【正文】 。同法配制3份。 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)供試品溶液：取本品適量（約相當(dāng)于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A適量，振搖，使充分溶解，加流動相A稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。，取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ，雜質(zhì)Ⅲ，雜質(zhì)Ⅳ，雜質(zhì)Ⅴ，雜質(zhì)Ⅵ，混合均勻，作為供試品。定量限試驗(yàn) 同原料藥。各已知雜質(zhì)測的含量的RSD均小于10%。系統(tǒng)適用性主峰及各已知雜質(zhì)與相鄰雜質(zhì)分離良好，理論板數(shù)符合要求。如MUG陽性、靛基質(zhì)陽性，判檢出大腸埃希菌；如MUG陰性、靛基質(zhì)陰性，判未檢出大腸埃希菌。菌液組測定試驗(yàn)所加入試驗(yàn)菌的菌數(shù)。 計(jì)算公式：含量（%）=（W對分別為對照品的稱樣量，mg；P對為對照品的含量；A樣、A對分別為供試品、對照品溶液中沃諾拉贊的峰面積；V樣、V對分別為供試品溶液、對照品溶液的稀釋體積） 分別測定每片以標(biāo)示量為100的相對含量，求其均值和標(biāo)準(zhǔn)差以及標(biāo)示量與均值之差的絕對值：如，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若，則不符合規(guī)定；若，且，則應(yīng)另取20支復(fù)試，根據(jù)初、復(fù)試結(jié)果，計(jì)算30支的均值、標(biāo)準(zhǔn)差和標(biāo)示量與均值之差的絕對值：如，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若，則不符合規(guī)定。 含量均勻度檢查方法：含量均勻度檢查法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅹ E） 高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D)儀器與用具：高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）、容量瓶、移液管、燒杯，PH計(jì)。另取雜質(zhì)Ⅶ工作對照品適量，精密稱定，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅴ D）試驗(yàn)，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，（）甲醇（52：48）為流動相A，甲醇為流動相B，按上表梯度進(jìn)行洗脫，檢測波長為230nm。色譜條件：流動相：（）甲醇（52:48）流速：：流動相 檢測器：紫外檢測器 波長：230nm 色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（5μm 250mm）具體試驗(yàn)操作：在含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，比較供試品溶液中沃諾拉贊峰與對照品溶液中沃諾拉贊峰的保留時間。試藥與試劑：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。取富馬酸沃諾拉贊工作對照品及雜質(zhì)工作對照品各適量，作為系統(tǒng)適用性溶液。梯度如下表：時間（分鐘）流動相A（%）流動相B（%）01000710001090910901000201000 具體試驗(yàn)操作：取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A適量，振搖，使充分溶解，加流動相A稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。 計(jì)算公式：（A供為供試品溶液的主峰面積；A對為對照品溶液主峰面積；M對為對照品的稱樣量，mg；T對為對照品的含量；V對為對照品溶液的稀釋體積；V供為供試品溶液的稀釋體積；X為標(biāo)示量，10mg或20mg）限度：不得低于標(biāo)示量的85%。依法測定10片中沃諾拉贊的含量。立即傾注瓊脂培養(yǎng)基15～20ml，每株菌平行制備2個平皿，待凝固后置規(guī)定溫度培養(yǎng)3～5天觀察結(jié)果，測定其菌數(shù)。本底對照的MUG和靛基質(zhì)試驗(yàn)應(yīng)為陰性。 分析方法學(xué)驗(yàn)證用樣品批號規(guī)格批量（片）試制日期試制地點(diǎn)XA00910mg155山東富創(chuàng)醫(yī)藥科技有限公司XS15030110mg36402015030110mg36480～2015030210mg36160～2015030310mg36840～XB00120mg145XS15030220mg1800～2015030420mg18460～2015030520mg18520 ～2015030620mg18560～ 有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證 有關(guān)物質(zhì)檢查方法學(xué)驗(yàn)證總結(jié)試驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證結(jié)果條件選擇C18柱，（）甲醇（52:48）為流動相A，甲醇為流動相B，進(jìn)行梯度洗脫；紫外檢測器，檢測波長為230nm。耐用性采用不同色譜柱，不同的流動相比例、pH、鹽濃度等檢查本品的有關(guān)物質(zhì)，各已知雜質(zhì)的分離度均符合要求。（～13，制劑的質(zhì)量控制一第65~77頁） 富馬酸沃諾拉贊片有關(guān)物質(zhì)檢查破壞試驗(yàn)結(jié)果名稱沃諾拉贊總峰面積主峰面積/%物料平衡/%分離度峰純度未 破 壞合格22467470100高溫破壞合格22340471光照破壞合格22346631酸 破 壞合格21616957堿 破 壞合格21194823氧化破壞合格21645931計(jì)算公式：物料平衡%=（破壞后總峰面積/濃度）/（破壞前總峰面積/濃度）結(jié)論：溶劑及輔料均不干擾本品的測定，各破壞條件下主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求，主峰未檢出不純物，樣品破壞前后物料守恒，故該方法測定本品有關(guān)物質(zhì)的專屬性良好。分別取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ工作對照品各適量，精密稱定，作為雜質(zhì)對照品溶液。（~49，制劑的質(zhì)量控制一第96~113頁） 富馬酸沃諾拉贊片有關(guān)物質(zhì)檢查中間精密度試驗(yàn)結(jié)果序號123456平均值RSD%雜質(zhì)Ⅰ（%）雜質(zhì)Ⅱ（%）雜質(zhì)Ⅲ（%）雜質(zhì)Ⅳ（%）雜質(zhì)Ⅴ（%）雜質(zhì)Ⅵ（%）其他單雜（%）其他總雜（%）結(jié)論：此法檢查本品的有關(guān)物質(zhì)中間精密度良好。 富馬酸沃諾拉贊各已知雜質(zhì)的測定結(jié)果名稱雜質(zhì)Ⅰ雜質(zhì)Ⅱ雜質(zhì)Ⅲ雜質(zhì)Ⅳ雜質(zhì)Ⅴ雜質(zhì)Ⅵ測得含量%未檢出未檢出未檢出未檢出回收率溶液：1）取雜質(zhì)Ⅰ、Ⅱ，雜質(zhì)Ⅲ，雜質(zhì)Ⅳ，雜質(zhì)Ⅴ，雜質(zhì)Ⅵ，精密稱定，置200ml量瓶中，加流動相A溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密稱定，置同一20ml量瓶中，按處方比例加入輔料，加流動相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率（80%濃度）溶液。再按下式計(jì)算回收率：回收率（%）=式中：M測得量為回收率溶液中已知雜質(zhì)的測得量； M供試品中的量為回收率溶液中供試品的已知雜質(zhì)的量； M加入量為回收率溶液中已知雜質(zhì)的加入量； 富馬酸沃諾拉贊雜質(zhì)測定回收率試驗(yàn)結(jié)果編號M加入量/μgM測得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅰ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%123456789編號M加入量/μgM測得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅱ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%123456789編號M加入量/μgM測得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅲ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090編號M加入量/μgM測得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅳ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090編號M加入量/μgM測得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅴ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090編號M加入量/μgM測得量/μgM供試品/mg雜質(zhì)Ⅵ%M供試品中的量/mg回收率/%平均/%RSD/%1未檢出02030405060708090結(jié)論：此方法測定雜質(zhì)準(zhǔn)確性良好。 吡啶3磺酸方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)項(xiàng)目驗(yàn)證結(jié)果條件選擇C18柱，（）為流動相A，甲醇為流動相B，進(jìn)行梯度洗脫；紫外檢測器，檢測波長為261nm。耐用性采用不同色譜柱，不同的流動相比例、pH、鹽濃度等檢查吡啶3磺酸，吡啶3磺酸測的含量的RSD均小于10%。（～25，制劑的質(zhì)量控制一第179~191頁） 富馬酸沃諾拉贊片吡啶3磺酸檢查破壞試驗(yàn)結(jié)果名稱吡啶3磺酸總峰面積主峰面積%吡啶3磺酸峰面積吡啶3磺酸面積%物料平衡%分離度峰純度未 破 壞合格129089360937/高溫破壞合格134946966205光照破壞合格131575089733酸 破 壞合格1351111139062堿 破 壞合格1370201153110氧化破壞合格132680297055計(jì)算公式：物料平衡%=（破壞后總峰面積/濃度）/（破壞前總峰面積/濃度）結(jié)論：溶劑及輔料均不干擾本品的測定，各破壞條件下主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求，主峰未檢出不純物，樣品破壞前后物料守恒，故該方法測定本品有關(guān)物質(zhì)的專屬性良好。雜質(zhì)對照溶液：取雜質(zhì)Ⅶ工作對照品適量，精密稱定，作為對照品溶液。（~49，制劑的質(zhì)量控制一第204~215頁） 富馬酸沃諾拉贊片吡啶3磺酸檢查中間精密度試驗(yàn)結(jié)果序號123456平均值RSD%吡啶3磺酸%結(jié)論：此法檢查本品的有關(guān)物質(zhì)中間精密度良好。2）取雜質(zhì)Ⅶ，精密稱定，置100ml量瓶中，加流動相A溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密稱定，置同一20ml量瓶中，加流動相A溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為回收率（100%濃度）溶液。取雜質(zhì)Ⅶ工作對照品適量，精密稱定，作為對照品溶液。 富馬酸沃諾拉贊含量測定線性關(guān)系試驗(yàn)結(jié)果等級濃度C（μg/ml）峰面積A線性方程R212008116A=104985C325832947166346679443762545190907結(jié)論：～，濃度C與峰面積A線性關(guān)系良好。（~70，制劑的質(zhì)量控制二第9~56頁） 富馬酸沃諾拉贊片含量測定重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果序號123456平均值RSD%含量(%)結(jié)論：此方法測定富馬酸沃諾拉贊片含量重復(fù)性良好。取重復(fù)性項(xiàng)下供試品粉末測定。濾膜吸附試驗(yàn)濾膜對溶液沒有吸附作用，采用濾膜過濾不會影響溶出度的測定?！?，轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn)，溶出介質(zhì)均需經(jīng)脫氣處理，經(jīng)30min時，取出10ml，濾過。精密量取上述溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)取本品（規(guī)格：10mg）1片，照溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅹ C第二法）測定，轉(zhuǎn)速為每分鐘50轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時，取溶液適量，濾過，作為供試品溶液，將供試品溶液室溫放置10小時，分別于第0、10小時，精密量取上述溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計(jì)算每片在不同時間點(diǎn)的累積溶出度，、10。 富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）中試三批樣品溶出度各批間的RSD值取樣時間2min3min5min10min30min201503012015030220150303RSD%水2015030120150302