微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)總結(jié)大全-文庫吧在線文庫
【正文】 平均菌落數(shù)在50個(gè)左右為好，否則要適當(dāng)增加或減少稀釋度加以調(diào)整。在一定的范圍內(nèi)，微生物細(xì)胞濃度與透光度成反比，與光密度成正比，而光密度或透光度可以由光電池精確測(cè)出(圖154)。光波的選擇通常在400~700nm之間，具體到某種微生物采用多少還需要經(jīng)過最大吸收波長以及穩(wěn)定性試驗(yàn)來確定。2．樣品測(cè)定將待測(cè)樣品用無菌生理鹽水適當(dāng)稀釋，搖均勻后，用560nm波長、lcm比色皿測(cè)定光密度。以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)或生長速率為縱坐標(biāo)作圖所繪制的曲線稱為該細(xì)菌的生長曲線。圖15—5 帶側(cè)臂試管的三角燒瓶(三)器材1．菌種 大腸桿菌2．培養(yǎng)基 LB液體培養(yǎng)基70ml，分裝2支大試管(5ml/支)，剩余60ml裝入250ml的三角瓶。測(cè)定完畢后，取出試管置37℃繼續(xù)振蕩培養(yǎng)。用途：輔助診斷傷寒，副傷寒結(jié)果：考慮正常人群抗體水平動(dòng)態(tài)觀察：恢復(fù)期效價(jià)增加≥4倍OIgM,出現(xiàn)早，維持時(shí)間短，特異性差HIgG,出現(xiàn)遲，維持時(shí)間長，特異性強(qiáng)O高H高腸熱癥可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染O低H高預(yù)防接種或曾患過傷寒(acidfast stain)：以5％石炭酸復(fù)紅加溫染色，再用3％鹽酸酒精脫色，然后用美藍(lán)復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色(+)，其他細(xì)菌和背景物質(zhì)為藍(lán)色()。（2）、掌握顯微鏡（油鏡）保護(hù)方法血清對(duì)倍稀釋法（1）、用生理鹽水將血清進(jìn)行對(duì)倍稀釋，終濃度達(dá)到1/ 1/ 1 /8三個(gè)稀釋度。（3）、無菌操作正確。注：經(jīng)一次考核不及格者，可在全班同學(xué)考核結(jié)束后，允許補(bǔ)考一次。（2）、正確描述液體培養(yǎng)基中的細(xì)菌生長情況。（3）、無菌操作正確。第五篇：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)考核辦法本科微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)考核辦法考核方式：按學(xué)號(hào)順序逐一進(jìn)場(chǎng)應(yīng)考。(五)實(shí)驗(yàn)報(bào)告1．結(jié)果(1)將測(cè)定的OD600值填入下表：培養(yǎng)時(shí)間對(duì)照 0 3 4 6 8 10 12 14 16 20光密度值OD600(2)繪制大腸桿菌的生長曲線。3．培養(yǎng)將已接種的試管置搖床37℃振蕩培養(yǎng)(振蕩頻率250r/min)，分別培養(yǎng)0、1116和20h，將標(biāo)有相應(yīng)時(shí)間的試管取出，立即放冰箱中貯存，最后一同比濁測(cè)定其光密度值。本實(shí)驗(yàn)用分光光度計(jì)(spectrophotometer)進(jìn)行光電比濁測(cè)定不同培養(yǎng)時(shí)間細(xì)菌懸浮液的OD值，繪制生長曲線。（五）實(shí)驗(yàn)報(bào)告l．結(jié)果每毫升樣品原液菌數(shù)=從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得每毫升的菌數(shù)稀釋倍數(shù)2．思考題(1)光電比濁計(jì)數(shù)的原理是什么?這種計(jì)數(shù)法有何優(yōu)缺點(diǎn)?(2)光電比濁計(jì)數(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中有何應(yīng)用價(jià)值?(3)本實(shí)驗(yàn)為什么采用560nm波長測(cè)定酵母菌懸液的光密度?如果你在實(shí)驗(yàn)中需要測(cè)定大腸桿菌生長的OD值，你將如何選擇波長?四 大腸桿菌生長曲線的測(cè)定(一)目的要求1．通過細(xì)菌數(shù)量的測(cè)量了解大腸桿菌的生物特征和規(guī)律，繪制生長線。（2）調(diào)整菌液濃度 用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)培養(yǎng)24小時(shí)的釀酒酵母菌懸液，并用無菌生理鹽水分別稀釋調(diào)整為每毫升110210410610810101012106含菌數(shù)的細(xì)胞懸液。本實(shí)驗(yàn)采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告1．結(jié)果2．將培養(yǎng)后菌落計(jì)數(shù)結(jié)果填入下表稀釋度104105106Cfu數(shù)/平板123平均123平均123平均每毫升中的cfu2．思考題(1)為什么融化后的培養(yǎng)基要冷卻至45℃左右才能倒平板?(2)要使平板菌落計(jì)數(shù)準(zhǔn)確，需要掌握哪幾個(gè)關(guān)鍵?為什么?(3)試比較平板菌落計(jì)數(shù)法和顯微鏡下直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)缺點(diǎn)及應(yīng)用。同一稀釋度的三個(gè)重復(fù)對(duì)照的菌落數(shù)不應(yīng)相差很大，否則表示試驗(yàn)不精確。放菌液時(shí)吸管尖不要碰到液面，即每一支吸管只能接觸一個(gè)稀釋度的菌懸液，否則稀釋不精確，結(jié)果誤差較大。依次標(biāo)是1010101010106。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低。若不干凈，則必須重復(fù)洗滌至干凈為止。在計(jì)數(shù)前若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀，需重新調(diào)節(jié)稀釋度后再計(jì)數(shù)。B（個(gè)）（三）器材1．菌種 釀酒酵母2．儀器或其他用具 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，顯微鏡，蓋玻片，無菌毛細(xì)滴管。用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的微生物計(jì)數(shù)方法。目前國內(nèi)外常用的計(jì)菌器有：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、PeteroffHauser計(jì)菌器以及Hawksley計(jì)菌器等，它們都可用于酵母、細(xì)菌、霉菌孢子等懸液的計(jì)數(shù)，基本原理相同。第二篇：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)細(xì)菌群體生長表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)目的增加或細(xì)胞物質(zhì)的增加。微生物實(shí)驗(yàn)中儀器的使用，我學(xué)會(huì)了高壓滅菌鍋的使用，以前的實(shí)驗(yàn)從未接觸過，并且還復(fù)習(xí)了紫外可見分光光度計(jì)和分析天平等儀器的使用，使我更加熟練。本學(xué)期我們一共完成了十個(gè)實(shí)驗(yàn)，分別是：顯微鏡油鏡的使用、細(xì)菌形態(tài)觀察和細(xì)菌的革蘭氏染色、放線菌、酵母菌、霉菌的形態(tài)觀察和微生物的顯微鏡計(jì)數(shù)法、培養(yǎng)基的制備、周圍環(huán)境中微生物的觀察以及從土壤中分離純化微生物、細(xì)菌生長曲線的測(cè)定、環(huán)境因素對(duì)微生物生長發(fā)育的影響、細(xì)菌鑒定中常用的生理生化反應(yīng)、微生物的誘變育種、水中大腸菌群的計(jì)數(shù)—MPN法、乳酸菌發(fā)酵實(shí)驗(yàn)、甜酒釀發(fā)酵實(shí)驗(yàn)、固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵啤酒實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)過程中，自己看書，獨(dú)立思考，最終解決問題，從而也就加深了我們對(duì)課本理論知識(shí)的理解，達(dá)到了“雙贏”的效果。第一篇：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)總結(jié)大全微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)總結(jié)高熹11201524
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