【正文】 底物濃度(mol/L) 1 10－ 6 5 10－ 6 1 10－ 5 1 10－ 4 1 10－ 3 1 10－ 2 初速度 (μmol/min) ? ① 把表中的數(shù)據(jù)繪制成圖，在給出的酶量下的 Vmax是多少 ? ? ② 根據(jù)米氏方程，用 Vmax、 υ 和 〔 S〕 推演出 Km的代數(shù)表達式。抑制劑與活性中心以外的基團結(jié)合，不與底物競爭酶的活性中心，所以稱為非競爭性抑制劑。 1 Km 1 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax A. 取米氏方程式的倒數(shù)形式 ： 4 2 0 2 4 6 8 101/[S ](1/m m ol .L1)1/v1/Vmax 斜率 =Km/Vmax 1/Km ? 米氏常數(shù) Km的 測定： B、 EH法 ? 兩邊分別乘以 Km+[S]／ [S]，得 v=Kmv/［ S］ +Vmax 酶的 Km在實際應(yīng)用中的意義 ? 鑒定酶：通過測定 Km，可鑒別不同來源或相同來源但在不同發(fā)育階段，不同生理狀態(tài)下催化相同反應(yīng)的酶是否是屬于同一種酶。 的復合體或結(jié)合物。 最適溫度不是一個固定的常數(shù) ，它隨底物的種類、濃度 , 溶液的離子強度 , pH, 反應(yīng)時間等的影響。 ? 酶的比活力 ? 比活力 =活力單位系數(shù) /每毫克酶蛋白 ? 是表示酶純度的一個指標。（淀粉酶活力單位的定義是：最適條件下每小時分解 1克淀粉的酶量稱為 1個活力單位。 5)、激活劑對酶反應(yīng)速度的影響 酶的激活劑 1. 無機離子 （ 1）一些金屬離子，如 Na+、 K+、 Mg2+、 Ca2+、 Cu2+、 Zn2+、 Fe2+等。 米氏常數(shù)的意義及測定 Km — 米氏常數(shù) Vmax — 最大反應(yīng)速度 當?shù)孜餄舛容^低時 反應(yīng)速度與底物濃度成正比；反應(yīng)為一級反應(yīng)。 1. 竟爭性抑制 某些抑制劑的化學結(jié)構(gòu)與底物相似，因而能與底物竟爭與酶活性中心結(jié)合。 ? B、隨機順序，Ｓ １ 為底物Ａ，Ｓ ２ 為底物Ｂ。L－ 1時，計算產(chǎn)物的生成量。 反競爭性抑制作用動力學 有無抑制劑存在時酶促反應(yīng)的動力學方程 表觀 雙底物酶促反應(yīng)動力學 ? 一）、順序機制：底物的結(jié)合和產(chǎn)物的釋放按一定順序進行。抑制劑 可以通過透析等方法被除去 ，并且能部分或全部恢復酶的活性。 V=V m a x [ S ]K m + [ S ] 根據(jù)中間產(chǎn)物學說，酶促反應(yīng)分兩步進行 : ? 米氏方程的推導： 米氏方程 V=V m a x [ S ]K m + [ S