微生物實驗論文(完整版)
【正文】 質(zhì)纖維素類可再生資源的微生物技術(shù)，將生產(chǎn)生活中產(chǎn) 生的工農(nóng)業(yè)廢棄物轉(zhuǎn)化為可利用的新能源，將具有極其重要的意義和廣闊的前景。另外，土樣的采集要選擇富含纖維素的環(huán)境，這是因為在纖維素含量豐富的環(huán)境，通常會聚集較多的分解纖維素的微生物。在250ml 錐形瓶中裝入 50ml 培養(yǎng)基，放 5— 6顆玻璃珠，用 8 層紗布做成瓶塞，將瓶口塞緊，再在瓶塞外包裹兩層牛皮紙，用線繩扎緊，在 121℃下高壓蒸汽滅菌 20min。 需要滅菌的儀器：無菌培養(yǎng)皿（ 12 個）、涂布器（ 3 個）、移液器、槍頭。經(jīng)此方法染色后，細胞保留初染劑藍紫色的細菌為革蘭氏陽性菌；如果細胞中初染劑被脫色劑洗脫而使細菌染上復(fù)染劑的顏色 (紅色 )，該菌屬于革蘭氏陰性菌。 所需儀器或試劑：菌種 1， 2 的平板培養(yǎng)物、革蘭氏染色液（結(jié)晶紫碘液，番紅染液）、顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶（內(nèi)裝香柏油和二甲苯）、擦鏡紙、蒸餾水等。用記號筆在平板底部劃成 4 部分，將黃色菌、白色菌、粉色菌和 x菌（在剛果紅培養(yǎng)基上出現(xiàn)透明圈的菌）分別在不同的部分劃線接種，在平板的反面分別在 4 部分寫上菌名，將平板倒置在 30℃溫箱中培養(yǎng) 3 天。 結(jié)果 圖 6 甲基紅實驗結(jié)果 表 3 甲基紅實驗結(jié)果 （ “ +”表示陽性 ，“ — ”表示陰性 ） 名稱 結(jié)果 黃色菌（菌 4） — 白色菌（菌 1） — 粉色菌（菌 2） + 水解圈菌（菌 3） + 結(jié)果分析： 見圖 6，表 3 滴入甲基紅試劑后，培養(yǎng)黃色菌和白色菌的培養(yǎng)液變?yōu)辄S色，而培養(yǎng)粉色菌和 x菌的培養(yǎng)液成為紅色，這說明了四種細菌在培養(yǎng)的早期均產(chǎn)生有機酸，但粉色菌和 x 菌在培養(yǎng)后期仍能維持酸性 pH4，而黃色菌和白色菌則轉(zhuǎn)化有機酸為非酸性末端產(chǎn)物，如乙醇、丙酮酸等，使pH 升至大約 6。 見圖 7。 不同菌株對纖維素類物質(zhì)的分解能力不一樣。 參考文獻 、姚曉華、韋秉興、覃培升、屈達才， 2020，稻草秸稈纖維素分解菌的分離篩選，基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)， 28（ 3）：477— 480 ，秦魏， 2020，降解纖維素真菌的分離篩選及其環(huán)境適應(yīng)性初探，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)公報， 24（ 5） . 纖維素酶降解機制及纖維素酶分子結(jié)構(gòu)與功能研究進展 . 自然科學(xué)進展， 2020， 13(1):21 . 纖維素分解菌的分離與特性初探 . 黑 龍 江 八 一 農(nóng) 墾 大 學(xué) 學(xué) 報 , 2020,01:019 。生理生化實驗證明，平板上的黃色菌種和 X 菌種的水解圈都很大，表明它們的產(chǎn)酶能力都較強，并且黃色菌種水解圈更為清晰表明其酶系較為齊全。于是，我們重新做了稀釋，最終選擇稀釋了 105， 106， 107 倍等稀釋倍數(shù)較大的富集液用涂布器涂布在纖維素剛果紅平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)了三天后觀察到較明顯的四種菌落，粉紅色菌落，黃色菌落，白色菌落和產(chǎn)生有水解圈的 X菌。 不同 pH 對菌生長的影響 方法 （ 1） 培養(yǎng)基成分：無機鹽營養(yǎng)液 1000mL（ KH2PO4 2g、 MnSO4 、 ZnCl2 、CoCl2 、（ NH4） 2SO4 、 MgSO47H2O 、 CaCl2 、 FeSO4 5mg、水 1000mL，pH ）于直徑為 、長 15cm 的試管中加入上述無機鹽培養(yǎng)基 5mL，加入一條去淀粉處理的濾紙（ 6cm 1cm）垂直于試管中，用 酸和堿 調(diào)整它們的 pH 值，使之 pH 分別約為 4， 5， 6， 7
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