生化工程6-種子擴大-文庫吧
2025-04-07 12:04 本頁面
【正文】 ? 指制備種子需逐級擴大培養(yǎng)的次數(shù)，需要根據(jù)菌種的生長繁殖速率，發(fā)酵罐的容積綜合確定。 ? 一級種子二級發(fā)酵：谷氨酸棒桿菌 ? 二級種子三級發(fā)酵：青霉菌 ? 三級種子四級發(fā)酵：灰色鏈霉菌 ? 種子罐級數(shù) 取決于： ? （ 1）菌種生長特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度； ? （ 2）所采用發(fā)酵罐的容積。 ? 細菌 ：生長快，種子用量比例少，級數(shù)也較少，二級發(fā)酵。 ? 霉菌 ：生長較慢，如青霉菌，三級發(fā)酵 ? 放線菌 ：生長更慢，采用四級發(fā)酵 ? 酵母 ：比細菌慢，比霉菌，放線菌快，通常用一級種子 種子罐的級數(shù)越少 ， 越有利于簡化工藝和控制 ， 并可減少由于多次移種而帶來染菌的機會 。 也須 考慮盡量延長發(fā)酵罐生產(chǎn)產(chǎn)物的時間 ， 縮短由于種子發(fā)芽 、 生長而占用的非生產(chǎn)時間 ， 以提高發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。 接種齡與接種量 ? 接種齡 ：種子的培養(yǎng)時間。 ? 種齡過于年輕：前期生長緩慢，發(fā)酵周期延長 ? 種齡過于年老：導致生產(chǎn)能力衰退 ? 接種量 ：移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。 ? 接種量的選擇：根據(jù)菌種的區(qū)別各有不同，高可達發(fā)酵罐的 25%。 ? 通常接種量，細菌 1~5%，酵母菌 5~10%，霉菌 7~15%，有時 20~25% ? 接種量的大小決定于生產(chǎn)菌種在發(fā)酵罐中生長繁殖的速度，采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌絲繁殖達到高峰的時間，使產(chǎn)物的形成提前到來，節(jié)約動力消耗，減少染菌機會。但接種量過大或者過小，均會影響發(fā)酵。過大會引起溶氧不足，影響產(chǎn)物合成；而且會過多移入代謝廢物，也不經(jīng)濟；過小會延長培養(yǎng)時間，降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。 雙種 ：兩個種子罐接種到一個發(fā)酵罐中。 倒種 ：部分種子來源于發(fā)酵罐。 種子質(zhì)量的判定 ? 通常測定的參數(shù)包括 ? pH ? 培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的含量 ? 菌絲形態(tài)、色澤、濃度 ? 酶活，溶解氧，尾氣等 ? 種子質(zhì)量標準 ? 1，細胞或菌體 ? 菌絲形態(tài)、菌絲濃度和培養(yǎng)液外觀（色素、顆粒等） ? 單細胞：菌體健壯、菌形一致、均勻整齊，有的還要求有一定的排 列方式； ? 霉菌、放線菌：菌絲粗壯、對某些染料著色力強、生長旺盛、菌絲分枝情況和內(nèi)含物情況好。 ? 2，生化指標 種子液的糖、氮、磷的含量和 pH變化 。 ? 3， 酶活力 種子液中某種酶的活力，與目的產(chǎn)物的產(chǎn)量有一定的關(guān)聯(lián)。 影響種子質(zhì)量的因素 ? 培養(yǎng)基原材料質(zhì)量 生產(chǎn)過程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象，其主要原因是原材料質(zhì)量波動。例如在四環(huán)素、土霉素生產(chǎn)中，配制產(chǎn)孢子斜面培養(yǎng)基用的麩皮，因小麥產(chǎn)地、品種、加工方法及用量的不同對孢子質(zhì)量的影響也不同。蛋白胨加工原料不同如魚胨或骨胨對孢子影響也不同 。 ? 培養(yǎng)條件 如溫度、 PH值、濕度、培養(yǎng)時間和冷藏時間等都影響種子質(zhì)量。 種子質(zhì)量的
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