)快損失，將塑料薄膜用針扎一些小孔，以保持氣體流通，保證土壤重要酶的活性。實(shí)驗(yàn)不能及時(shí)測(cè)定的土壤樣品在4℃保存，可認(rèn)為土壤酶活性和微生物學(xué)性質(zhì)不會(huì)發(fā)生較大變化，但不宜長(zhǎng)期儲(chǔ)存。取濾液，用對(duì)照組做標(biāo)準(zhǔn)H2O2含量，測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組H2O2含量。破碎大顆粒后，密封處理，室溫下振蕩培養(yǎng)。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，%過(guò)氧化氫。低生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%%的生物炭。破碎大顆粒后，密封處理，室溫下振蕩培養(yǎng)。 處理設(shè)置及檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，測(cè)定預(yù)培養(yǎng)土壤的過(guò)氧化氫酶活性，代表土壤酶活性的初始值。每隔3天，補(bǔ)水一次。 實(shí)驗(yàn)方法 生物炭對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性影響測(cè)定 實(shí)驗(yàn)設(shè)置實(shí)驗(yàn)使用一種土壤（磚紅壤），設(shè)置三個(gè)實(shí)驗(yàn)組（低生物炭組：培養(yǎng)一定量的土壤，含有一定量的有機(jī)肥和少量的生物炭；中生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和中量（2%)的生物炭；高生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機(jī)肥和高量（5%)的生物炭），一個(gè)純土壤組（添加等量土壤但不添加任何有機(jī)肥和生物炭），一個(gè)無(wú)生物炭組（添加等量土壤和有機(jī)肥但不添加任何生物炭），每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，共35n個(gè)樣。當(dāng)馬弗爐中溫度升高到指定溫度開(kāi)始計(jì)時(shí)，2h后停止加熱，將鐵盒取出并自然冷卻到室溫。因此，采集三亞常見(jiàn)的新鮮廢棄水稻秸稈，經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的處理制作本實(shí)驗(yàn)的生物炭并做好密封保存以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。在恒溫條件下培養(yǎng)24h。在恒溫條件下培養(yǎng)5h。第一方面：測(cè)定在不同量生物炭下土壤過(guò)氧化氫酶活性的變化情況。目前生物炭在環(huán)境、生態(tài)等領(lǐng)域作用機(jī)理的基礎(chǔ)研究方面鮮有報(bào)道，還缺少大規(guī)模試驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)的支持，在土壤生境中的地位與作用方面的研究才剛剛起步，具體的作用機(jī)理與貢獻(xiàn)還不清楚，尤其是在國(guó)內(nèi)，亟待加強(qiáng)生物炭在土壤方面的基礎(chǔ)理論和研究技術(shù)，拓寬研究領(lǐng)域。但目前中國(guó)關(guān)于生物炭在土壤酶影響方面的研究，所做的實(shí)驗(yàn)是相對(duì)較少，主要還是針對(duì)國(guó)外所做的成果進(jìn)行研究和歸納。與此同時(shí)，在土壤中添加生物炭會(huì)對(duì)菌根真菌產(chǎn)生積極的影響，使菌根真菌的豐度有所增加，促進(jìn)菌根真菌對(duì)植物根部的侵染[17]。生物炭對(duì)施用有機(jī)肥土壤中微生物的影響是存在著復(fù)雜的、不同方面的因素，其作用機(jī)制還未能能夠全面的研究。 生物炭對(duì)土壤酶影響國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀 國(guó)外研究現(xiàn)狀生物炭的使用一直伴隨著人類的農(nóng)業(yè)發(fā)展歷程，而對(duì)生物炭的研究，早在20世紀(jì)80年代國(guó)外就已經(jīng)有了一定的進(jìn)展，但其農(nóng)田土壤中的研究對(duì)象主要為增加農(nóng)作物產(chǎn)量，如日本在1994年就有研究報(bào)道關(guān)于生物炭對(duì)柑橘生長(zhǎng)的影響。土壤微生物在土壤有機(jī)質(zhì)的腐殖化、再循環(huán)和礦化等反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮著不可替代重要作用。同時(shí)，生物炭在一定程度上也提高了土壤微生物量氮水平，但當(dāng)施用量達(dá)到一定程度量時(shí)，反而會(huì)顯著降低土壤微生物量氮的含量。大多數(shù)研究表明，生物炭的添加會(huì)增加土壤微生物量，會(huì)明顯改變土壤微生物群落結(jié)構(gòu)組成和土壤酶活性。諸多研究表明，添加生物炭會(huì)刺激土壤微生物活動(dòng)，從而影響微生物特性，但其影響程度與實(shí)驗(yàn)條件(室內(nèi)培養(yǎng)或者田間試驗(yàn))、土壤質(zhì)地及肥力狀況、土地利用方式、養(yǎng)分管理及生物炭自身性質(zhì)(材料來(lái)源、熱解溫度)等密切相關(guān)。與此同時(shí)，土壤中的微生物群落組成情況和數(shù)量也會(huì)改變[4]，因此也就間接地對(duì)此土壤上生長(zhǎng)的植物產(chǎn)生了影響[5]。關(guān)鍵詞：磚紅壤，有機(jī)肥，生物炭，酶活性 Effect of biochar on soil organic fertilization important enzyme activityAuthor：Li hongjiTutor：Shi yunfeng（書(shū)寫(xiě)格式應(yīng)與中文摘要對(duì)應(yīng)，題目一律用大寫(xiě)字母）ABSTRACT(空一行)（小四號(hào)Times New Roman，行距20磅，首行縮進(jìn)2字符）..（空1行）Keywords: Latosol, Organic Fertilizer, Biochar, Activity 目 錄1 前言 1 生物炭簡(jiǎn)介 1 土壤酶簡(jiǎn)介 2 生物炭對(duì)土壤酶影響國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀 2 國(guó)外研究現(xiàn)狀 2 國(guó)內(nèi)研究現(xiàn)狀 3 研究的目的與意義 3 3 研究的意義 3 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線 4 研究?jī)?nèi)容 4 技術(shù)路線 52 實(shí)驗(yàn)部分 6 實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備 6 生物炭的制備 6 有機(jī)肥的處理 6 土壤的處理方法 6 實(shí)驗(yàn)方法 6 生物炭對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性影響測(cè)定 6 生物炭對(duì)土壤脲酶活性影響測(cè)定 8 生物炭對(duì)土壤蔗糖酶活性影響測(cè)定 10 檢測(cè)方法 11 溶液中H2O2含量的測(cè)定方法 12 溶液中尿素含量的測(cè)定方法 12 溶液中葡萄糖含量的測(cè)定方法 133 結(jié)果與分析 15 生物炭對(duì)土壤主要酶活性的影響 15 生物炭對(duì)土壤過(guò)氧化氫酶活性的影響 15 生物炭對(duì)土壤脲酶活性的影響 16 生物炭對(duì)土壤蔗糖酶活性的影響 17 生物炭對(duì)土壤主要酶活性的整體影響 184 結(jié)論與展望 20 結(jié)論 20 展望 20參考文獻(xiàn) 22致謝 24附錄 251 前言近年來(lái)研究表明，生物炭對(duì)農(nóng)業(yè)、環(huán)境保護(hù)、能源利用等領(lǐng)域有著積極的作用，其本質(zhì)是高度芳香化難熔性固態(tài)高聚產(chǎn)物，在完全或部分缺氧的情況下，動(dòng)植物遺體或其他生物質(zhì)在低于700 ℃的環(huán)境下熱解炭化產(chǎn)生[1]。研究中發(fā)現(xiàn)，生物炭對(duì)不同類型土壤重要酶活性的影響程度不同，其中脲酶活性變化幅度最大，過(guò)氧化氫酶變化幅度最低，這可能與它們本身在土壤生境中原有微生物量有關(guān)。結(jié)果表明，在施用有機(jī)肥土壤中加入生物炭能夠增強(qiáng)土壤重要酶活性，其活性隨生物炭施加量的增多而上升。隨著對(duì)生物炭研究的拓寬，生物炭的利用將有很大發(fā)展的前景。 當(dāng)前的研究表明，土壤施用一定量的生物炭后，一方面，酸性土壤的通過(guò)提高pH 值從而土壤肥力得到增強(qiáng)[2]，另一方面，借助其陽(yáng)離子吸附從而使土壤營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的持有量得到增加[3]。 生物炭簡(jiǎn)介生物炭是指植物生物質(zhì)在部分或完全缺氧的條件經(jīng)熱解炭化產(chǎn)生的一類高度芳香化、富含碳素的固態(tài)物質(zhì)，具有高度穩(wěn)定性[6]。生物炭對(duì)土壤微生物的影響是復(fù)雜的、多方面的，作用機(jī)制尚不完全清楚。研究發(fā)現(xiàn)[11]，生物炭的施用顯著提高了土壤微生物量碳水平，且隨施用量增加，其對(duì)土壤微生物量碳的影響越大。在土壤營(yíng)養(yǎng)成分轉(zhuǎn)化、土壤腐殖質(zhì)形成過(guò)程中，土壤微生物是的重要參與者。通過(guò)借助土壤其特點(diǎn)，調(diào)控土壤組成成分，可以借此研究同種物質(zhì)不同量對(duì)土壤中酶活性的影響。在另一方面，生物炭對(duì)土壤重要酶的影響存在著矛盾性。但也有研究表面，在土壤中添加生物炭會(huì)明顯地減少土壤微生物量碳含量，但對(duì)其氮含量影響不明顯[16]。與此同時(shí)，也有深入細(xì)化地研究：在土壤中施用生物炭可對(duì)玉米、小麥等作物產(chǎn)生積極的影響，能夠增加土壤中主要微生物的數(shù)量[12]；但在土壤中施用高量（5%)生物炭對(duì)植物生長(zhǎng)可能會(huì)有抑制作用[19]。 研究的意義近幾年，生物炭作為新型環(huán)保類資源引起廣泛關(guān)注，在改良土壤、減排溫室氣體和修復(fù)受污染環(huán)境等方面都有著相當(dāng)大的應(yīng)用潛力。土壤預(yù)培養(yǎng)時(shí)間共計(jì)50天，在培養(yǎng)開(kāi)始后的第10天、第20天、第35天、第50天分別測(cè)定實(shí)驗(yàn)土壤中重要酶活性的變化情況。通過(guò)向預(yù)培養(yǎng)的不同組土壤中注入等量的尿素溶液并都加入檸檬酸緩沖液和甲苯。通過(guò)向預(yù)培養(yǎng)的不同組土壤中注入等量的蔗糖溶液并都加入磷酸緩沖液和甲苯。23分組注入尿素溶液、檸檬酸緩沖液、甲苯培養(yǎng)50天，定時(shí)補(bǔ)水，在第350天測(cè)定酶活性變化分組注入蔗糖溶液、磷酸緩沖液