微生物工程第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)-文庫(kù)吧
2024-12-29 23:42 本頁(yè)面
【正文】 Journal of biotechnology 94(2022), 6572 培養(yǎng)基中含 % of ZPAOx 每隔 23天移去一半培養(yǎng)物，補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基 不斷分析樣品， 23個(gè)月后 ZPAOx降低后，稀釋分離條菌落 目的微生物富集方法的研究進(jìn)展 ? 分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)手段 ， 在微生物鑒別及特定目標(biāo)產(chǎn)物 的篩選方面發(fā)揮了著越來(lái)越重要的作用 。 如 :16SRNA同 源性分析 ， 基因序列分析及 DNA/DNA雜交技術(shù)等 ? 目前土壤中能夠培養(yǎng)的微生物不到總數(shù)的 1%。 微生物的 多樣性及資源的開發(fā) 仍然是今后若干年的研究重點(diǎn) 。 2022,陳文新（科學(xué)院院士） ? In contrast to this traditional approach, modern molecular biology techniques allow for DNA library expression screening, which also enables access to enzymes of `nonculturable39。 anisms. By this strategy, for instance, the pany Diversa (San Diego, CA, USA) identised 120 unique esterases/lipases from only 16% of the total DNA obtained from an alkaline soil sample. FEMS Microbiology Reviews 26 (2022) 73～ 81 六 、 菌株選育與分子改造 目的 ? 提高生產(chǎn)能力 ? 提高產(chǎn)品質(zhì)量 ? 開發(fā)新產(chǎn)品 ? 解決生產(chǎn)實(shí)際問題 ? 防止菌種退化 方法 基因突變： 自然選育、誘變育種 基因重組： 雜交、原生質(zhì)體融合、基因工程 基因的直接進(jìn)化： 點(diǎn)突變、易錯(cuò) PCR、同序法 DNA Shuffling等 自然狀態(tài)下 ， 堿基對(duì)發(fā)生自然突變的機(jī)率為 108～ 109 自然突變有兩種情況： 一種是我們生產(chǎn)上所不希望看到的 ， 表現(xiàn)為菌株的衰退和生產(chǎn)質(zhì)量的下降 ， 這種突變成為負(fù)突變 。 另一種是我們生產(chǎn)上希望看到的 ， 對(duì)生產(chǎn)有利 ， 這種突變成為正突變 。 自然選育 自然選育在工業(yè)生產(chǎn)上的意義 自然選育雖然突變率很低 ， 但卻是工廠保證穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要措施 。 回復(fù)突變 ： 高產(chǎn)菌株在傳代的過程中 ， 由于自然突變導(dǎo)致高產(chǎn)性狀的丟失 ， 生產(chǎn)性能下降 ， 這種情況我們稱為回復(fù)突變 問題： 高產(chǎn)菌株是正突變高，還是負(fù)突變高？ 自然選育操作步驟： 一般習(xí)慣上將自然選育稱為菌種的分離純化 。 單細(xì)胞 (孢子 )懸液的制備 平板分離 挑選單菌落 (注意形態(tài)的觀察 ) 發(fā)酵試驗(yàn) 誘變育種 用各種物理 、 化學(xué)的因素人工誘發(fā)基因突變進(jìn)行的篩選 ，稱為誘變育種 誘變劑：能夠提高生物體突變頻率的物質(zhì)稱為誘變劑 誘變劑 物理在：紫外 ， 快中子 化學(xué)：硫酸二乙酯 ， 亞硝基胍 { （ 2） 、 誘變劑處理過程中幾個(gè)有關(guān)的問題 化學(xué)誘變劑使用過程的安全性 誘變劑量的選擇 誘變劑的選擇 出發(fā)菌株的選擇 （ 1） 、 誘變劑的作用原理 （ 略 ） 壓硝酸： 亞硝基胍： 1MNaOH （ 3） 、 誘變育種的一般步驟 (p83) （ 4） 、 篩選的方法 ? 隨機(jī)篩選 ? 形態(tài) ? 理性化篩選 從產(chǎn)物形成的生理生化途徑著手 ， 進(jìn)行有的放矢的篩選 。 如結(jié)構(gòu)類似物抗性 、 營(yíng)養(yǎng)缺陷型等 ， 篩選而產(chǎn)生的這些特性 ， 稱為遺傳標(biāo)記 。 結(jié)構(gòu)類似物 ：在化學(xué)和空間結(jié)構(gòu)上和代謝的中間物 （ 終產(chǎn)物 ）相似 ， 因而在代謝調(diào)節(jié)方面可以代替代謝中間物 （ 終產(chǎn)物 ）的功能 ， 但細(xì)胞不能以其作為自身的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 。 HD:高絲氨酸脫氫酶 黃色短桿菌中賴氨酸 的合成調(diào)節(jié)機(jī)制 HT:高絲氨酸轉(zhuǎn)乙酰酶 AK:天冬氨酸激酶 結(jié)構(gòu)類似物抗性 ： Lys的類似物 AEC,Thr的類似物 AHV 營(yíng)養(yǎng)缺陷型 ：如 Thr缺陷型 黃色短桿菌 F950的誘變譜系 Bervibacterium flavum As (leu)
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