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蛋白質(zhì)工程ppt課件(完整版)

2025-10-17 20:21上一頁面

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【正文】 ?定點突變 ?定向進化。 ? 蛋白質(zhì)工程將蛋白質(zhì)與酶的研究推進到嶄新的時代,為蛋白質(zhì)和酶在工業(yè)、農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥方面的應(yīng)用開拓了誘人的前景。 ?這是一個年輕的學(xué)科,目前,蛋白質(zhì)工程尚未有統(tǒng)一的定義。 ? 佩里( Perry) 1984年溶菌酶分子改造使酶熱穩(wěn)定性提高。使用計算機的方法設(shè)計蛋白質(zhì)是最具挑戰(zhàn)性的工作。 ? CAPD研究的內(nèi)容也就是應(yīng)用軟件的開發(fā),包括數(shù)據(jù)分析處理算法的研究,蛋白質(zhì)設(shè)計模擬模型的建立以及計算機程序編寫和軟件可用性的研究 Protein design ? Protein design is the design of new protein molecules from scratch, or the deliberate design of a new molecule by making calculated variations on a known structure. ? Protein design requires an understanding of the process by which proteins fold. by use of puter models, ? Protein design is also referred to as inverse folding. Hence, designing a new protein involves the identification of the sequences which have the chosen structure as free energy minimum. 蛋白質(zhì)創(chuàng)造和改造 ? 蛋白質(zhì)的改造,從物理、化學(xué)法到基因重組。上一輪的結(jié)果供下輪創(chuàng)建一個新庫。 ? 1994年, Stemmer將 DNA重組方法引用到酶分子的定向進化中。 ? 此法突變具有一定的密碼偏向性。 高通量篩選技術(shù) ? 突變微生物分離 ? 瓊脂板涂布法在特殊條件下培養(yǎng)突變菌通過宿主菌的生長情況、培養(yǎng)基顏色、特定反應(yīng)的出現(xiàn)等判斷是否具有目的基因。 。 ? 流式細(xì)胞計數(shù)法 :細(xì)胞經(jīng)熒光染色后,通過 高速流動系統(tǒng),排成單行,逐個通過流式細(xì) 胞計數(shù)儀進行測定。 DNA改組技術(shù) (DNA shuffling) ? 又稱有性 PCR,指 DNA分子的體外重組,是基因在分子水平上進行有性重組。 定向進化的歷史 酶定向進化的過程 ? 酶定向進化通常分 3步進行: ? 通過隨機突變和 (或 )基因體外重組創(chuàng)造基因多樣性; ? 導(dǎo)入適當(dāng)載體后構(gòu)建突變文庫; ? 通過靈敏的篩選方法,選擇陽性突變子。 定向進化 與自然進
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