劉冬版_第5章_種子的擴(kuò)大培養(yǎng)-文庫(kù)吧
2025-01-03 17:31 本頁(yè)面
【正文】 ?生產(chǎn)車間種子制備階段 一、 實(shí)驗(yàn)室種子制備 保藏在沙土管、冷凍干燥管或斜面上的菌種經(jīng)無(wú)菌操作接入適合于孢子發(fā)芽或者營(yíng)養(yǎng)體生長(zhǎng)的斜面培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)成熟后挑選正常的孢子或營(yíng)養(yǎng)菌體再一次接入試管斜面反復(fù)培養(yǎng)幾代。 這一階段也稱為活化，目的是 使保藏的菌種達(dá)到正常穩(wěn)定的生長(zhǎng)代謝速度。 斜面活化的菌種進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)，根據(jù)菌種特性的不同可采用不同的培養(yǎng)方法。 可采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)孢子 ， 直接作為種子罐的種子 。 舉例 :產(chǎn)黃青霉菌 ， 采用大米或小米為固體培養(yǎng)基 ， 裝入搖瓶 、 滅菌 ， 要注意控制米粒含水量 ， 使米粒不粘不散 。 接入孢子 ， 2528℃ 培養(yǎng) 14d。 培養(yǎng)結(jié)束 ， 將孢子瓶于真空下抽去水分 ， 使含水量 10％ 以下 ， 冰箱保存?zhèn)溆?。 產(chǎn)孢子能力強(qiáng)的及孢子發(fā)芽、生長(zhǎng)繁殖快的菌種 生產(chǎn)上一般采用斜面營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞保藏法 。 通過(guò)實(shí)驗(yàn)室種子擴(kuò)培獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的菌體 。 斜面菌種于 32℃ ， 培養(yǎng) 1824h， 即可移入250mL搖瓶液體培養(yǎng)基 ， 32℃ 培養(yǎng) 12h， 即可作種子罐種子 。 例如 ：谷氨酸棒狀桿菌 。 不產(chǎn)孢子的菌種 一般保存在 麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 或 MYPG培養(yǎng)基 的斜面上 ， 4℃ 冰箱保存 .每年移種 34次 。 斜面菌種 → 接入含 10mL麥芽汁 試管 → 2527℃ 培養(yǎng) 23d→ 擴(kuò)大至 三角瓶 → 25℃ 培養(yǎng) 2d→ 移至含 510L麥芽汁的罐 → 1520℃ 培養(yǎng) 35d→ 含 100L麥芽汁的發(fā)酵罐 。 生產(chǎn)啤酒的酵母菌 MYPG培養(yǎng)基： 3g麥芽浸出物， 3g酵母浸出物， 5g蛋白胨 , 10g葡萄糖 ,20g瓊脂 ,1L水。 除蛋白質(zhì)、鹽類、維生素外能溶于水的浸出物質(zhì)，包括含氮浸出物和無(wú)氮浸出物。 二、生產(chǎn)車間種子制備 采用易被菌利用的成分 ， 如葡萄糖 、 玉米槳 、 磷酸鹽等 ， 同時(shí)還需供給足夠的無(wú)菌空氣
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