高中生物專(zhuān)題5課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段課件新人教版選修1(完整版)
【正文】 為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備 。 ③ DNA聚合酶是將單個(gè)核苷酸加到已有的單鏈片段的 3′端上 ， 需要模板 ， 而 DNA連接酶連接的是兩條 DNA片段的缺口 ， 不需要模板。 PCR擴(kuò)增過(guò)程中的易錯(cuò)點(diǎn) ① PCR過(guò)程中無(wú)解旋酶 ， 破壞氫鍵需要升高溫度才能打開(kāi)氫鍵 ， 但此時(shí)的溫度還不能破壞磷酸二酯鍵 ， 因此 ， 熱變性后是 DNA單鏈 ， 并未分解成單體 。 2． 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 (1)實(shí)驗(yàn)中 DNA含量的測(cè)定 。 檢測(cè) DNA片段擴(kuò)增情況可以采用上述方法 ， 也可以采用電泳檢測(cè)的方法 ， 可以通過(guò)在紫外線下直接觀察 DNA帶的分布及粗細(xì)程度來(lái)評(píng)價(jià)擴(kuò)增的效果 。 4． PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)是快速 、 高效 、 靈活 、 易于操作 。 可能的原因有：漏加了 PCR的反應(yīng)成分 、 各反應(yīng)成分的用量不當(dāng) 、 PCR程序設(shè)置不當(dāng)?shù)?。 ③ 測(cè)定：取 DNA稀釋液 100 μL至比色杯中 ， 測(cè)定 260 nm處的光吸收值 。 三、 PCR的實(shí)驗(yàn)操作 1． 操作步驟 (1)按 PCR反應(yīng)體系的配方配制所需試劑 。 答案： A ?變式訓(xùn)練 1． PCR技術(shù)中 ， 引物的作用是 ( ) A． 打開(kāi) DNA雙鏈 B． 催化合成 DNA子鏈 C． 使 DNA聚合酶能夠從引物的 3′端開(kāi)始復(fù)制 D． 提供模板 解
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