【正文】 測定 對每個樣品，選擇適宜的三個連續(xù)稀釋度的樣品稀釋液。 置BGLB肉湯管于36177?！嫠∠鋬?，培養(yǎng)24177。1℃的培養(yǎng)24177。1℃的培養(yǎng)24177。 Korser氏枸掾酸鹽肉湯：于36177。 結果報告：大腸桿菌為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，發(fā)酵乳糖產酸產氣，IMViC試驗為++或+，再根據LST肉湯陽性管數查MPN表，報告每克（毫升）樣品中大腸桿菌MPN值。1℃ 4048h　　　　　　　　36177。于36177?！　”?　腸桿菌科各屬生化反應初步鑒別表反應序號硫化氫靛基質尿素氰化鉀賴氨酸判定菌屬A1++沙門氏菌屬A2+++沙門氏菌屬（少見）緩慢愛德華氏菌A3+++弗勞地氏檸檬酸桿菌、奇異變形桿菌A4++++普通變形桿菌B1+沙門氏菌屬、大腸埃希氏菌、甲型傷寒沙門氏菌、雞沙門氏菌、志賀氏菌屬B2+++大腸埃希氏菌、志賀氏菌屬B3+/++++克雷伯氏菌族各屬陰溝腸桿菌、弗勞地氏檸檬酸桿菌B4++/+摩根氏菌、普羅菲登斯菌屬 反應序號A1：典型反應判定為沙門氏菌屬。表6沙門氏菌屬各生化群的鑒別項目ⅠⅡⅢⅣⅤⅥ衛(wèi)矛醇山梨醇水楊苷ONPG丙二酸鹽KCN+++++++++++++++ 血清學分型鑒定具體內容見GB/《食品衛(wèi)生微生物學檢驗沙門氏菌檢驗》。1℃ 48h挑可疑菌落，移種到肉湯培養(yǎng)基36177。1℃培養(yǎng)46177。 本菌為革蘭氏陽性球菌，排列是葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌菌體較小，～1μm。 用滅菌吸管吸取1∶10稀釋液10mL，注入試管中，另用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸管反復吹吸50次，使霉菌孢子充分散開。 干燥：在空氣中令其自然干燥或在酒精燈火焰上端高處微微加溫但勿靠近火焰。染色時間過長,結晶紫與細胞結合，脫色不易，染色不夠，結晶紫尚未與細胞結合。 計算公式：每立方米空氣中細菌數＝50000N/(At)N：為培養(yǎng)皿經培養(yǎng)后的菌落數A：為所用平皿面積(cm2)，平皿直徑(248。用酒精棉球灼燒龍頭三分鐘滅菌，再開放水龍頭使水流5分鐘，用無菌瓶收集水樣。如所有發(fā)酵管都不產氣，則可報告為大腸菌群陰性；如有產氣者，則按下列程序進行。注：本文參照GB575085《生活飲用水標準檢驗方法》（十二）食品接觸面的微生物檢驗1 原理食品接觸面分為人員手、設備、器具等食品直接接觸，其表面存在有微生物，為更好控制微生物生長繁殖，以大腸菌群為主要檢測指標，檢測結果應基本呈陰性（其中人員手需做菌落總數檢測）。1℃溫箱內，培養(yǎng)18~24小時，取出觀察菌落形態(tài)。4 報告人員手菌落總數為cfu/只手，大腸菌群為未檢出或檢出；設備、器具等大腸菌群為未檢出或檢出。 表面測定法（粗篩法） 擦去蔬菜表面泥土，滴23滴洗脫液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。對陽性結果的樣品，可用其它分析方法進一步確定具體農藥品種和含量。 紅色藥片與白色藥片疊合反應的時間以3min為準，3min后藍色會逐漸加深，24h后顏色會逐漸退去。 當溫度條件低于37℃，酶反應的速度隨之放慢，藥片加液后放置反應的時間應相對延長，延長時間的確定，應以空白對照卡用（體溫）手指捏3分鐘時可以變藍，即可往下操作。 將速測卡對折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應。 取一片速測卡，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進行預反應，有條件時在37℃恒溫裝置中放置10min。凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的芽孢桿菌即可報告為大腸菌群陽性。Y＝A*10（Y為工人手表面細菌菌落總數，cfu/只手；A為平板上平均細菌菌落數） 大腸菌群的檢測每支采樣管充分混勻后取1ml樣液，分別放入10ml乳糖膽鹽發(fā)酵管中，每個樣品平行接種3管，置36177。1℃培養(yǎng)24177。 大腸菌群數檢查：　　乳糖發(fā)酵試驗→分離培養(yǎng)→證實試驗→報告 乳糖發(fā)酵試驗：自來水的接種方法：在2個裝有50ml三倍料乳糖膽鹽發(fā)酵液的三角瓶中，各加入100ml水樣；在10支裝有5ml同樣發(fā)酵的試管中，各加入10ml水樣，混勻。該菌群主要來源于人畜糞便，具有指示菌的一般特征，故以此作為糞便污染指標評價飲水的衛(wèi)生質量。2 原理根據空氣中微生物一般吸附在塵埃中，由于地心引力塵埃下沉到地面或物體表面原理制定的。（此時結晶紫與碘液成復合物） 脫色：斜置載玻片，用95%酒精沖洗約20~30秒種，立即水洗，吸干。 報告：每克(或毫升)食品所含霉菌以個/g(個/mL)表示。注：本文參照SN017292《出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法》（八）霉菌計數1 主題內容與適用范圍本文規(guī)定了食品和飲料霉菌計數的檢驗方法。 *100mm試管內充分混合，置36177。 再加入20ml 含20％NaCl的單料胰蛋白胨大豆肉湯，置36177。2 設備和材料吸管（1ml、10ml）、恒溫培養(yǎng)箱（36177。表5甘露醇山梨醇判定結果++沙門氏菌靛基質陽性變體（要求血清學鑒定結果）緩慢愛德華氏菌 反應序號B1：補做ONPG。表2　腸桿菌科各屬在三糖鐵瓊脂內的反應結果斜面底層產氣硫化氫可能的菌屬和種++/+沙門氏菌屬、弗勞地氏檸檬酸桿菌、變形桿菌屬、緩慢愛德華氏菌+++/+沙門氏菌Ⅲ、弗勞地氏檸檬酸桿菌、普通變形桿菌++沙門氏菌屬、大腸埃希氏菌、蜂窩哈夫尼亞菌、摩根氏菌、普羅菲登斯菌屬+傷寒沙門氏菌、雞沙門氏菌、志賀氏菌屬、大腸埃希氏菌、蜂窩哈夫尼亞菌、摩根氏菌、普羅菲登斯菌屬+++/大腸埃希氏菌、腸桿菌屬、克雷伯氏菌屬、沙雷氏菌屬、弗勞地氏檸檬酸桿菌說明：在三糖鐵瓊脂內只有斜面產酸并同時硫化氫(H2S)陰性的菌株可以排除，其他的反應結果均有沙門氏菌的可能，同時也均有不是沙門氏菌的可能。同時，另取10mL，轉種于100mL亞硒酸鹽骯氨酸（SC）增菌液內，于36177。1℃、42℃）、冰箱、均質器、振蕩器、平皿、稀釋瓶、天平、顯微鏡、接種棒等3 培養(yǎng)基和試劑緩沖蛋白胨水（BP）、氯化鎂孔雀綠增菌液、四硫酸鈉煌綠(TTB)增菌液、亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液、亞硫酸鉍瓊脂(BS)、DHL瓊脂、HE瓊脂、WS瓊脂、SS瓊脂、三糖鐵瓊脂、蛋白胨水、靛基質試劑、尿素瓊脂()、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基、氨基酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基、糖發(fā)酵管、ONPG培養(yǎng)基、半固體瓊脂、丙二酸鈉培養(yǎng)基、沙門氏菌因子血清：按26種用于初步分型；57種用于進一步分型；163種用于詳細分型。2h，觀察試管中是否產氣。2h后。用接種針接觸菌落中心部位，移種到營養(yǎng)瓊脂斜面上，36177。 記錄EC肉湯管的產氣情況。 結果報告：按BGLB肉湯產氣管數，查MPN表報告每克（毫升）樣品中大腸菌群的MPN值。2h。 制備樣品勻液以無菌操作取25g樣品，放入裝有225ml稀釋劑的滅菌均質杯內，于8000r/min均質12min，制成1：10的樣品勻液。也可將樣品的平板菌落數記錄為10的指數形式。培養(yǎng)箱應保持一定的濕度，經48h培養(yǎng)的瓊脂培養(yǎng)基的失重不得超過15％。 分別加1215ml平板計數瓊脂（約45℃左右）到平皿內。 稀釋樣品勻液 用10ml滅菌吸管準確吸取1：10的樣品勻液10ml，放入裝有90ml稀釋劑的150ml 稀釋瓶中。 實驗員應愛護儀器設備，使用前應檢查，使用后應及時清理清潔，并定期維護保養(yǎng)，下班前應檢查設備電源是否關閉。 包裝：三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎，試管集中于試管簍。 移液管、倒管的洗滌方法：新的移液管及倒管先在的５％鹽酸溶液中浸一小時，然后用自來水沖洗幾次，最后用蒸餾水換洗幾次。 含有對人體有傳染性病菌的器具，應先煮沸滅菌后再進行洗滌。做凝集試驗用的玻片或平皿，必須經高壓滅菌后洗滌。 取出的合格滅菌物品，應存放于貯藏室或防塵柜內，嚴禁與未滅菌物品混放。 蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；置滅菌器于火源上加熱，立式壓力鍋通上電源，并打開頂蓋上的排氣閥放出冷氣（水沸騰后排氣10～15m