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生化工程6-種子擴(kuò)大(完整版)

2025-07-01 12:04上一頁面

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【正文】 同。但接種量過大或者過小,均會(huì)影響發(fā)酵。 ? 一級種子二級發(fā)酵:谷氨酸棒桿菌 ? 二級種子三級發(fā)酵:青霉菌 ? 三級種子四級發(fā)酵:灰色鏈霉菌 ? 種子罐級數(shù) 取決于: ? ( 1)菌種生長特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度; ? ( 2)所采用發(fā)酵罐的容積。 ? 孢子培養(yǎng)基是為了獲得孢子,應(yīng)注意避免孢子發(fā)育為菌體,所以通常使用營養(yǎng)限制的固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)溫度一般為 37℃ 。種子擴(kuò)大培養(yǎng) 種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在 砂土管 、 冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種 接入試管斜面活化后 , 再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級擴(kuò)大培養(yǎng)而獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程 。細(xì)菌菌體培養(yǎng)時(shí)間一般為 1~2天,產(chǎn)芽孢的細(xì)菌培養(yǎng)則需要 5~10天。 ? (二)液體種子制備 ? 對 于產(chǎn)孢子能力不強(qiáng)或孢子發(fā)芽慢的菌種,如產(chǎn)鏈霉素的灰色鏈霉 菌、產(chǎn) 卡那霉素的卡那鏈霉 菌可 以用搖瓶液體培養(yǎng)法。 ? 細(xì)菌 :生長快,種子用量比例少,級數(shù)也較少,二級發(fā)酵。過大會(huì)引起溶氧不足,影響產(chǎn)物合成;而且會(huì)過多移入代謝廢物,也不經(jīng)濟(jì);過小會(huì)延長培養(yǎng)時(shí)間,降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。蛋白胨加工原料不同如魚胨或骨胨對孢子影響也不同 。這個(gè)時(shí)期稱為對數(shù)生長期 隨著細(xì)胞生長,培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物減少,廢物積累,導(dǎo)致細(xì)胞生長速率下降,進(jìn)入減速期和穩(wěn)定期。 ? 產(chǎn)物通常為細(xì)胞生長必須的初級代謝產(chǎn)物,如葡糖酸,單細(xì)胞蛋白等 生長部分相關(guān)型 ? 產(chǎn)物是能量代謝的間接結(jié)果,不是底物的直接氧化產(chǎn)物,產(chǎn)物的生成與細(xì)胞生長部分偶聯(lián)。 補(bǔ)料分批培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn) 在這樣一種系統(tǒng)中可以維持低的基質(zhì)濃度,避免快速利用碳源的阻遏效應(yīng);可以通過補(bǔ)料控制達(dá)到最佳的生長和產(chǎn)物合成條件;還可以利用計(jì)算機(jī)控制合理的補(bǔ)料速率,穩(wěn)定最佳生產(chǎn)工藝。 ? 用于恒濁培養(yǎng)的培養(yǎng)裝置稱為 恒濁器 ? 用恒濁法連續(xù)培養(yǎng)微生物,可控制微生物在最高生長速率與最高細(xì)胞密度的水平上生長繁殖,達(dá)到高效率培養(yǎng)的目的。利于節(jié)約菌體。 ? 連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn): ? 在發(fā)酵達(dá)到穩(wěn)定后,其非生產(chǎn)時(shí)間大大減少,設(shè)備利用效率高,生產(chǎn)能力大,產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定,工藝易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,節(jié)約了大量人力物力水蒸氣等。用于恒化培養(yǎng)的裝置稱為恒化器。由于有物料的加入增加了染菌機(jī)會(huì) 半連續(xù)培養(yǎng) 在補(bǔ)料分批培養(yǎng)的基礎(chǔ)上間歇放掉部分發(fā)酵液(帶放)稱為半連續(xù)培養(yǎng)。 ? 在基質(zhì)消耗和菌體生長后,菌體利用中間代謝反應(yīng)來形成產(chǎn)物。 影響延滯期長短的因素: 在發(fā)酵工業(yè)上需設(shè)法盡量縮短延遲期; 采取的 縮短延滯期的 措施有: 增加接種量; (群體優(yōu)勢 適應(yīng)性增強(qiáng)) 采用對數(shù)生長期的健壯菌種; 調(diào)整培養(yǎng)基的成分,在種子培養(yǎng)基中加入發(fā)酵培養(yǎng)基的某些成分。 種子質(zhì)量的控制 ? 菌種的穩(wěn)定性檢查與復(fù)壯 ? 無雜菌檢查 青霉素生產(chǎn)的種子制備 制備過程 安培管 → 斜面孢子 → 大米孢子 →
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