【正文】 稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，均勻加入2ml甲苯，處理15min。 溶液配制10%尿素：準確稱量10g尿素溶解并定容為100ml1mol/L氫氧化鈉：準確稱取4g氫氧化鈉溶解并定容為100ml檸檬酸鈉緩沖液：；；將兩溶液混勻，用1mol/，定容為200ml。 土壤預培養(yǎng)實驗將所需土壤的含水量調整到約田間持水量的60%（一般加水量為土壤量的15%到20%之間，以不粘結但很濕潤為準），將土壤容器用塑料薄膜封蓋以免水分過快損失，將塑料薄膜用針扎一些小孔，以保持氣體流通，保證土壤重要酶的活性。實驗不能及時測定的土壤樣品在4℃保存，可認為土壤酶活性和微生物學性質不會發(fā)生較大變化，但不宜長期儲存。取濾液，用對照組做標準H2O2含量，測定各實驗組H2O2含量。破碎大顆粒后，密封處理，室溫下振蕩培養(yǎng)。稱取5g土壤，置于150ml三角瓶中，%過氧化氫。低生物炭組處理：培養(yǎng)等量的土壤，含有2%%的生物炭。破碎大顆粒后，密封處理，室溫下振蕩培養(yǎng)。 處理設置及檢測在實驗開始前，測定預培養(yǎng)土壤的過氧化氫酶活性，代表土壤酶活性的初始值。每隔3天，補水一次。 實驗方法 生物炭對土壤過氧化氫酶活性影響測定 實驗設置實驗使用一種土壤（磚紅壤），設置三個實驗組（低生物炭組：培養(yǎng)一定量的土壤，含有一定量的有機肥和少量的生物炭；中生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機肥和中量（2%)的生物炭；高生物炭組：培養(yǎng)等量的土壤，含有等量的有機肥和高量（5%)的生物炭），一個純土壤組（添加等量土壤但不添加任何有機肥和生物炭），一個無生物炭組（添加等量土壤和有機肥但不添加任何生物炭），每組實驗重復3次，共35n個樣。當馬弗爐中溫度升高到指定溫度開始計時，2h后停止加熱，將鐵盒取出并自然冷卻到室溫。因此，采集三亞常見的新鮮廢棄水稻秸稈，經過進一步的處理制作本實驗的生物炭并做好密封保存以備后續(xù)實驗進行。在恒溫條件下培養(yǎng)24h。在恒溫條件下培養(yǎng)5h。第一方面：測定在不同量生物炭下土壤過氧化氫酶活性的變化情況。目前生物炭在環(huán)境、生態(tài)等領域作用機理的基礎研究方面鮮有報道，還缺少大規(guī)模試驗和統(tǒng)計數(shù)據(jù)的支持，在土壤生境中的地位與作用方面的研究才剛剛起步，具體的作用機理與貢獻還不清楚，尤其是在國內，亟待加強生物炭在土壤方面的基礎理論和研究技術，拓寬研究領域。但目前中國關于生物炭在土壤酶影響方面的研究，所做的實驗是相對較少，主要還是針對國外所做的成果進行研究和歸納。與此同時，在土壤中添加生物炭會對菌根真菌產生積極的影響，使菌根真菌的豐度有所增加，促進菌根真菌對植物根部的侵染[17]。生物炭對施用有機肥土壤中微生物的影響是存在著復雜的、不同方面的因素，其作用機制還未能能夠全面的研究。 生物炭對土壤酶影響國內外研究現(xiàn)狀 國外研究現(xiàn)狀生物炭的使用一直伴隨著人類的農業(yè)發(fā)展歷程，而對生物炭的研究，早在20世紀80年代國外就已經有了一定的進展，但其農田土壤中的研究對象主要為增加農作物產量，如日本在1994年就有研究報道關于生物炭對柑橘生長的影響。土壤微生物在土壤有機質的腐殖化、再循環(huán)和礦化等反應過程中發(fā)揮著不可替代重要作用。同時，生物炭在一定程度上也提高了土壤微生物量氮水平，但當施用量達到一定程度量時，反而會顯著降低土壤微生物量氮的含量。大多數(shù)研究表明，生物炭的添加會增加土壤微生物量，會明顯改變土壤微生物群落結構組成和土壤酶活性。諸多研究表明，添加生物炭會刺激土壤微生物活動，從而影響微生物特性，但其影響程度與實驗條件(室內培養(yǎng)或者田間試驗)、土壤質地及肥力狀況、土地利用方式、養(yǎng)分管理及生物炭自身性質(材料來源、熱解溫度)等密切相關。與此同時，土壤中的微生物群落組成情況和數(shù)量也會改變[4]，因此也就間接地對此土壤上生長的植物產生了影響[5]。關鍵詞：磚紅壤，有機肥，生物炭，酶活性 Effect of biochar on soil organic fertilization important enzyme activityAuthor：Li hongjiTutor：Shi yunfeng（書寫格式應與中文摘要對應，題目一律用大寫字母）ABSTRACT(空一行)（小四號Times New Roman，行距20磅，首行縮進2字符）..（空1行）Keywords: Latosol, Organic Fertilizer, Biochar, Activity 目 錄1 前言 1 生物炭簡介 1 土壤酶簡介 2 生物炭對土壤酶影響國內外研究現(xiàn)狀 2 國外研究現(xiàn)狀 2 國內研究現(xiàn)狀 3 研究的目的與意義 3 3 研究的意義 3 研究內容與技術路線 4 研究內容 4 技術路線 52 實驗部分 6 實驗材料的準備 6 生物炭的制備 6 有機肥的處理 6 土壤的處理方法 6 實驗方法 6 生物炭對土壤過氧化氫酶活性影響測定 6 生物炭對土壤脲酶活性影響測定 8 生物炭對土壤蔗糖酶活性影響測定 10 檢測方法 11 溶液中H2O2含量的測定方法 12 溶液中尿素含量的測定方法 12 溶液中葡萄糖含量的測定方法 133 結果與分析 15 生物炭對土壤主要酶活性的影響 15 生物炭對土壤過氧化氫酶活性的影響 15 生物炭對土壤脲酶活性的影響 16 生物炭對土壤蔗糖酶活性的影響 17 生物炭對土壤主要酶活性的整體影響 184 結論與展望 20 結論 20 展望 20參考文獻 22致謝 24附錄 251 前言近年來研究表明，生物炭對農業(yè)、環(huán)境保護、能源利用等領域有著積極的作用，其本質是高度芳香化難熔性固態(tài)高聚產物，在完全或部分缺氧的情況下，動植物遺體或其他生物質在低于700 ℃的環(huán)境下熱解炭化產生[1]。研究中發(fā)現(xiàn)，生物炭對不同類型土壤重要酶活性的影響程度不同，其中脲酶活性變化幅度最大，過氧化氫酶變化幅度最低，這可能與它們本身在土壤生境中原有微生物量有關。結果表明，在施用有機肥土壤中加入生物炭能夠增強土壤重要酶活性，其活性隨生物炭施加量的增多而上升。隨著對生物炭研究的拓寬，生物炭的利用將有很大發(fā)展的前景。 當前的研究表明，土壤施用一定量的生物炭后，一方面，酸性土壤的通過提高pH 值從而土壤肥力得到增強[2]，另一方面，借助其陽離子吸附從而使土壤營養(yǎng)物質的持有量得到增加[3]。 生物炭簡介生物炭是指植物生物質在部分或完全缺氧的條件經熱解炭化產生的一類高度芳香化、富含碳素的固態(tài)物質，具有高度穩(wěn)定性[6]。生物炭對土壤微生物的影響是復雜的、多方面的，作用機制尚不完全清楚。研究發(fā)現(xiàn)[11]，生物炭的施用顯著提高了土壤微生物量碳水平，且隨施用量增加，其對土壤微生物量碳的影響越大。在土壤營養(yǎng)成分轉化、土壤腐殖質形成過程中，土壤微生物是的重要參與者。通過借助土壤其特點，調控土壤組成成分，可以借此研究同種物質不同量對土壤中酶活性的影響。在另一方面，生物炭對土壤重要酶的影響存在著矛盾性。但也有研究表面，在土壤中添加生物炭會明顯地減少土壤微生物量碳含量，但對其氮含量影響不明顯[16]。與此同時，也有深入細化地研究：在土壤中施用生物炭可對玉米、小麥等作物產生積極的影響，能夠增加土壤中主要微生物的數(shù)量[12]；但在土壤中施用高量（5%)生物炭對植物生長可能會有抑制作用[19]。 研究的意義近幾年，生物炭作為新型環(huán)保類資源引起廣泛關注，在改良土壤、減排溫室氣體和修復受污染環(huán)境等方面都有著相當大的應用潛力。土壤預培養(yǎng)時間共計50天，在培養(yǎng)開始后的第10天、第20天、第35天、第50天分別測定實驗土壤中重要酶活性的變化情況。通過向預培養(yǎng)的不同組土壤中注入等量的尿素溶液并都加入檸檬酸緩沖液和甲苯。通過向預培養(yǎng)的不同組土壤中注入等量的蔗糖溶液并都加入磷酸緩沖液和甲苯。23分組注入尿素溶液、檸檬酸緩沖液、甲苯培養(yǎng)50天，定時補水，在第350天測定酶活性變化分組注入蔗糖溶液、磷酸緩沖液