【正文】
起始點核苷酸的兩側分別為 C 和 T。 NusA protein : ★ 69 Kd, acid protein ★ RNApolattaching factor ★ Impel RNApol. pausing in terminator for 1’15’ and waiting for Rho factor to stop transcription of RNA ★ After initiation → substituting σ → NusA + core E antitermination N protein utilization substance NusA binds to polymerase, and N binds to both NusA and box B of the nut site region of the transcript, creating a loop in the growing RNA. This plex is relatively weak and can cause antitermination only at terminators near the nut site (These conditions exist only in vitro.). (Nut N binding site ) antitermination N protein 三、 原核生物 轉錄 的終止 ? 轉錄的終止依賴于 RNA產(chǎn)物的特定序列; ? 原核和某些真核生物的終止子要求轉錄產(chǎn)物 RNA 3’端具有發(fā)夾的二級結構,莖部富有 GC序列; ? 終止子的分類: 根據(jù)終止反應是否需要 ρ蛋白 不依賴于 ρ因子的終止子(強終止子) ? 結構特點 : RNA具有一個發(fā)夾結構(富含 GC)和隨后 polyU片段。 ? 誘導物 ( inducer) :與調(diào)節(jié)蛋白結合,使其從DNA分子上脫落下來, RNA pol開始轉錄。 ? 啟動子( Promoter, P): RNA pol的結合位點; ? 操縱基因( Operator, O): 進入結構基因的開關; ? 結構基因: Z( β半乳糖苷酶) 、 Y( β半乳糖苷透過酶 ) 、 A( β半乳糖苷乙?;D移酶 ) ; ?β半乳糖苷酶 :水解含 β半乳糖苷鍵的底物,如乳糖。 ? 結構特點: 有相鄰的 2個 Trp密碼子(與其他具有衰減子的操縱子相似) ( 3)轉錄衰減機制 ? 依賴于轉錄和翻譯的緊密偶聯(lián) ? Trp少 →tRNATrp少 →翻譯通過 2個相鄰 Trp密碼子的速度很慢 →當 4區(qū)被轉錄完成時,核糖體才進行到 1區(qū) →前導區(qū)形成 23配對(不能形成 34配對的終止結構) →轉錄繼續(xù)進行; ? Trp多 → tRNATrp多 →核糖體順利通過 2個相鄰的Trp密碼子 → 4區(qū)被轉錄之前,核糖體就達到 2區(qū)→ 34區(qū)配對形成富含 GC的莖環(huán)結構 →轉錄停止→ trp操縱子中的結構基因被關閉,不再合成 Trp 衰減作用的重要性 ? 衰減作用( 10倍)與阻遏作用( 70倍)協(xié)調(diào)作用能大大增強對 Trp操縱子的調(diào)節(jié)作用( 700倍)。 ? 自然界中也存在著不同類型的合成體系,如 His操縱子 ,擁有在功能上與 trp操縱子完全相同的衰減子(能夠形成一個 3個堿基配對的區(qū)域)。 ?β半乳糖苷乙?;D移酶 :乙酰 CoA+β半乳糖苷 →乙酰半乳糖。 (三 ) 正調(diào)控和負調(diào)控 ? 正調(diào)控 :調(diào)節(jié)蛋白與操縱子結合后 促進轉錄的進行。能夠利用水解 ATP釋放的能量使 RNA從三元復合物中釋放出來; ? 結構 :仍然具有莖環(huán)結構,但 GC堿基對含量較少,下游也缺乏 polyU結構。 ? σ因子解離,核心酶與模板的親和性下降到非特異性結合的水平, RNA pol在 DNA鏈上變得容易移動,為鏈的延伸創(chuàng)造了條件; ? 游離的 σ因子可以重新進行功能循環(huán)。 RNA pol. firmly binding site( B site) Initiation site : +1 site。 RNA聚合酶的基本性質(zhì) 亞基 基因 全酶中的數(shù)量 分子量( da l t ) 部位 可能功能 α rpo A 2 40000*2 多樣