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微生物學實驗總結大全-文庫吧在線文庫

2025-10-31 04:15上一頁面

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【正文】 平均菌落數(shù)在50個左右為好,否則要適當增加或減少稀釋度加以調整。在一定的范圍內,微生物細胞濃度與透光度成反比,與光密度成正比,而光密度或透光度可以由光電池精確測出(圖154)。光波的選擇通常在400~700nm之間,具體到某種微生物采用多少還需要經過最大吸收波長以及穩(wěn)定性試驗來確定。2.樣品測定將待測樣品用無菌生理鹽水適當稀釋,搖均勻后,用560nm波長、lcm比色皿測定光密度。以培養(yǎng)時間為橫坐標,以細菌數(shù)目的對數(shù)或生長速率為縱坐標作圖所繪制的曲線稱為該細菌的生長曲線。圖15—5 帶側臂試管的三角燒瓶(三)器材1.菌種 大腸桿菌2.培養(yǎng)基 LB液體培養(yǎng)基70ml,分裝2支大試管(5ml/支),剩余60ml裝入250ml的三角瓶。測定完畢后,取出試管置37℃繼續(xù)振蕩培養(yǎng)。用途:輔助診斷傷寒,副傷寒結果:考慮正常人群抗體水平動態(tài)觀察:恢復期效價增加≥4倍OIgM,出現(xiàn)早,維持時間短,特異性差HIgG,出現(xiàn)遲,維持時間長,特異性強O高H高腸熱癥可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反應的其它沙門菌感染O低H高預防接種或曾患過傷寒(acidfast stain):以5%石炭酸復紅加溫染色,再用3%鹽酸酒精脫色,然后用美藍復染,則分枝桿菌呈紅色(+),其他細菌和背景物質為藍色()。(2)、掌握顯微鏡(油鏡)保護方法血清對倍稀釋法(1)、用生理鹽水將血清進行對倍稀釋,終濃度達到1/ 1/ 1 /8三個稀釋度。(3)、無菌操作正確。注:經一次考核不及格者,可在全班同學考核結束后,允許補考一次。(2)、正確描述液體培養(yǎng)基中的細菌生長情況。(3)、無菌操作正確。第五篇:微生物學實驗考核辦法本科微生物學實驗考核辦法考核方式:按學號順序逐一進場應考。(五)實驗報告1.結果(1)將測定的OD600值填入下表:培養(yǎng)時間對照 0 3 4 6 8 10 12 14 16 20光密度值OD600(2)繪制大腸桿菌的生長曲線。3.培養(yǎng)將已接種的試管置搖床37℃振蕩培養(yǎng)(振蕩頻率250r/min),分別培養(yǎng)0、1116和20h,將標有相應時間的試管取出,立即放冰箱中貯存,最后一同比濁測定其光密度值。本實驗用分光光度計(spectrophotometer)進行光電比濁測定不同培養(yǎng)時間細菌懸浮液的OD值,繪制生長曲線。(五)實驗報告l.結果每毫升樣品原液菌數(shù)=從標準曲線查得每毫升的菌數(shù)稀釋倍數(shù)2.思考題(1)光電比濁計數(shù)的原理是什么?這種計數(shù)法有何優(yōu)缺點?(2)光電比濁計數(shù)在生產實踐中有何應用價值?(3)本實驗為什么采用560nm波長測定酵母菌懸液的光密度?如果你在實驗中需要測定大腸桿菌生長的OD值,你將如何選擇波長?四 大腸桿菌生長曲線的測定(一)目的要求1.通過細菌數(shù)量的測量了解大腸桿菌的生物特征和規(guī)律,繪制生長線。(2)調整菌液濃度 用血細胞計數(shù)板計數(shù)培養(yǎng)24小時的釀酒酵母菌懸液,并用無菌生理鹽水分別稀釋調整為每毫升110210410610810101012106含菌數(shù)的細胞懸液。本實驗采用血細胞計數(shù)板計數(shù)。五、實驗報告1.結果2.將培養(yǎng)后菌落計數(shù)結果填入下表稀釋度104105106Cfu數(shù)/平板123平均123平均123平均每毫升中的cfu2.思考題(1)為什么融化后的培養(yǎng)基要冷卻至45℃左右才能倒平板?(2)要使平板菌落計數(shù)準確,需要掌握哪幾個關鍵?為什么?(3)試比較平板菌落計數(shù)法和顯微鏡下直接計數(shù)法的優(yōu)缺點及應用。同一稀釋度的三個重復對照的菌落數(shù)不應相差很大,否則表示試驗不精確。放菌液時吸管尖不要碰到液面,即每一支吸管只能接觸一個稀釋度的菌懸液,否則稀釋不精確,結果誤差較大。依次標是1010101010106。因此平板菌落計數(shù)的結果往往偏低。若不干凈,則必須重復洗滌至干凈為止。在計數(shù)前若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀,需重新調節(jié)稀釋度后再計數(shù)。B(個)(三)器材1.菌種 釀酒酵母2.儀器或其他用具 血細胞計數(shù)板,顯微鏡,蓋玻片,無菌毛細滴管。用血細胞計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的微生物計數(shù)方法。目前國內外常用的計菌器有:血細胞計數(shù)板、PeteroffHauser計菌器以及Hawksley計菌器等,它們都可用于酵母、細菌、霉菌孢子等懸液的計數(shù),基本原理相同。第二篇:微生物學實驗細菌群體生長表現(xiàn)為細胞數(shù)目的增加或細胞物質的增加。微生物實驗中儀器的使用,我學會了高壓滅菌鍋的使用,以前的實驗從未接觸過,并且還復習了紫外可見分光光度計和分析天平等儀器的使用,使我更加熟練。本學期我們一共完成了十個實驗,分別是:顯微鏡油鏡的使用、細菌形態(tài)觀察和細菌的革蘭氏染色、放線菌、酵母菌、霉菌的形態(tài)觀察和微生物的顯微鏡計數(shù)法、培養(yǎng)基的制備、周圍環(huán)境中微生物的觀察以及從土壤中分離純化微生物、細菌生長曲線的測定、環(huán)境因素對微生物生長發(fā)育的影響、細菌鑒定中常用的生理生化反應、微生物的誘變育種、水中大腸菌群的計數(shù)—MPN法、乳酸菌發(fā)酵實驗、甜酒釀發(fā)酵實驗、固定化酵母細胞發(fā)酵啤酒實驗。在實驗過程中,自己看書,獨立思考,最終解決問題,從而也就加深了我們對課本理論知識的理解,達到了“雙贏”的效果。第一篇:微生物學實驗總結大全微生物學實驗總結高熹11201524
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