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原核生物的轉錄及調(diào)控-wenkub

2023-01-28 14:43:06 本頁面
 

【正文】 力( 20220倍 ); ? 增強 全酶與啟動子 R site、 B site的 專一性 結合力 ( 100倍 ); ? 導致 RNA鏈的延伸緩慢 Promoter與 σ factor 間的結合專效性 ● 決定了 strong promoter amp。 +1 10 +10 upstream start point downstream 一、轉錄的起始 ? 關鍵:全酶能以 很高的親和性 結合在 啟動子 promoter ; ? 啟動子 : RNA聚合酶識別、結合并起始轉錄的一段 DNA序列。 不同原核生物具有 基本相同的核心酶 ,但 σ亞基有所差別 ,決定了原核生物基因的選擇性表達。 ?下游序列 downstream: 轉錄起點的后面的序列 ,用正數(shù)碼(+)表示。 第一節(jié) 轉錄概述 一、基因的編碼鏈和有意義鏈 ? 模板鏈: 用于轉錄 RNA的鏈稱為模板鏈,或負(-)鏈,又稱無義鏈。原核生物的轉錄 及其調(diào)控 RNA transcription and regulation in prokaryotes ? 轉錄: 在 DNA指導的 RNA聚合酶催化下,以 DNA鏈的一條鏈為模板,按照堿基配對原則合成 RNA鏈的過程 。 ? 編碼鏈 :與模板鏈互補的 DNA鏈稱為編碼鏈,或正(+)鏈,又稱有義鏈。 ?沒有編號為○的堿基。 原核生物 RNA聚合酶抑制劑 : ? 利福平( Rifampin) :與細菌 RNA pol β亞基結合,阻礙轉錄的 起始 作用; ? 利鏈菌素 ( streptolydigin) : 與細菌RNA pol β亞基結合,抑制轉錄的 延伸 。 promoter 由兩個重要部分組成 (一)原核啟動子的結構 ● 70 ~ 40 : up element( 上游元件) CAPcAMP binding site ● 35 ~ 10: core promoter( 核心啟動子) RNA pol. binding site 基因表達調(diào)控的正控制位點 CAP: Catabolite gene Activator Protein cAMP Acceptor Protein ( cAMP受體蛋白 ) ( 分解代謝基因激活蛋白 ) 核心啟動子: Sextama Box: ( R site) TTGAC( Sextama Box) 35 site。 weak promoter; ★ 35 box, 10 box的差異影響啟動子與 RNA pol 中 σ因子的 結合能力 ; ★ 不同啟動子的 35, 10 box間存在較為 保守的標準序列(標準啟動子) ; ★ σ factor is responsible for recognition of consensus sequence of promoter and only required for initiation. RNA pol與啟動子的結合 ? σ因子識別啟動子上結合位點。 ? mRNA的起始位點多為 G, 其次為 A , 很少為 U, 起始點核苷酸的兩側分別為 C 和 T。 Model of the interaction between E. coil RNA polymerase holoenzyme and a promoter DNA Incorporating the first few Nt 二、原核生物轉錄的延伸 ? RNA pol沿著模板鏈移動, RNA鏈不斷延伸,并保持三元復合物的結構; ? 轉錄泡中的 DNA螺旋前開、后合, RNA延長,不斷脫離 DNA; ? RNA鏈的延伸速度不是恒定的,在模板富含GC的區(qū)域,轉錄就會減慢 /停頓。 NusA protein : ★ 69 Kd, acid protein ★ RNApolattaching factor ★ Impel RNApol. pausing in terminator for 1’15’ and waiting for Rho factor t
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