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功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法(完整版)

2025-06-29 14:09上一頁面

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【正文】 白表達(dá)研究和小分子蛋白結(jié)合研究。 目前常用蛋白質(zhì)芯片有: 1. SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片 2. 抗體芯片 3. 靶蛋白質(zhì)芯片 4. 液相蛋白質(zhì)芯片 SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片 表面加強(qiáng)激光解吸電離 飛行時(shí)間質(zhì)譜 (surface enhanced laser desorption /ionization time of flightmass spectrometry, SELDITOFMS ) 蛋白質(zhì)芯片由3部分組成:蛋白質(zhì)芯片 、 閱讀器和分析軟件 。功能蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法 功能蛋白質(zhì)組學(xué) 是指對(duì)蛋白質(zhì)間、蛋白質(zhì)- DNA/RNA 間的相互作用的研究。 蛋白質(zhì)芯片是核心部分 , 芯片上固定的介質(zhì)可以是陰離子 、 陽離子 、 疏水性 、 親水性 、 金屬等 ,根據(jù)蛋白質(zhì)的化學(xué)特性而有選擇性地捕獲特異的蛋白質(zhì) 。 靶蛋白質(zhì)的獲得: ; ; (如細(xì)菌、酵母等 )在芯片上原位表 達(dá)蛋白質(zhì)( living芯片) 。 這一技術(shù)有效地實(shí)現(xiàn)了基因型和表型的體外轉(zhuǎn)換,即在二者之間架起了聯(lián)結(jié)的橋梁,使得研究者完全可以在分子克隆的基礎(chǔ)上,有效地實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)構(gòu)象的體外控制,從而可以在體外獲得具有良好生物學(xué)活性的表達(dá)產(chǎn)物。用一定功能的靶分子篩選,可以簡便快速地獲得與靶分子具有強(qiáng)親和力和特異性的小肽或新型蛋白,這些肽段可以作為侯選藥物進(jìn)行開發(fā)。 GAL4重建后激活轉(zhuǎn)錄模式圖 BD AD X Y UAS 報(bào)告基因( LacZ) ? 一般地 ,將 BDX的融合蛋白稱作 誘餌 (bait), X往往是已知蛋白 ,ADY稱作 獵物 (prey),能顯示誘餌和獵物相互作用的基因稱 報(bào)告基因 ,通過對(duì)報(bào)告基因的檢測 ,反過來可判斷誘餌和獵物之間是否存在相互作用。 另一類是技術(shù)上的假陽性 即由于雙雜交技術(shù)上的局限而鑒定出的蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間的相互作用。 因此,雖然雙雜交系統(tǒng)可篩選出大量蛋白質(zhì)相互作用 ,但其中部分蛋白質(zhì)在生理狀態(tài)下可能不發(fā)生相互
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