原核生物的轉(zhuǎn)錄及調(diào)控-文庫(kù)吧
2024-12-29 14:43 本頁(yè)面
【正文】 為 polycistron ； ? 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)記為 +1，其上游記為 負(fù)值 ，下游記為 正值 。 +1 10 +10 upstream start point downstream 一、轉(zhuǎn)錄的起始 ? 關(guān)鍵：全酶能以 很高的親和性 結(jié)合在 啟動(dòng)子 promoter ； ? 啟動(dòng)子 ： RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄的一段 DNA序列。 promoter 由兩個(gè)重要部分組成 （一）原核啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu) ● 70 ~ 40 ： up element（ 上游元件） CAPcAMP binding site ● 35 ~ 10： core promoter（ 核心啟動(dòng)子） RNA pol. binding site 基因表達(dá)調(diào)控的正控制位點(diǎn) CAP： Catabolite gene Activator Protein cAMP Acceptor Protein （ cAMP受體蛋白 ） （ 分解代謝基因激活蛋白 ） 核心啟動(dòng)子： Sextama Box： （ R site） TTGAC（ Sextama Box） 35 site。 RNA pol. loosely binding site Pribnow Box： TATAAT（ pribnow Box） 10 site。 RNA pol. firmly binding site（ B site） Initiation site ： +1 site。 RNA transcriptional startpoint （ I site） A/G 35 (R) 10 (B) +1 (I) RNA l Sextama Box與 Pribnow Box間距 17bp， 有利于 RNA pol啟動(dòng) l 35 Box or 10 Box mut. 間距 趨近 于 17 bp， up mutation 間距 遠(yuǎn)離 于 17 bp， down mutation 17bp的 間距 比 17bp的 序列 對(duì)轉(zhuǎn)錄更為重要 35 Box and 10 Box mut. → 轉(zhuǎn)錄效率下降 100倍 → 轉(zhuǎn)錄效率下降 1000倍 上游元件： CAPcAMP binding site （ Activator region， AR） 當(dāng)： ARI + CAPcAMP ● AR I： CAPcAMP 的強(qiáng)結(jié)合位點(diǎn)（ 70 ~ 50） ● AR II： CAPcAMP 的弱結(jié)合位點(diǎn)（ 50 ~ 40） cooperative effect 提高 ARII 的結(jié)合效率 IR 70 ARI 40 ARII IR 50 RNA pol AR II + CAPcAMP 復(fù)合體： 促使 35 box附近 GC島區(qū)的雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性降低， 10 box的解鏈溫度降低，有利于轉(zhuǎn)錄啟動(dòng) ARI ARII GC Island 35 10 ● Null AR II → RNA pol. into 10 Box but transcription off ● ARII + CAPcAMP promotion RNA pol. into 35 Box into 10 Box starting transcription RNA pol RNA pol αCTD CAPcAMP ARI ARII ARI ARII Activation transcription Up element + CAPcAMP ＋ RNA Polymerase復(fù)合體 CAPcAMP 與 RNA Polymerase的 αCTD結(jié)合，激活轉(zhuǎn)錄 （二） 原核基因轉(zhuǎn)錄的起始 σ因子的作用： ? 降低 全酶與一般 DNA的 非專一性 結(jié)合力（ 20220倍 ）； ? 增強(qiáng) 全酶與啟動(dòng)子 R site、 B site的 專一性 結(jié)
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