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正文內(nèi)容

一章:微生物類群與形態(tài)結(jié)構(gòu)-文庫吧

2025-03-20 23:06 本頁面


【正文】 ;如果脫色不足,會將G誤認(rèn)為G+。1)革蘭氏陽性菌 Gram positive以金黃色葡萄球菌為例,Staphylococcus aureus(i)細(xì)胞壁構(gòu)成:一連續(xù)層,厚2080nm兩部分: 網(wǎng)狀骨架:微纖絲組成基質(zhì):骨架埋于基質(zhì)中(ii) 化學(xué)組成:主要是肽聚糖(網(wǎng)狀骨架)和磷壁酸(基質(zhì))i)肽聚糖 peptidoglycan (粘肽、胞壁質(zhì))是真細(xì)菌細(xì)胞壁中的特有成分,也是原核微生物特有成分(古生菌沒有)。是呈多層網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的大分子復(fù)合體, 由許多亞單位(肽聚糖單體)交聯(lián)而成。亞單位a. 雙糖單位:N乙酰胞壁酸(NAM)和N乙酰葡萄糖胺(NAG)通過β1,4糖苷鍵相連而成。M和G交替連接,從而形成了肽聚糖層的骨架?!厶莃. 短肽:連接在胞壁酸分子上的、由四個氨基酸以L、D交替連接起來:LAlaDGluLLysDAla。含D谷氨酸、D和L丙氨酸和二氨基庚二酸或賴氨酸。(含D型氨基酸是原核生物的特征)c. 肽橋:短肽之間連接。 肽短肽全部或部分連至NAM上,短肽之間也有連接,組成一網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。生理功能:是真細(xì)菌細(xì)胞壁中的特有成分,它構(gòu)成了壁的堅(jiān)硬度,決定細(xì)胞的形態(tài),并防止?jié)B透壓引起的裂解。ii) 磷壁酸 teichoic acid (垣酸)G+特有成分。多元醇與磷酸復(fù)合物,通過磷酸二酯鍵與NAM相連。其中,與肽聚糖分子進(jìn)行共價(jià)結(jié)合的,稱壁磷壁酸,其含量會隨培養(yǎng)基成分而改變;另一類是跨越肽聚糖層并與細(xì)胞膜相交聯(lián)的,稱為膜磷壁酸或脂磷壁酸。根據(jù)多元醇不同,有甘油型(以磷酸甘油為重復(fù)單位)、核糖醇型(以磷酸核糖醇為重復(fù)單位)等5種類型。生理功能:a. 通過分子上的大量負(fù)電荷濃縮細(xì)胞周圍的Mg2+,以提高細(xì)胞膜上一些合成酶的活力;b. 貯藏元素;c. 調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)自溶素的活力,借以防止細(xì)胞因自溶而死亡; d. 作為噬菌體的特異性吸附受體;e. 賦予G+細(xì)菌特異的表面抗原,因而可用于菌種鑒定; f. 增強(qiáng)某些致病菌(如A族鏈球菌)對宿主細(xì)胞的粘連,避免被白細(xì)胞吞噬,并有抗補(bǔ)體的作用。 2) 革蘭氏陰性菌 Gram negative  以大腸桿菌為例:(i)細(xì)胞壁構(gòu)成:G—細(xì)菌細(xì)胞壁比G+細(xì)菌細(xì)胞壁?。?5~20nm),層數(shù)較多而結(jié)構(gòu)較復(fù)雜。i)內(nèi)壁層:(肽矩躺層)厚23 nm,單(雙)分子層,由肽聚糖構(gòu)成?!   ? 與G+區(qū)別:交聯(lián)低; DAP取代 LLys(肽尾的第三位氨基酸);無特殊肽橋(是兩個短肽在4位氨基酸之間直接連接,因而機(jī)械強(qiáng)度較低。)。ii)外壁層(外膜):內(nèi)層:脂蛋白層,以脂類部分與肽聚糖相連。中層:磷脂層。外層:脂多糖層,外壁重要成分,810 nm。G—細(xì)菌細(xì)胞壁外膜同細(xì)胞質(zhì)膜相同之處也是雙層類脂,但除磷脂外還含有多糖和蛋白質(zhì)。 外膜中含有幾種蛋白,如脂蛋白、通透蛋白。有些蛋白具有通孔作用(porin),調(diào)控外界分子進(jìn)入細(xì)胞;有的蛋白分子可以作為噬菌體的受體。 iii)周質(zhì)空間:G—細(xì)菌細(xì)胞壁的外膜與細(xì)胞質(zhì)膜之間存在明顯的壁膜間隙,一層薄的肽聚糖處于其間,肽聚糖層和細(xì)胞質(zhì)膜之間的間隙較寬,肽聚糖層至外膜之間的間隙較窄。大腸桿菌的壁膜間隙寬度為12~15nm,呈膠胨態(tài)。其間含有三類蛋白質(zhì):水解酶,催化食物的初步降解;結(jié)合蛋白,啟動物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過程;化學(xué)受體(chemoreceptors),在趨化性中起作用的蛋白?!?ii) 脂多糖 lipopolysaccharide LPS,G特有成分。i)結(jié)構(gòu):類脂A + 核心多糖 + O側(cè)鏈LPS的多糖部分包括核心多糖和O特異多糖。O特異多糖由重復(fù)分支的碳水化合物分子組成,含有已糖(葡萄糖、半乳糖和鼠李糖)和二脫氧已糖。由于糖的種類不同,使各種G—細(xì)胞具有不同特性的LPS。核心多糖(corepolysaccharide)的主要組分是酮脫氧辛酸(ketodeoxyoctonate,KDO)。ii) 功能:a. 內(nèi)毒素物質(zhì)基礎(chǔ); b. 吸附鎂、鈣離子以提高它們在細(xì)胞表面的濃度; c. 決定G表面抗原多樣性; d. 噬菌體受體位點(diǎn)。(iii)G+與G比較(iv)革蘭氏染色機(jī)制通過結(jié)晶紫液初染和碘液媒染后,在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+細(xì)菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密,故遇脫色劑乙醇(或丙酮)處理時(shí),因失水而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,放乙醇的處理不會溶出縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色;反之,G細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和文聯(lián)度差,遇脫色劑乙醇后,以類脂為主的外膜迅速溶解,這時(shí)薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,因此細(xì)胞退成無色 這時(shí),再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,就使G細(xì)菌呈現(xiàn)紅色,而G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色(實(shí)為紫加紅色)了。3)古生菌:是與真細(xì)菌和真核生物相互獨(dú)立的生物類群,主要包括一些獨(dú)特生態(tài)類型的原核生物,其細(xì)胞壁功能與真細(xì)菌相似,但化學(xué)成分差別很大,它不含真正的肽聚糖,而含假肽聚糖、糖蛋白或蛋白質(zhì)。4) 缺壁細(xì)菌:缺壁細(xì)菌指細(xì)胞壁缺乏或缺損的細(xì)菌。細(xì)胞膜 cell membrane(1) 形態(tài)特征:在細(xì)胞壁與細(xì)胞質(zhì)之間的一層柔軟而富有彈性的半透性膜,厚78nm。在電鏡下觀察到的細(xì)胞膜,是在內(nèi)外兩暗色層之間夾著一淺色中間層的一種雙層膜結(jié)構(gòu)。(2) 化學(xué)組成:蛋白和磷脂,蛋白含量高達(dá)75%,種類也多。膜不含甾醇類。1) 磷脂:膜是由兩層磷脂分子整齊地對稱排列而成的 其中每一個磷脂分子由一個帶正電菏且能溶于水的極性頭(磷酸端)和一個不帶電荷、不溶于水的非極性端(烴端)所構(gòu)成。兩個極性頭分別朝向內(nèi)外兩表面,呈親水性,而兩個非極性端的疏水尾則埋入膜的內(nèi)層,于是形成了一個磷脂雙分子層。2) 蛋白:i.整合蛋白(或內(nèi)嵌蛋白):嵌埋在呈液態(tài)的磷脂雙分子層中,具運(yùn)輸功能。ii.周邊蛋白(或膜外蛋白):“漂浮”在磷脂雙分子層的外表面,具有酶促作用。(它們都可在磷脂表層或內(nèi)層作側(cè)向運(yùn)動,以執(zhí)行其相應(yīng)的生理功能。)(3) 膜結(jié)構(gòu)——液態(tài)鑲嵌模型① 膜的主體是脂質(zhì)雙分子層;② 脂質(zhì)雙分子層具有流動性;③ 整合蛋白因其表面呈疏水性,故可“溶”于脂質(zhì)雙分子層的疏水性內(nèi)層中;④ 周邊蛋白表面含有親水基團(tuán),故可通過靜電引力與脂質(zhì)雙分子層表面的極性頭相連;⑤ 脂質(zhì)分子間或脂質(zhì)與蛋白質(zhì)分子間無共價(jià)結(jié)合;⑥ 脂質(zhì)雙分子層猶如“海洋”,周邊蛋白可在其上作“漂浮”運(yùn)動,而整合蛋白則似“冰山”沉浸在其中作橫向移動。(4) 功能:1) 高度選擇透性膜,控制物質(zhì)運(yùn)輸; 2) 滲透屏障,維持正常滲透壓;3) 重要代謝活動中心; 4) 與壁、莢膜合成有關(guān); 5) 鞭毛著生點(diǎn),供運(yùn)動能量。(5) 觀察方法 通過質(zhì)壁分離、選擇性染色、電鏡等可觀察到細(xì)胞膜。間體 mesosome(中質(zhì)體)細(xì)胞膜內(nèi)陷形成。功能:1)擬線粒體,呼吸酶系發(fā)達(dá)?!   ?2)與壁合成,核分裂,芽孢形成有關(guān)。核區(qū) nuclear body 核質(zhì)體,原核無明顯核,一反差弱的核區(qū)。(1) 特點(diǎn):無核膜、核仁、固定形態(tài),結(jié)構(gòu)簡單,細(xì)胞分裂前核分裂。一般為單倍體。(2) 成分: DNA:環(huán)狀雙鏈,超線圈結(jié)構(gòu),負(fù)電荷被鎂離子、有機(jī)堿(精胺、腐胺)所中和。(3) 形態(tài)特征:呈球狀、棒狀或啞鈴狀,在電鏡下呈透明區(qū)域。(4) 功能:是負(fù)載遺傳信息的物質(zhì)基礎(chǔ)。(5) 觀察方法: 在普通光學(xué)顯微鏡下,通過一般堿性染料染色不能見到,因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)高濃度的RNA,只有用1NHCl或核糖核酸酶預(yù)處理去除了RNA,
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