生化工程6-種子擴(kuò)大(完整版)
【正文】 同。但接種量過(guò)大或者過(guò)小，均會(huì)影響發(fā)酵。 ? 一級(jí)種子二級(jí)發(fā)酵：谷氨酸棒桿菌 ? 二級(jí)種子三級(jí)發(fā)酵：青霉菌 ? 三級(jí)種子四級(jí)發(fā)酵：灰色鏈霉菌 ? 種子罐級(jí)數(shù) 取決于： ? （ 1）菌種生長(zhǎng)特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度； ? （ 2）所采用發(fā)酵罐的容積。 ? 孢子培養(yǎng)基是為了獲得孢子，應(yīng)注意避免孢子發(fā)育為菌體，所以通常使用營(yíng)養(yǎng)限制的固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)溫度一般為 37℃ 。種子擴(kuò)大培養(yǎng) 種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在 砂土管 、 冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種 接入試管斜面活化后 ， 再經(jīng)過(guò)扁瓶或搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)而獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過(guò)程 。細(xì)菌菌體培養(yǎng)時(shí)間一般為 1~2天，產(chǎn)芽孢的細(xì)菌培養(yǎng)則需要 5~10天。 ? （二）液體種子制備 ? 對(duì) 于產(chǎn)孢子能力不強(qiáng)或孢子發(fā)芽慢的菌種，如產(chǎn)鏈霉素的灰色鏈霉 菌、產(chǎn) 卡那霉素的卡那鏈霉 菌可 以用搖瓶液體培養(yǎng)法。 ? 細(xì)菌 ：生長(zhǎng)快，種子用量比例少，級(jí)數(shù)也較少，二級(jí)發(fā)酵。過(guò)大會(huì)引起溶氧不足，影響產(chǎn)物合成；而且會(huì)過(guò)多移入代謝廢物，也不經(jīng)濟(jì)；過(guò)小會(huì)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間，降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。蛋白胨加工原料不同如魚(yú)胨或骨胨對(duì)孢子影響也不同 。這個(gè)時(shí)期稱(chēng)為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 隨著細(xì)胞生長(zhǎng)，培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物減少，廢物積累，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)速率下降，進(jìn)入減速期和穩(wěn)定期。 ? 產(chǎn)物通常為細(xì)胞生長(zhǎng)必須的初級(jí)代謝產(chǎn)物，如葡糖酸，單細(xì)胞蛋白等 生長(zhǎng)部分相關(guān)型 ? 產(chǎn)物是能量代謝的間接結(jié)果，不是底物的直接氧化產(chǎn)物，產(chǎn)物的生成與細(xì)胞生長(zhǎng)部分偶聯(lián)。 補(bǔ)料分批培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn) 在這樣一種系統(tǒng)中可以維持低的基質(zhì)濃度，避免快速利用碳源的阻遏效應(yīng)；可以通過(guò)補(bǔ)料控制達(dá)到最佳的生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成條件；還可以利用計(jì)算機(jī)控制合理的補(bǔ)料速率，穩(wěn)定最佳生產(chǎn)工藝。 ? 用于恒濁培養(yǎng)的培養(yǎng)裝置稱(chēng)為 恒濁器 ? 用恒濁法連續(xù)培養(yǎng)微生物，可控制微生物在最高生長(zhǎng)速率與最高細(xì)胞密度的水平上生長(zhǎng)繁殖，達(dá)到高效率培養(yǎng)的目的。利于節(jié)約菌體。 ? 連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn)： ? 在發(fā)酵達(dá)到穩(wěn)定后，其非生產(chǎn)時(shí)間大大減少，設(shè)備利用效率高，生產(chǎn)能力大，產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定，工藝易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，節(jié)約了大量人力物力水蒸氣等。用于恒化培養(yǎng)的裝置稱(chēng)為恒化器。由于有物料的加入增加了染菌機(jī)會(huì) 半連續(xù)培養(yǎng) 在補(bǔ)料分批培養(yǎng)的基礎(chǔ)上間歇放掉部分發(fā)酵液（帶放）稱(chēng)為半連續(xù)培養(yǎng)。 ? 在基質(zhì)消耗和菌體生長(zhǎng)后，菌體利用中間代謝反應(yīng)來(lái)形成產(chǎn)物。 影響延滯期長(zhǎng)短的因素： 在發(fā)酵工業(yè)上需設(shè)法盡量縮短延遲期； 采取的 縮短延滯期的 措施有： 增加接種量； （群體優(yōu)勢(shì) 適應(yīng)性增強(qiáng)） 采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的健壯菌種； 調(diào)整培養(yǎng)基的成分，在種子培養(yǎng)基中加入發(fā)酵培養(yǎng)基的某些成分。 種子質(zhì)量的控制 ? 菌種的穩(wěn)定性檢查與復(fù)壯 ? 無(wú)雜菌檢查 青霉素生產(chǎn)的種子制備 制備過(guò)程 安培管 → 斜面孢子 → 大米孢子 →
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