【正文】 for 1’15’ and waiting for Rho factor to stop transcription of RNA ★ After initiation → substituting σ → NusA + core E antitermination N protein utilization substance NusA binds to polymerase, and N binds to both NusA and box B of the nut site region of the transcript, creating a loop in the growing RNA. This plex is relatively weak and can cause antitermination only at terminators near the nut site (These conditions exist only in vitro.). (Nut N binding site ) antitermination N protein 三、 原核生物 轉(zhuǎn)錄 的終止 ? 轉(zhuǎn)錄的終止依賴于 RNA產(chǎn)物的特定序列； ? 原核和某些真核生物的終止子要求轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA 3’端具有發(fā)夾的二級結(jié)構(gòu)，莖部富有 GC序列； ? 終止子的分類： 根據(jù)終止反應(yīng)是否需要 ρ蛋白 不依賴于 ρ因子的終止子（強終止子） ? 結(jié)構(gòu)特點 ： RNA具有一個發(fā)夾結(jié)構(gòu)（富含 GC）和隨后 polyU片段。 promoter 由兩個重要部分組成 （一）原核啟動子的結(jié)構(gòu) ● 70 ~ 40 ： up element（ 上游元件） CAPcAMP binding site ● 35 ~ 10： core promoter（ 核心啟動子） RNA pol. binding site 基因表達調(diào)控的正控制位點 CAP： Catabolite gene Activator Protein cAMP Acceptor Protein （ cAMP受體蛋白 ） （ 分解代謝基因激活蛋白 ） 核心啟動子： Sextama Box： （ R site） TTGAC（ Sextama Box） 35 site。原核生物的轉(zhuǎn)錄 及其調(diào)控 RNA transcription and regulation in prokaryotes ? 轉(zhuǎn)錄： 在 DNA指導(dǎo)的 RNA聚合酶催化下，以 DNA鏈的一條鏈為模板，按照堿基配對原則合成 RNA鏈的過程 。 +1 10 +10 upstream start point downstream 一、轉(zhuǎn)錄的起始 ? 關(guān)鍵：全酶能以 很高的親和性 結(jié)合在 啟動子 promoter ； ? 啟動子 ： RNA聚合酶識別、結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄的一段 DNA序列。 ③ 其他配基： ppNpp、 NusA蛋白。 （ 一） lac操縱子（ lactose operon）： lac操縱子的結(jié)構(gòu) ? 調(diào)節(jié)基因（ I）： 編碼阻遏物（ Repressor）。但 His操縱子沒有阻遏體系，完全受衰減子調(diào)節(jié)。 ? 負調(diào)控 ：調(diào)節(jié)蛋白與操縱子結(jié)合后 抑制轉(zhuǎn)錄的進行。 轉(zhuǎn)錄的起始 ? 核心酶在 σ因子幫助下特異性結(jié)合到 DNA上； ? RNA pol與啟動子 35 box 結(jié)合，形成 封閉型起始復(fù)合物 ； ? 酶滑動到 10 box， 轉(zhuǎn)變成為 開放型起始復(fù)合物 ，啟動子活化，雙鏈解開，模板鏈暴露，插入最初的 2個核苷酸； ? 酶繼續(xù)加上開頭的幾個 NTP， 形成 三元起始復(fù)合物 ，在 RNA鏈合成了 8～ 9個堿基后， σ因子解離，轉(zhuǎn)錄開始。 不同原核生物具有 基本相同的核心酶 ，但 σ亞基有所差別 ，決定了原核生物基因的選擇性表達。 ? 編碼鏈 ：與模板鏈互補的 DNA鏈稱為編碼鏈，或正（＋）鏈，又稱有義鏈。 weak promoter； ★ 35 box, 10 box的差異影響啟動子與 RNA pol 中 σ因子的 結(jié)合能力 ； ★ 不同啟動子的 35