【正文】 ） 均值： % (n=2) 均值： % (n=5) 177。進(jìn)樣口溫度為 200℃ ，檢測(cè)器溫度為 250℃ ，頂空瓶平衡溫度為 70℃ ，平衡時(shí)間為 30分鐘，取系統(tǒng)適用性溶液頂空進(jìn)樣，按正丙醇（內(nèi)標(biāo)）、丁酮、乙酸乙酯的順序出峰，各峰間的分離度均應(yīng)符合要求。 溶劑 RART值 甲醇 丙酮 異丙醇 乙腈 二氯甲烷 正丙醇 丁酮 乙酸乙酯 四氫呋喃 四氯化碳 環(huán)己烷 苯 1,2二氯乙烷 乙酸異丙酯 甲基異丁基酮 二氧六環(huán) 吡啶 甲苯 乙酸丁酯 ? ? 對(duì)生產(chǎn)工藝過程中使用 2乙基己酸的原料，增加 2乙基己酸檢查，采用氣相色譜法測(cè)定。m以上的微粒不得過 6000粒，含25181。用于制備系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用分離度溶液 ， 測(cè)定分離度， ? 結(jié)果按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算 ,即得。 ? 測(cè)定法 取本品約 20mg，精密稱定，置 100ml棕色量瓶中，加上述 2ml溶解后，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取 20μ l注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取頭孢地尼對(duì)照品適量，同法測(cè)定。 ? 如：頭孢哌酮鈉 ? 雜質(zhì) A： (5aR,6R)6[[(2R)2[[(4ethyl2,3dioxopiperazin1yl)carbonyl]amino] 2(4hydroxyphenyl)acetyl]amino]5a,6dihydro3H,7Hazeto[2,1b]furo[3,4d][1,3]thiazine1,7(4H)dione ? 中文名： (5aR,6R)6[[(2R)2[[(4乙基 2,3二氧代哌嗪 1基 )甲?；?]氨基 ]2(4羥基苯基 )乙酰基 ]氨基 ] 5a,6二氫 3H,7H氮雜環(huán)丁烷并 [2,1b]呋喃并 [3,4d][1,3]噻嗪 1,7(4H)二酮 ? 如：頭孢唑林鈉 ? 雜質(zhì) A： R=H: (6R,7R)7amino3[[(5methyl1,3,4thiadiazol2yl)sulphanyl] methyl]8oxo5thia1azabicyclo[]oct2ene2carboxylic acid 中文名： (6R,7R)7氨基 3[[(5甲基 1,3,4噻二唑 2基 )硫代 ]甲基 ]8氧代 5硫代 1氮雜雙環(huán) []辛 2烯 2羧酸 ? 雜質(zhì) E： 5methyl1,3,4thiadiazol2thiol 中文名： 5甲基 1,3,4噻二唑 2甲硫醇 ? 2．大環(huán)內(nèi)酯類抗生素 ? 該類抗生素可分為十四元環(huán)、十五元環(huán)和十六元環(huán)三類。 表 組分測(cè)定 品種 組分測(cè)定 方法 系統(tǒng)適用性要求 乙酰螺旋霉素 乙酰螺旋霉素片 乙酰螺旋霉素膠囊 單乙酰螺旋霉素 II與III 雙乙酰螺旋霉素 II與III 同 2022年 版 修訂為： 系統(tǒng)適用性對(duì)照品溶液色譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜一致 吉他霉素 吉他霉素片 吉他霉素 A A AA13以及總組分 同 2022年 版 修訂為： 系統(tǒng)適用性對(duì)照品溶液色譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜一致 麥白霉素 麥白霉素片 麥白霉素膠囊 修訂為： 麥迪霉素 A A2和吉他霉素 A A A8 同 2022年 版 修訂為： 系統(tǒng)適用性對(duì)照品溶液色譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜一致，并規(guī)定組分出峰順序。見表 。 ? 如 :麥白霉素片 ,麥白霉素膠囊 ,吉他霉素片 ? 溶出度介質(zhì)可加酶，如麥白霉素膠囊和羅紅霉素膠囊，后者還規(guī)定了胰酶的加量以單位表示（每 1ml中含胰蛋白酶不少于 、胰淀粉酶不少于 于 ） ,更為科學(xué)合理。 ? 在鑒別試驗(yàn)中規(guī)定 TLC和 HPLC兩個(gè)色譜鑒別項(xiàng)，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件任選其中之一，便于靈活操作。每 1g供試品中，含 10μm以上的微粒不得過 6000粒，含 25μm以上的微粒不得過 600粒。 ? ? ELSD屬于通用型檢測(cè)器 , 幾乎對(duì)所有的化合物均有響應(yīng)，流動(dòng)相和環(huán)境溫度對(duì)響應(yīng)值的影響小 ,適宜用于無特征紫外吸收化合物的定性和定量分析， ? 由于其色譜響應(yīng)值 (峰面積的對(duì)數(shù)值 )與對(duì)應(yīng)的質(zhì)量（溶液濃度的對(duì)數(shù)值）呈線性關(guān)系，因此用回歸方程計(jì)算含量。 ? （ 2）阿米卡星和硫酸阿米卡星及其制劑共 4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的含量測(cè)定采用柱前衍生化 HPLCUV方法。 ? ? 四環(huán)類抗生素的差向異構(gòu)化反應(yīng)，可用下式表示： OO HO HHO HN ( C H3)2HN H2OR 11234512AOO HO HHO HN ( C H3)2HN H2OR 11234512A? ? (1)酸性條件下 : ? 四環(huán)類在較酸溶液中特別在加熱情況下， 產(chǎn)生脫水四環(huán)類降解產(chǎn)物，脫水產(chǎn)物的共軛雙鍵的數(shù)目增多，因此色澤加深。 ? 如 :鹽酸多西環(huán)素在甲醇溶液中紫外特征較強(qiáng) ,故增加了紫外鑒別： 20ug/ml甲醇溶液在269nm和 354nm處有最大吸收，在 234nm和296nm處有最小吸收。 ? 經(jīng)試驗(yàn)，國(guó)內(nèi)樣品 4差向四環(huán)素的含量均小于 %，故將 《 中國(guó)藥典 》 2022年版標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的 4差向四環(huán)素 ≤%的限度改為 %。 ? 如：鹽酸多西環(huán)素 《 歐洲藥典 》 ，鹽酸多西環(huán)素（ Doxycycline Hyclate）中有 6個(gè)潛在雜質(zhì)，分別命名為雜質(zhì) A、 B、 C、 D、 E、 F，其中雜質(zhì) A (β多西環(huán)素，又稱為 6表多西環(huán)素， 6epidoxycycline)，是合成過程中美他環(huán)素轉(zhuǎn)變?yōu)槎辔鳝h(huán)素時(shí)產(chǎn)生的 6差向副產(chǎn)物，雜質(zhì) B美他環(huán)素是合成中間體，雜質(zhì) E土霉素為合成起始原料，雜質(zhì) F可能是土霉素中的雜質(zhì) 2乙酰 2去酰胺土霉素在合成多西環(huán)素過程的共存物，雜質(zhì) C、 D 可能是多西環(huán)素在溶液或放置過程中生成的差向異構(gòu)體。 ? 在無菌檢查去抑菌作用時(shí)可以利用該性質(zhì)。 ? 本品分子結(jié)構(gòu)中具有多個(gè)不對(duì)稱碳原子，因此有旋光性。 ? 2022年版中測(cè)定硫酸鹽含量采用的是容量法與傳統(tǒng)的重量法測(cè)定相比，有其先進(jìn)性，但滴定終點(diǎn)突躍不明顯 . ? 本版藥典建立的 HPLCELSD方法測(cè)定硫酸鹽含量，采用硫酸滴定液作為對(duì)照品，解決了對(duì)照品的問題，該方法方便、準(zhǔn)確。 ? 防腐劑 ? 本版藥典對(duì)氨基糖苷類抗生素滴眼液中常用防腐劑如羥苯乙酯、丙酯、苯扎氯胺等進(jìn)行檢查。 ? 以上（ 1）、（ 2）兩項(xiàng)可選做一項(xiàng) 。 表 含量測(cè)定 品種 HPLC 微生物法 ( 管碟法 或 濁度法 ) 48 10 38 ? 氨基糖苷類抗生素 ? 氨基糖苷類抗生素的特點(diǎn) ? 本類藥物結(jié)構(gòu)中都有以氨基環(huán)己醇與氨基糖縮合而成的苷，結(jié)構(gòu)中沒有共軛雙鍵所以沒有可供分析用的特征的紫外吸收僅有末端吸收，結(jié)構(gòu)中具有不對(duì)稱碳原子有旋光性。由于原料的水溶性較差，因此要求口服制劑檢查溶出度或釋放度。 同紅霉素 硬脂酸紅霉素 硬脂酸紅霉素片 硬脂酸紅霉素膠囊 硬脂酸紅霉素顆粒 紅霉素 A 紅霉素 B 紅霉素 C 乳糖酸紅霉素 注射用乳糖酸紅霉素 紅霉素 A 紅霉素 B 紅霉素 C ? 乙酰螺旋霉素與吉他霉素的組分 ? 測(cè)定方法同 2022年 版 , ? 修訂系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，系統(tǒng)適用性對(duì)照品溶液的色譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜一致 . ? 麥白霉素的組分 ? 主要組分有 5個(gè)， 2022年版僅控制麥迪霉素 A1, 2022版全面控制麥迪霉素 A A2和吉他霉素 A A A8； ? 本品主成分為麥迪霉素 A1，故采用麥迪霉素A1的標(biāo)準(zhǔn)品為基準(zhǔn) , 以外標(biāo)法計(jì)算各組分含量 . ? 規(guī)定（按干燥品計(jì)）： ? 麥迪霉素 A1 不得低于 48% ? 吉他霉素 A6 不得低于 12% ? 5個(gè)組分總含量不得低于 70%。 ? ? ? 采用 HPLC法測(cè)定，組分測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)準(zhǔn)圖譜由中檢所提供，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的參比。 ） 甲醇（ 80： 20）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為 （ 254nm）下照射24小時(shí)后的本品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每 1ml中約含 1mg的溶液，量取 20μ l注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氨曲南峰與氨曲南 E異構(gòu)體峰（相對(duì)保留時(shí)間約 ）的分離度應(yīng)大于 。 ? 測(cè)定法 取本品適量（約相當(dāng)于拉氧頭孢25mg），精密稱定，置 100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取 10μ l注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取拉氧頭孢對(duì)照品適量，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中 C20H20N6O9S的含量。 ? 含量測(cè)定 ? 本類共 127個(gè)品種的含量測(cè)定均采用 HPLC法或 HPLC梯度洗脫。 ? 不溶性微粒與可見異物 ? 供注射用的原料藥增加不溶性微粒與可見異物檢查 ,以保證制劑能符合注射劑的要求。 ? 對(duì)照品溶液的制備 根據(jù)試驗(yàn)確定的具體檢測(cè)對(duì)象，制備對(duì)照品溶液。本版藥典部分品種溶媒殘留檢查項(xiàng)下采用標(biāo)準(zhǔn)加入法計(jì)算，該方法可提高檢測(cè)靈敏度。 % 頭孢他啶 均值 :F= 103 (n=5) 均值： F= 103 (n=5) 177。 ? 由于高分子聚合物的對(duì)照品不易獲得，樣品中的高聚物量較少，故不能直接用樣品與聚合物對(duì)照品配制分離度試驗(yàn)用溶液， ? 根據(jù)本方法的分離原理，擬加入一定量的藍(lán)色葡聚糖 2022，制成含一定濃度藍(lán)色葡聚糖2022的樣品溶液來進(jìn)行分離度試驗(yàn)。 ? 但在 2022年版藥典 β 內(nèi)酰胺類抗生素品種進(jìn)行高分子雜質(zhì)檢查時(shí)，由于該方法的分析周期較長(zhǎng)，加之在執(zhí)行過程中涉及到較多生產(chǎn)廠與檢驗(yàn)部門，工作量大幅度增加。 ? 頭孢拉定、頭孢氨芐、頭孢羥氨芐中 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）及頭孢哌酮鈉中雜質(zhì) A等均采用雜質(zhì)對(duì)照品外標(biāo)法。 ? 如：頭孢丙烯規(guī)定： ? 頭孢丙烯 (Z)異構(gòu)體峰的保留時(shí)間約為 23～ 30分鐘，頭孢丙烯（ E）異構(gòu)體峰的保留時(shí)間約為 30～ 40分鐘，理論板數(shù)按頭孢丙烯（ Z）異構(gòu)體峰計(jì)算應(yīng)不小于 10000，頭孢丙烯（ Z）異構(gòu)體峰與相鄰雜質(zhì)峰間的分離度應(yīng)符合要求。 ? 有關(guān)物質(zhì) ? 頭孢菌素類藥物原料 27個(gè)品種均規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)，制劑 42個(gè)品種除 6個(gè)品種顆粒與干混懸劑由于輔料干擾未規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)外 , 其他品種均有有關(guān)物質(zhì)檢查。 ? 注射用粉針劑的外觀性狀與原料相同。本版藥典增加球狀蛋白親水硅膠為色譜柱填充劑的高分子聚合物分析方法 ? 12. 2022年版藥典氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類的含量測(cè)定方法為微生物檢定法的管碟法，本版藥典增加微生物檢定法濁度法，二法并列。根據(jù)各品種雜質(zhì)的情況，在同一品種中可以同時(shí)應(yīng)用 2種或 3種的計(jì)算方法。使該類品種標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)含量高于國(guó)外藥典標(biāo)準(zhǔn)。可利用對(duì)照品溶液色譜圖中雜質(zhì)的保留時(shí)間，對(duì)特定雜質(zhì)進(jìn)行控制。 ? 喹諾酮類 46個(gè)品種就有 40個(gè)品種用 HPLC法測(cè)定有關(guān)物質(zhì)。 應(yīng)用 HPLCELSD測(cè)定氨基糖苷類抗生素的組分，有關(guān)物質(zhì)，特定雜質(zhì)及含量的品種進(jìn)一步增加。 同時(shí)又用該方法測(cè)定硫酸鹽（ SO4）的含量。 ? 其他如 : ? 氯霉素類，大環(huán)內(nèi)酯類，氨基糖苷類 ,利福平等均增修訂了有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)。 ? 有關(guān)物質(zhì)采用自身對(duì)照時(shí)，對(duì)本身純度低于 85%的品種，提出對(duì)自身對(duì)照溶液主峰進(jìn)行校正。 ? 6. 四環(huán)素類統(tǒng)一了該品種有關(guān)物質(zhì)與含量測(cè)定的HPLC法色譜條件，與 2022年版方法比較有較大改進(jìn)。 ? 10. 增加有機(jī)溶媒檢查的品種較多。 ? 13. 更多的品種用細(xì)菌內(nèi)毒素的檢查替代熱原檢查 。 ? 鑒別 ? 原料藥與注射用粉針的鑒別均采用色譜法HPLC，光譜法 IR以及鉀、鈉離子火焰反應(yīng)，也有多個(gè)品種采用 HPLC與 TLC二法并列。 ? 頭孢菌素品種有關(guān)物質(zhì)檢查均采用