【正文】 微囊藻 藻樣的吸光度值 。 最終取以下數據：將原藻液稀釋 100 倍得吸光度為 ，藻密度為 105個 /mL；稀釋 50 倍得吸光度為 ，藻密度為 105個 /mL；將原藻液稀釋 20 倍得吸光度為，藻密度為 105個 /mL；稀釋 10倍得吸光度為 ，藻密度為 105個 /mL；將原藻液稀釋 5倍得吸光度為 ，藻密度為 105個 /mL；而培養(yǎng)基的吸光度 ，藻密度為 105個 /mL。 圖 32 高效液相色譜法測定四環(huán)素在銅綠微囊藻中的降解實驗 實驗方法 將 15 個 100 mL 三角燒瓶分別加入經稀釋后的藻液， 初始藻密度為 106 個 /mL。使用高效液相色譜時， 液體 待檢測物在不同的時間被注入色譜柱，通過 壓力 在固定相中移動，由于被測物種不同物質與固定相 的相互作用不同，不同的物質順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，每個峰頂都代表一個另外 化合物 的種類，最后通過分析比對這些信號來判斷待側物所含有的物質。以 A595nm為縱坐標，標準蛋白質濃度為橫坐標，繪制標準曲線。蛋白質 —— 考馬斯亮藍復合物溶液顏色的深淺與蛋白質的濃度成正比。編號為 0～ 3 的 4 瓶藻樣作為控制樣參照，不添加抗生素；標號為 28～ 30 的，控制四環(huán)素濃度為 1 mg/L；標號為 31～ 33 的，控制四環(huán)素濃度為 2 mg/L；標號為 34～ 36 的，控制四環(huán)素濃度為 5 mg/L；標號為 37～ 39 的，控制四環(huán)素濃度為 10 mg/L。 使用血球計數板計數時，先要測定每個 中 方格中微生物的數量，再換算成每毫升菌液（或每克樣品）中微生物細胞的數量。具備完成本課題所需的 吸光度的測定以及生長曲線的繪制、毒理學 實驗的先進儀器設備和良好工作條件。 實驗方案論證 諸多文獻闡明，四環(huán)素類抗生素能微生物、植物和動物都會產生影響。 接種時一般選 250 mL 三角燒瓶接種原藻液 50 mL 并加入新配培養(yǎng)液 100～ 150 mL 或選取 500 mL 的三角燒瓶接種原藻液 100 mL 并加入新配培養(yǎng)液 250 mL。 實驗采用 BXM30R 立式壓力蒸汽滅菌鍋，對實驗所需的培養(yǎng)液（培養(yǎng)基）、以及潔凈的容量瓶、三角燒瓶、燒杯、試管等進行滅菌。首先取一 潔凈 的 4 L 玻璃瓶，加入 4 L 純凈水（實驗采用 娃 哈哈瓶裝純凈水） 。2H2O g/L 5 檸檬酸 C6H8O72H2O、CuSO4 NaNO K2HPO4 因此， 選用 淡水藻銅綠微囊藻為研究對象，研究四環(huán)素對銅綠微囊藻的急性毒性是具有現實意義的 。澳大利亞某清澈湖水處理的自來水樣品檢測出 MC(1～ 23 pg/mL)，加拿大 Alberta 地區(qū)某湖來源的自來水樣品 MCLR 含量在 100～ 1000 pg/mL 之間。 Song 等 ［ 27］ 于 20xx年在太湖五里湖和梅梁灣檢測的表層水最大胞外 MC 含量分別為 和 μg/L。水華能夠引起家畜和禽類中毒死亡以來，已證實有十一多種藍藻能夠引起動物中毒甚至死亡，其中銅綠微囊藻、水華魚腥藻和水華束絲藻是形成淡水藍藻水華的主要種類，故有關的研究較多。囊泡提供微囊藻足夠的浮力，使其停留在有足夠光線和 二氧化碳 提供生長的水層。所有的藍藻都含有一種特殊的藍色色素，藍藻就是因此得名。除了常見的革蘭陽性菌、革蘭陰性菌以及厭氧菌外，多數立克次體屬、支原體屬、衣原體屬、非典型分枝桿菌屬、螺旋體也對本品敏感。C at 760 mmHg； 蒸汽壓： 0 mmHg at 25176。L1。L1，而四環(huán)素的 NOEC 值為 340 mg ［ 2 24］ Kong 等 ［ 25］ 通過一系列溶液培養(yǎng)實驗對于紫花苜蓿對土霉素的攝取情況及土霉素對紫花苜蓿發(fā)芽及根的生長的影響進行了研究。葉綠素含量減少，則藻細胞的光合作用強度下降，即新陳代謝強度減弱，細胞的繁殖能力下降。L1， LOEC 值為 mg一般情況下，四環(huán)素對原核生物（如藍藻）的毒性高于單細胞真核生物（如微藻類 ），單細胞生物對抗生素的敏感度則高于多細胞生物，這也與設計生產四環(huán)素類藥物的初衷一致。而在荷蘭，有研究推測，如果將荷蘭在飼料中添加的所有促生長劑分散在 200 萬 hm2的耕地上，那么每平方米的耕地上可能發(fā)現 130 mg 抗生素及其代謝物，與之對應的是每千克干土為 mg。 Liguoro 等 ［ 7］ 以 60mg 四環(huán)素類抗生素 的污染現狀 四環(huán)素類是由鏈霉菌產生的一類廣譜抗生素，在化學結構上都屬于多環(huán)并四苯羧基酰胺母核的衍生物，可分為天然品和四環(huán)素類抗生素，一般通過與核蛋白體的 30S 亞單位結合，阻止氨?；?tRNA 同核蛋白體結合產生藥理作用，起到抑菌、殺菌作用。 此外獸藥抗生素在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中以亞治療劑量長期添加于動物飼料，起到刺激動物生長和促進增產的作用。據報道 , 在畜禽生產中使用的抗生素有 30%~90%以母體化合物形式隨畜禽糞便排出，某些抗生素能以母體化合物形式排出高達 95%［ 2］ 。 Inhibit。本文介紹了四環(huán)素 類抗生素的污染現狀以及生態(tài)毒性。 Beasley, V. R.。 Fanali, C.。 Carmichael, W. W.。 Hooser, S. B.。 四、畢業(yè)設計（論文）應完成的具體工作 實驗室穩(wěn)定培養(yǎng)藍藻細胞； 藍藻細胞生長曲線繪制及 EC50 計算； 蛋白含量檢測； 抗生素在藻液體系中的含量變化檢測。1176。上海應用技術學院 畢業(yè) 論文 題 目： 四環(huán)素對藍藻的急性毒性研究 專 業(yè)： 環(huán)境工程 班 級： 09107411 學生姓名： 倪 吉 學生學號： 0810741116 指導老師： 葉 璟 化學與環(huán)境工程學院 20xx 年 5 月 30 日 上海應用技術學院畢業(yè)設計（論文）任務書 題目：四環(huán)素對藍藻的急性毒性研究 學生姓名：倪吉 學號： 0810741116 專業(yè)：環(huán)境工程 任務起止日期： 20xx 年 12 月 25 日至 20xx 年 5 月 30 日 共 16 周 一、 課題的任務內容： 了解并掌握抗生素四環(huán)素的化學性質及生物有效性。C，光強 40μmol/m2?S，濕度 60%，白天 /黑夜 =12h/12h。 數據分析，論文撰寫。 Haschek, W. M., Bluegreen algae (Microcystis aeruginosa) hepatotoxicosis in dairy cows. Am J Vet Res 1987, 48 (9), 141520. 3. Carmichael, W. W., Cyanobacteria secondary metabolitesThe cyantoxins. J. Appl. Bacteriol. 1992, 72 (6), 445459. 4. WHO, Guidelines for drinkingwater quality, 2nd ed.。 Fujiki, H., Inbitro and invivo effects of protein phosphatase inhibitors, microcystins and nodularin, on mouse skin and fibroblasts. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990, 171 (2),867874. 7. Honkanan, R. E.。 Lagana, A., Mornitoring algal toxins in lake water by liquid chromatography tandem mass spectrometry. Environ. Sci. Technol. 20xx, 40, 29172923. 9. Harada, .。 Carmichael, W. W., Analysis and purification of toxic peptides from cyanobacteria by reversedphase highperformance liquid chromatography. Journal of Chromatography A 1988, 448, 275283. 10. Meriluoto, J.。 并以水華藍藻銅綠微囊藻為研究對象，通過四環(huán)素對銅綠微囊藻的生長抑制、 四環(huán)素 對藻液pH 值的影響、 四環(huán)素 對蛋白質含量的影響，研究四環(huán)素對藍藻的急性毒性。 Degradation 目錄 1. 引言（緒論） .......................................................................................................................... 1 抗生素的污染現狀 ......................................................................................................... 1 四環(huán)素類抗生素的污染現狀 ......................................................................................... 2 四環(huán)素類抗生素的生態(tài)毒性 ......................................................................................... 3 四環(huán)素類抗生素對微生物的生態(tài)毒性 ............................................................... 3 四環(huán)素類抗生素對植物的生態(tài)毒性 ................................................................... 4 四環(huán)素類抗生素對動物的生態(tài)毒性 ................................................................... 4 四環(huán)素的 理化性質和藥理毒理 ..................................................................................... 5 四環(huán)素的理化性質 ............................................................................................... 5 四環(huán)素的藥理毒理 ............................................................................................... 5 藍藻、銅綠微囊藻 ......................................................................................................... 6 藍藻概述 ............................................................................................................... 6 銅綠微囊藻概述 ................................................................................................... 6 藻類水華 ............................................................................................................... 6 微囊藻毒素的污染現狀 ................................................................................................. 7 微囊藻毒素的污染現狀 ....................................................................................... 7 天然及水庫水體的微囊藻毒素污染 ................................................................... 7 飲用 水的微囊藻毒素污染 ................................................................................... 8