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生化工程6-種子擴大-文庫吧

2025-04-07 12:04 本頁面


【正文】 ? 指制備種子需逐級擴大培養(yǎng)的次數,需要根據菌種的生長繁殖速率,發(fā)酵罐的容積綜合確定。 ? 一級種子二級發(fā)酵:谷氨酸棒桿菌 ? 二級種子三級發(fā)酵:青霉菌 ? 三級種子四級發(fā)酵:灰色鏈霉菌 ? 種子罐級數 取決于: ? ( 1)菌種生長特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度; ? ( 2)所采用發(fā)酵罐的容積。 ? 細菌 :生長快,種子用量比例少,級數也較少,二級發(fā)酵。 ? 霉菌 :生長較慢,如青霉菌,三級發(fā)酵 ? 放線菌 :生長更慢,采用四級發(fā)酵 ? 酵母 :比細菌慢,比霉菌,放線菌快,通常用一級種子 種子罐的級數越少 , 越有利于簡化工藝和控制 , 并可減少由于多次移種而帶來染菌的機會 。 也須 考慮盡量延長發(fā)酵罐生產產物的時間 , 縮短由于種子發(fā)芽 、 生長而占用的非生產時間 , 以提高發(fā)酵罐的生產率。 接種齡與接種量 ? 接種齡 :種子的培養(yǎng)時間。 ? 種齡過于年輕:前期生長緩慢,發(fā)酵周期延長 ? 種齡過于年老:導致生產能力衰退 ? 接種量 :移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。 ? 接種量的選擇:根據菌種的區(qū)別各有不同,高可達發(fā)酵罐的 25%。 ? 通常接種量,細菌 1~5%,酵母菌 5~10%,霉菌 7~15%,有時 20~25% ? 接種量的大小決定于生產菌種在發(fā)酵罐中生長繁殖的速度,采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌絲繁殖達到高峰的時間,使產物的形成提前到來,節(jié)約動力消耗,減少染菌機會。但接種量過大或者過小,均會影響發(fā)酵。過大會引起溶氧不足,影響產物合成;而且會過多移入代謝廢物,也不經濟;過小會延長培養(yǎng)時間,降低發(fā)酵罐的生產率。 雙種 :兩個種子罐接種到一個發(fā)酵罐中。 倒種 :部分種子來源于發(fā)酵罐。 種子質量的判定 ? 通常測定的參數包括 ? pH ? 培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的含量 ? 菌絲形態(tài)、色澤、濃度 ? 酶活,溶解氧,尾氣等 ? 種子質量標準 ? 1,細胞或菌體 ? 菌絲形態(tài)、菌絲濃度和培養(yǎng)液外觀(色素、顆粒等) ? 單細胞:菌體健壯、菌形一致、均勻整齊,有的還要求有一定的排 列方式; ? 霉菌、放線菌:菌絲粗壯、對某些染料著色力強、生長旺盛、菌絲分枝情況和內含物情況好。 ? 2,生化指標 種子液的糖、氮、磷的含量和 pH變化 。 ? 3, 酶活力 種子液中某種酶的活力,與目的產物的產量有一定的關聯。 影響種子質量的因素 ? 培養(yǎng)基原材料質量 生產過程中經常出現種子質量不穩(wěn)定的現象,其主要原因是原材料質量波動。例如在四環(huán)素、土霉素生產中,配制產孢子斜面培養(yǎng)基用的麩皮,因小麥產地、品種、加工方法及用量的不同對孢子質量的影響也不同。蛋白胨加工原料不同如魚胨或骨胨對孢子影響也不同 。 ? 培養(yǎng)條件 如溫度、 PH值、濕度、培養(yǎng)時間和冷藏時間等都影響種子質量。 種子質量的
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