【正文】 可造成靶基因（異?；颍┑氖Щ睿ɑ虺聊！?3基因工程多肽疫苗：使微生物對人體具保護作用的抗原基因經(jīng)體外重組表達后所制備的生物活性多肽類疫苗稱基因工程多肽或亞單位疫苗。如賴氨酸的密碼子AAG突變?yōu)榻K止密碼子TAG,使肽鏈合成過早終止, 因而蛋白質(zhì)產(chǎn)物一般沒有活性。32tk基因：胸苷激酶基因？胸腺嘧啶核苷激酶簡稱胸苷激酶（thymidine Kinase,TK）在所有真核細胞中都有表達, 是嘧啶生物合成補救代謝途徑中的一個關(guān)鍵酶, 它可催化胸苷磷酸化轉(zhuǎn)變成為dTMP, 繼續(xù)磷酸化生成dTTP, 參與DNA的生物合成。RNA聚合酶通過與一系列組分構(gòu)成動態(tài)復(fù)合體，并以DNA序列為遺傳信息模板，催化合成序列互補的RNA，包括轉(zhuǎn)錄起始、延伸、終止等過程。21PCR：聚合酶鏈反應(yīng)，以DNA變性復(fù)制的某些特性為原理，以目的DNA片段為模板, 利用酶促反應(yīng)（Taq酶），在特定引物的引導(dǎo)下，將加入的4種dNTP由引物沿模板從5’→3’按堿基配對原則, 形成與模板DNA互補的半保留復(fù)制鏈, 新合成的鏈又可作為下一輪循環(huán)的模板。當啟動子與全酶結(jié)合后可在+1轉(zhuǎn)錄起始點開始轉(zhuǎn)錄。8Cos位點（Cohesiveend site）： λDNA為線狀雙鏈分子，兩端各有幾個堿基的單鏈互補粘性末端，通過粘性末端的互補作用形成雙鏈環(huán)形DNA。4假基因：在珠蛋白基因簇（gene cluster）各片斷核苷酸序列分析時發(fā)現(xiàn)，除了有正常的功能基因之外，還有功能失活的特殊序列片斷，它不能行使表達功能。該類無表達功能的畸變核苷酸基因序列片斷，稱為假基5同尾酶：有一些限制性核酸內(nèi)切酶識別的堿基順序不完全恒定，即識別順序不同，但酶切后產(chǎn)生同樣黏性末端的兩種酶稱為同尾酶，如BamHⅠ和Bgl Ⅱ。這種由粘末端結(jié)合形成的雙鏈區(qū)段即Cos位點。16 終止子：位于一個基因編碼區(qū)下游提供終止信號的DNA序列，可以被RNA聚合酶識別并發(fā)出停止mRNA合成的信號。經(jīng)2530個循環(huán)產(chǎn)物呈 2n指數(shù)擴增，由pg—μg（紫外可見），可獲得基因片段。 26翻譯(translation): 在多種因子輔助下，細胞內(nèi)以mRNA模板，通過tRNA識別該mRNA的三聯(lián)體密碼子和轉(zhuǎn)移相應(yīng)氨基酸，進而按照模板mRNA信息依次連續(xù)合成蛋白質(zhì)肽鏈的過程。33亮氨酸拉鏈：存在與蛋白C末端，—螺旋形成的對稱二聚體，約為30個氨基酸，每兩個亮氨酸之間隔有六個氨基酸，于是每兩圈螺旋就有一個亮氨酸，排成一排，從而在2個α螺旋的蛋白分子之間形成一條拉鏈。若是發(fā)生在基因DNA的3’末端處, 它所表達產(chǎn)生的多肽常有一定活性或有部分活性, 這種突變又稱為滲漏變型（leaky mutation）。其表達系統(tǒng)可以是酵母，也可以是哺乳動物細胞，若無需糖基化的多肽疫苗甚至可在大腸桿菌等原核細胞中表達。48轉(zhuǎn)基因動物：就是把外源性目的基因?qū)雱游锏氖芫鸦蚱淠遗呒毎?，后改用注入受精卵的任何一個前核，并在細胞基因組中穩(wěn)定整合，再將合格的重組受精卵或囊胚細胞篩選出來，采用借腹懷孕法寄養(yǎng)在雌性動物（foster mother）的子宮內(nèi), 使之發(fā)育成具表達目的基因的胚胎動物, 并能傳給下一代。50基因敲除：是向正常生物個體內(nèi)引入某個突變基因位點而選擇性地使某特定基因功能失活的技術(shù)，可培養(yǎng)出靶向性剔除某基因的小鼠，而導(dǎo)致行為特性改變。1 什么叫做基因？何謂基因的新概念？基因的主要功能是什么?答：基因就是指編碼有功能蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA分子所必須的全部核酸序列。答：DNA是一反向平行的互補雙鏈結(jié)構(gòu)，DNA是右手螺旋結(jié)構(gòu)。 ⑶DNA片斷與載體的連接包裝 常用載體：粘性質(zhì)粒 λ噬菌體 酵母人工染色體①基因組DNA +粘性質(zhì)?！亟MDNA——轉(zhuǎn)化細菌——菌落 ②基因組DNA +λ噬菌體——重組DNA—包裝成噬菌體——感染細菌——噬菌斑1個克隆含有基因組的某個片段，整個克隆群體就包含基因組的全部基因片段總和。PCR過程中，雙脫氧核糖核酸可能隨機的被加入到正在合成中的DNA片段里。待PCR產(chǎn)物分離純化后除去原來的引物，將PCR擴增產(chǎn)物作為大引物，并與引物1一起再對靶基因進行第二輪擴增，其PCR產(chǎn)物即為突變的DNA。（3）PCR篩選法：利用能與插入基因片段兩端互補的特異引物，以少量抽提的重組子DNA為模板進行PCR分析，能擴增出特異片段的轉(zhuǎn)化子為攜有目的基因的重組子（4）原位雜交：在培養(yǎng)基平板上的菌落或噬菌斑按照其原來的位置原位不變的轉(zhuǎn)移到濾膜上，并在原位溶菌裂解，DNA變性和用特異探針進行雜交，從而鑒定出含有重組子的菌落或噬菌斑。作用特點：一，同一DNA序列可被不同蛋白質(zhì)識別；二：同一蛋白質(zhì)因子可與多種不同DNA序列發(fā)生聯(lián)系，多通過蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)先結(jié)合再影響DNA。表達水平僅為細菌表達量的5％，表達產(chǎn)物更接近天然蛋白構(gòu)型，有正確糖基化結(jié)構(gòu)與數(shù)量，通常分泌于胞外培養(yǎng)液內(nèi)，分離純化較簡易，無需進行復(fù)性加工可獲得高活性生物活性產(chǎn)品。3，特異性的核酸，根據(jù)癌基因設(shè)計出特異的“錘頭”或“發(fā)夾”結(jié)構(gòu)，它能夠催化切割，降解異常表達基因的mRNA而影響基因的翻譯。動物克隆技術(shù)不僅理論上有重大突破，無需有性繁殖即可生產(chǎn)動物，而且可利用克隆羊技術(shù)來克隆人體器官，有醫(yī)學(xué)價值，還可使難以生殖或即將滅種的動物（如熊貓）采用無性繁殖方式來繁殖后代，因此引起全世界關(guān)注。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板PCR，就是如此反復(fù)循環(huán)，使目的DNA得到高效快速擴增。26試述p53對腫瘤的作用及其機理.p53是一種腫瘤抑制基因，p53是一個重要的抗癌基因使癌細胞自殺，防止癌變；還具有幫助細胞基因修復(fù)缺陷的功能。是將外源基因通過體外重組后導(dǎo)入受體細胞內(nèi)，使這個基因能在受體細胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯表達的操作。這樣低濃度的mRNA被擴增放大易于檢測。22 PCR基本原理PCR是在試管中進行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理是依據(jù)細胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙