蛋白質(zhì)工程ppt課件(完整版)
【正文】 ?定點(diǎn)突變 ?定向進(jìn)化。 ? 蛋白質(zhì)工程將蛋白質(zhì)與酶的研究推進(jìn)到嶄新的時(shí)代，為蛋白質(zhì)和酶在工業(yè)、農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥方面的應(yīng)用開(kāi)拓了誘人的前景。 ?這是一個(gè)年輕的學(xué)科，目前，蛋白質(zhì)工程尚未有統(tǒng)一的定義。 ? 佩里（ Perry） 1984年溶菌酶分子改造使酶熱穩(wěn)定性提高。使用計(jì)算機(jī)的方法設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)是最具挑戰(zhàn)性的工作。 ? ＣＡＰＤ研究的內(nèi)容也就是應(yīng)用軟件的開(kāi)發(fā)，包括數(shù)據(jù)分析處理算法的研究，蛋白質(zhì)設(shè)計(jì)模擬模型的建立以及計(jì)算機(jī)程序編寫(xiě)和軟件可用性的研究 Protein design ? Protein design is the design of new protein molecules from scratch, or the deliberate design of a new molecule by making calculated variations on a known structure. ? Protein design requires an understanding of the process by which proteins fold. by use of puter models, ? Protein design is also referred to as inverse folding. Hence, designing a new protein involves the identification of the sequences which have the chosen structure as free energy minimum. 蛋白質(zhì)創(chuàng)造和改造 ? 蛋白質(zhì)的改造，從物理、化學(xué)法到基因重組。上一輪的結(jié)果供下輪創(chuàng)建一個(gè)新庫(kù)。 ? 1994年， Stemmer將 DNA重組方法引用到酶分子的定向進(jìn)化中。 ? 此法突變具有一定的密碼偏向性。 高通量篩選技術(shù) ? 突變微生物分離 ? 瓊脂板涂布法在特殊條件下培養(yǎng)突變菌通過(guò)宿主菌的生長(zhǎng)情況、培養(yǎng)基顏色、特定反應(yīng)的出現(xiàn)等判斷是否具有目的基因。 。 ? 流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法 :細(xì)胞經(jīng)熒光染色后，通過(guò) 高速流動(dòng)系統(tǒng)，排成單行，逐個(gè)通過(guò)流式細(xì) 胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行測(cè)定。 DNA改組技術(shù) (DNA shuffling) ? 又稱(chēng)有性 PCR，指 DNA分子的體外重組，是基因在分子水平上進(jìn)行有性重組。 定向進(jìn)化的歷史 酶定向進(jìn)化的過(guò)程 ? 酶定向進(jìn)化通常分 3步進(jìn)行： ? 通過(guò)隨機(jī)突變和 (或 )基因體外重組創(chuàng)造基因多樣性； ? 導(dǎo)入適當(dāng)載體后構(gòu)建突變文庫(kù)； ? 通過(guò)靈敏的篩選方法，選擇陽(yáng)性突變子。 定向進(jìn)化 與自然進(jìn)
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