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酶活力及酶ppt課件(完整版)

  

【正文】 D+E2 DE2 ? F ? D:不能檢測(cè)或不容易檢測(cè) ? F:容易檢測(cè) ? 旋光法 ? 量熱法 ? 層析 計(jì)算題 ? 有 1克淀粉酶制劑,用水溶解成 1000毫升,從中取出 1毫升測(cè)定淀粉酶活力,測(cè)得每 5分鐘分解 。 在最適溫度條件下 ,反應(yīng)速度最大。 例 : 堿性磷酸酶催化磷酸苯酯水解時(shí) [s]為 M,最適 pH為 [s]為 M,最適 pH為 pH影響反應(yīng)速度的原因 ( 1 ) pH影響了酶分子、底物分子和 ES復(fù)合物的 解離狀態(tài)。 ? 酶的抑制劑一般具備兩個(gè)方面的特點(diǎn): 渡狀態(tài)相似。 V=V m a x [ S ]K m + [ S ] 根據(jù)中間產(chǎn)物學(xué)說(shuō),酶促反應(yīng)分兩步進(jìn)行 : ? 米氏方程的推導(dǎo): 米氏方程 V=V m a x [ S ]K m + [ S ]?當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一半時(shí) ,即 V = 1/2 Vmax, Km = [S] ?上式表示 ,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時(shí)的底物濃度。 米氏常數(shù)的測(cè)定 基本原則 : 將米氏方程變化成相當(dāng)于 y=ax+b的直線方程 , 再用作圖法求出 Km。抑制劑 可以通過(guò)透析等方法被除去 ,并且能部分或全部恢復(fù)酶的活性。 2. 非竟?fàn)幮砸种? ? 酶可同時(shí)與底物及抑制劑結(jié)合,引起酶分子構(gòu)象變化,并導(dǎo)致酶活性下降。 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用動(dòng)力學(xué) 有無(wú)抑制劑存在時(shí)酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)方程 表觀 雙底物酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué) ? 一)、順序機(jī)制:底物的結(jié)合和產(chǎn)物的釋放按一定順序進(jìn)行。通過(guò)測(cè)定每單位時(shí)間(分鐘)所形成的產(chǎn)物量而獲得催化反應(yīng)的初速度,其結(jié)果如下表所示。L- 1時(shí),計(jì)算產(chǎn)物的生成量。計(jì)算每個(gè)反應(yīng)混合物的 Km。 ? B、隨機(jī)順序,S 1 為底物A,S 2 為底物B。 ? 如某些金屬離子( Cu2+、 Ag+、 Hg2+)以及 EDTA等,通常能與酶分子的調(diào)控部位中的 SH基團(tuán)作用,改變酶的空間構(gòu)象,引起非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。 1. 竟?fàn)幮砸种? 某些抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)與底物相似,因而能與底物竟?fàn)幣c酶活性中心結(jié)合。 ? 判斷酶的最適底物(天然底物) 。 米氏常數(shù)的意義及測(cè)定 Km — 米氏常數(shù) Vmax — 最大反應(yīng)速度 當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí) 反應(yīng)速度與底物濃度成正比;反應(yīng)為一級(jí)反應(yīng)。 抑制劑類型和特點(diǎn) 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑 可逆抑制劑
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