tlc生物自顯影篩選天然產(chǎn)物菊花等中的抗氧化成分-文庫吧在線文庫
【正文】 點(diǎn)樣器 定性：。氧化鋁一般在100150目。點(diǎn)樣時必須注意勿損傷薄層表面。展開劑的主要任務(wù)是溶解被分離的物質(zhì)，在吸附劑薄層上轉(zhuǎn)移被分離物質(zhì)，~。用于紙色譜的顯色劑一般都適用于薄層色譜，還有防腐劑的顯色劑不適合用于紙色譜及含有有機(jī)黏合劑薄層的顯色，又時噴顯色劑后續(xù)加熱，這也不是用于紙色譜。 薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。多糖和寡糖可水解為單糖，可用薄層色譜法進(jìn)行單糖和雙糖的定性和定量。藥物代謝產(chǎn)物的樣品一般先經(jīng)預(yù)處理后用薄層分析，應(yīng)用也很廣，但有時因含量甚微，不用采用氣相和高效液相色譜法靈敏。 優(yōu)點(diǎn) 薄層層析有許多優(yōu)點(diǎn)：它保持了操作方便、設(shè)備簡單、顯色容易等特點(diǎn)，同時展開速率快，一般僅需15～20分鐘；混合物易分離，分辨力一般比以往的紙層析高10～100倍，它既適用于只有0．01μg的樣品分離，又能分離大于500mg的樣品作制備用，而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。方法是基于在孕婦的尿中能檢出比未媳婦婦女的尿中含更多的孕二醇，把兩者的尿提取后點(diǎn)在薄層上比較，即可作出判斷。用硅膠G薄層和丙酮：氯仿（1:1）以及激發(fā)波長365nm和波長450nm，可用熒光法測定ng量的曲黃素B1,B2,G1,G2,法靈敏快速。與食品和營養(yǎng)有害的物質(zhì)則有殘留農(nóng)藥、致癌的曲黃霉素等。 (6) 薄層掃描 薄層掃描法指用一定波長的光照射在經(jīng)薄層層析后的層析板上，對具有吸收或能產(chǎn)生熒光的層析斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，用反射法或透射法測定吸收的強(qiáng)度，以檢測層析譜。 顯色 多數(shù)有機(jī)化合物吸附碘蒸氣后顯示不同程度的黃褐色斑點(diǎn)，這種反應(yīng)有可逆及不可逆兩種情況，前者在離開碘蒸氣后，黃褐色斑點(diǎn)逐漸消退，并且不會改變化合物的性質(zhì)，且靈敏度也很高，故是定位時常用的方法；后者是由于化合物被碘蒸氣氧化、脫氫增強(qiáng)了共軛體系，因此在紫外光下可以發(fā)出強(qiáng)烈而穩(wěn)定的熒光，對定性及定量都非常有利，但是制備薄層時要注意被分離的化合物是否改變了原來的性質(zhì)。（垂直上行展開，垂直下行展開，一向水平展開，對向水平展開） B 多次展開 單向?qū)Υ苏归_，用相同的展開劑沿同一方向進(jìn)行相同距離的重復(fù)展開，直至分離滿意，廣泛應(yīng)用于薄層色譜法 C 雙向展開 用于成分較多、性質(zhì)比較接近的難分離組分的分離。 點(diǎn)樣方式有點(diǎn)狀點(diǎn)樣和帶狀點(diǎn)樣。氧化鋁、硅膠根據(jù)活性分為五個級，一級活性最高，五級最低。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。 (2) 固定相（吸附劑）或載體層層析硅膠薄層層析硅膠最常用的有硅膠G、硅膠GF〈[254]〉、硅膠H、硅膠HF〈[254]〉，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F〈[254]〉等。由于各組分在溶劑中的溶解度不同，以及吸附劑對它
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