功能蛋白質組學研究方法(完整版)
【正文】 白表達研究和小分子蛋白結合研究。 目前常用蛋白質芯片有： 1. SELDITOFMS蛋白質芯片 2. 抗體芯片 3. 靶蛋白質芯片 4. 液相蛋白質芯片 SELDITOFMS蛋白質芯片 表面加強激光解吸電離 飛行時間質譜 (surface enhanced laser desorption /ionization time of flightmass spectrometry， SELDITOFMS ） 蛋白質芯片由３部分組成：蛋白質芯片 、 閱讀器和分析軟件 。功能蛋白質組學研究方法 功能蛋白質組學 是指對蛋白質間、蛋白質－ DNA/RNA 間的相互作用的研究。 蛋白質芯片是核心部分 ， 芯片上固定的介質可以是陰離子 、 陽離子 、 疏水性 、 親水性 、 金屬等 ，根據(jù)蛋白質的化學特性而有選擇性地捕獲特異的蛋白質 。 靶蛋白質的獲得： ； ； (如細菌、酵母等 )在芯片上原位表 達蛋白質（ living芯片） 。 這一技術有效地實現(xiàn)了基因型和表型的體外轉換，即在二者之間架起了聯(lián)結的橋梁，使得研究者完全可以在分子克隆的基礎上，有效地實現(xiàn)蛋白質構象的體外控制，從而可以在體外獲得具有良好生物學活性的表達產(chǎn)物。用一定功能的靶分子篩選，可以簡便快速地獲得與靶分子具有強親和力和特異性的小肽或新型蛋白，這些肽段可以作為侯選藥物進行開發(fā)。 GAL4重建后激活轉錄模式圖 BD AD X Y UAS 報告基因（ LacZ） ? 一般地 ,將 BDX的融合蛋白稱作 誘餌 (bait), X往往是已知蛋白 ,ADY稱作 獵物 (prey),能顯示誘餌和獵物相互作用的基因稱 報告基因 ,通過對報告基因的檢測 ,反過來可判斷誘餌和獵物之間是否存在相互作用。 另一類是技術上的假陽性 即由于雙雜交技術上的局限而鑒定出的蛋白質與蛋白質間的相互作用。 因此，雖然雙雜交系統(tǒng)可篩選出大量蛋白質相互作用 ,但其中部分蛋白質在生理狀態(tài)下可能不發(fā)生相互
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