【正文】 恒化器連續(xù)培養(yǎng)n 恒化器是一種設(shè)法使培養(yǎng)液流速保持不變，并使微生物始終在低于其最高生長速率條件下進(jìn)行生長繁殖的一種連續(xù)培養(yǎng)裝置。33氧與細(xì)菌生長的關(guān)系34計數(shù)法：直接計數(shù)n 用細(xì)菌計數(shù)板或血球計數(shù)板n 計數(shù)室面積1mm2，高為 。n 需要相對高的細(xì)菌濃度。 其主要成分是核酸和蛋白質(zhì)。 在離體的條件下，能以無生命的化學(xué)大分子狀態(tài)存在，并可形成結(jié)晶，且可在外界長期保存。植物病毒多呈桿狀。溫和噬菌體（temperate phage）：噬菌體感染細(xì)胞后，將其核酸整合（插入）到宿主的核DNA上，并且可以隨宿主DNA的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制，在一般情況下，不引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。n 處于溶源性細(xì)菌細(xì)胞中的噬菌體DNA在一定條件下也可啟動裂解循環(huán)，產(chǎn)生成熟的病毒顆粒。微生物需要哪些營養(yǎng)物質(zhì)？供給營養(yǎng)時應(yīng)注意些什么？為什么？當(dāng)處理某一工業(yè)廢水時，怎樣著手和考慮配給營養(yǎng)？1營養(yǎng)物質(zhì)是如何進(jìn)入細(xì)胞的？2微生物呼吸作用的本質(zhì)是什么？可分為哪幾種類型？各類型有什么特點？第五章？各階段有什么特點？在廢水生物處理中有哪些應(yīng)用？。什么叫噬菌斑？什么是PFU？第二章細(xì)菌有哪些一般結(jié)構(gòu)和特殊結(jié)構(gòu)？它們各有哪些生理功能？敘述革蘭氏染色的機(jī)制和步驟。n 在原噬菌體階段，宿主細(xì)胞正常地生長繁殖，而噬菌體基因組與宿主細(xì)胞染色體同步復(fù)制，并隨細(xì)胞分裂傳遞給子代細(xì)胞。n 裂解量：是每個受染細(xì)胞所產(chǎn)生的子代病毒的平均數(shù)目，即等于穩(wěn)定期病毒效價與潛伏期效價之比。動物病毒多為球狀。 專性活細(xì)胞內(nèi)寄生。 沒有細(xì)胞構(gòu)造，既無產(chǎn)能酶系，也無蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)。缺點: n 不能區(qū)分死菌與活菌。無性孢子與有性孢子無性孢子：厚垣孢子：總狀毛霉n 節(jié)孢子：白地霉n 分生孢子：青霉、曲霉 n 孢囊孢子：根霉、毛霉 n 游動孢子：水霉 有性孢子：n 卵孢子：同絲水霉 n 接合孢子：葡枝根霉n 子囊孢子：子囊菌綱：蟲草、酵母等。產(chǎn)生原因：生長條件的進(jìn)一步惡化，使細(xì)胞內(nèi)的分解代謝大大超過合成代謝，繼而導(dǎo)致菌體的死亡。216。細(xì)菌代謝物積累達(dá)到最高峰。 加大接種量:（群體優(yōu)勢適應(yīng)性增強(qiáng)）216。 菌體粗大216。n 分支代謝途徑中的兩個末端產(chǎn)物，不能直接抑制代謝途徑中的第一個酶，而是分別抑制分支點后的反應(yīng)步驟，造成分支點上中間產(chǎn)物的積累，這種高濃度的中間產(chǎn)物再反饋抑制第一個酶的活性。n 細(xì)菌發(fā)光涉及到兩種特殊成分：熒光色素酶和一種長鏈脂肪族醛。其特點是葡萄糖只經(jīng)4步反應(yīng)即可快速獲得由EMP途徑須經(jīng)10步才能獲得的丙酮酸。n 一般來自動、植物體。Gˉ菌：肽聚糖層薄，交聯(lián)松散，乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮，其脂含量高，乙醇將脂溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁，沙黃復(fù)染后呈紅色。油鏡：用浸沒油取代空氣的作用：介質(zhì)折射率提高，數(shù)值孔徑值和分辨率均得到提高。n 4℃保存。8菌落（colony）：單個（或聚集在一起的一團(tuán)）微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、（lawn）：眾多菌落連成一片9選擇培養(yǎng)(1)選擇培養(yǎng)基：根據(jù)待分離微生物的特點選擇不同培養(yǎng)條件，進(jìn)行直接分離。（4）建立巴氏消毒法。HIV的傳播方式：①通過同性或異性間的性行為；②輸入帶有HIV的血液或血制品、器官或骨髓移植、人工授精、靜脈藥癮者共用污染的注射器及針頭；③母嬰傳播，包括經(jīng)胎盤、產(chǎn)道或經(jīng)哺乳等方式引起的傳播。：在我國流行的是漢灘病毒和漢城病毒，所致疾病是腎綜合征出血熱。（3種顆粒）：大球形顆粒（是有感染性的HBV完整顆粒，也叫Dane顆粒）、小球形顆粒、管形顆粒。（IPV，Salk苗）脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗（OPV，Sabin苗）：皰疹性咽峽炎、手足口病、流行性胸痛、心肌炎和心包炎、眼病。流感病毒抗原變異有兩種形式：抗原漂移和抗原轉(zhuǎn)換。④干擾素具有廣譜抗病毒活性，但只具有抑制病毒作用而無殺滅病毒的作用。能分解尿素，以與假絲酵母菌區(qū)別。葉狀孢子分芽生孢子、厚膜孢子、關(guān)節(jié)孢子3種。密螺旋體抗原試驗：采用Nichols株螺旋體作為抗原，測定患者血清中的螺旋體特異性抗體，特異性強(qiáng)，可用作梅毒證實試驗。但缺乏供代謝所需的能量來源，必須利用宿主細(xì)胞的三磷酸鹽和中間代謝產(chǎn)物作為能量來源。：普氏立克次體－流行性斑疹傷寒（虱傳斑疹傷寒），傳播方式為虱－人－虱。有DNA和RNA兩類核酸。：了解百日咳毒素。、腸炭疽、肺炭疽。：小川型、稻葉型、彥島型。【PPD試驗】－purified protein derivative 純蛋白衍化物。：腸熱癥、胃腸炎（食物中毒）、敗血癥、無癥狀帶菌者。最后，流腦可用抗生素（如青霉素）控制感染，而乙腦因是病毒感染，至今尚無特殊治療法。流腦是腦膜炎雙球菌引起的，是由帶菌者或病人經(jīng)呼吸道飛沫傳染。腸的各段均可受累。導(dǎo)致β溶血的是α溶素。要求掌握破傷風(fēng)痙攣毒素、肉毒毒素、白喉毒素、霍亂腸毒素。溶原性轉(zhuǎn)換－當(dāng)噬菌體感染細(xì)菌時，宿主菌染色體中獲得了噬菌體的DNA片段，使其成為溶原狀態(tài)時而使細(xì)菌獲得新的性狀。關(guān)于噬菌體的知識：①是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒。大腸埃希菌對這四種試驗的結(jié)果是++，產(chǎn)氣腸桿菌則為++。然后用95％乙醇處理，有些細(xì)菌被脫色，有些不能。：吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝成熟與釋放。：①體積最微?。仨氂秒娮语@微鏡放大幾萬至幾十萬倍后方可觀察。，它作用于外周膽堿能神經(jīng)，抑制神經(jīng)肌肉接頭處神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的釋放，導(dǎo)致弛緩性麻痹。致熱外毒素也稱紅疹毒素或猩紅熱毒素，是人類猩紅熱的主要毒性物質(zhì)。α溶血環(huán)中的紅細(xì)胞并未完全溶解。細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)：（掌握各自的概念及功能，一道10分的論述題）微生物學(xué)兩大經(jīng)典染色：（一道5分的簡答題）腸霉菌病。細(xì)菌的細(xì)胞壁：①G+和G細(xì)菌細(xì)胞壁的共有組分為肽聚糖，G+細(xì)菌的肽聚糖由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋三部分組成，G細(xì)菌的肽聚糖由聚糖骨架和四肽側(cè)鏈兩部分組成。防治生物霉腐的方法：1 用物理或化學(xué)的方法殺死物品上的一切微生物，再用物理方法防治微生物再生。PCR擴(kuò)增原理：變性→退火→延伸細(xì)菌質(zhì)粒的特點：1含有復(fù)制起點；2含有多種限制酶的單一識別位點；3含有抗抗生素性標(biāo)記基因；4高拷貝；5具有較小的相對分子質(zhì)量；6可通過轉(zhuǎn)化或電穿孔法極易導(dǎo)入宿主細(xì)胞。溶源轉(zhuǎn)變：原噬菌體引起的溶源細(xì)菌除免疫性以外的表型改變（表面性質(zhì)、致病性）。1細(xì)菌的耐藥機(jī)制*：1細(xì)胞膜透性改變；2藥物作用靶改變；3合成了修飾抗生素的酶；4抗藥菌株發(fā)生遺傳變異，導(dǎo)致合成新的多聚體。連續(xù)培養(yǎng)：在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過一定的方式使微生物能以恒定的生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。穩(wěn)定期：該期的生長菌群總數(shù)處于平坦階段，但細(xì)菌群體活力變化較大。第六章 微生物的生長繁殖及其控制*細(xì)菌生長曲線：以細(xì)菌培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，以細(xì)菌數(shù)目對數(shù)或生長速率為縱坐標(biāo)，由此得到的曲線為生長曲線。壁厚，折光性強(qiáng)（不易著色）； 代謝活性低（酶含量少，抗不良環(huán)境）； 抗熱性強(qiáng)（含吡叮二羧酸鈣）； 耐干燥和化學(xué)藥物； 條件適宜可萌發(fā)；革蘭氏染色的機(jī)制：革蘭陽性細(xì)菌的肽聚糖層較厚，經(jīng)乙醇處理后使之發(fā)生脫水作用而使孔徑縮小，結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物保留在細(xì)胞內(nèi)而不被脫色；而革蘭陰性細(xì)菌的肽聚糖層很薄，脂肪含量高，經(jīng)乙醇處理后部分細(xì)胞壁可能被溶解并改變其組織狀態(tài)，細(xì)胞壁孔徑大，不能阻止溶劑透入，因而將結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物洗去而被脫色。革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁則是多層結(jié)構(gòu)，最外一層是薄薄的肽聚糖層，肽鏈?zhǔn)侵苯咏宦?lián)在一起的。選擇培養(yǎng)：選擇平板培養(yǎng)、富集培養(yǎng)。補(bǔ)充細(xì)菌的生長規(guī)律和各個生長時期的特點水中微生物的來源原核微生物包括（7種）包括古細(xì)菌、真細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、粘細(xì)菌、立克次氏體、支原體、衣原體和螺旋體。水華：藻類（主要是微藻）的大量繁殖使水體出現(xiàn)顏色，并變得渾濁，許多藻類團(tuán)塊漂浮在水面上形成。微生物與基因工程的關(guān)系：1 基因資源：微生物的多樣性，尤其是抗性基因，為基因工程提供了豐富獨特的資源。病毒的殼體結(jié)構(gòu)*：螺旋對稱*P170、二十面體對稱、病毒的復(fù)制周期*：從一個病毒吸附于細(xì)胞開始到子代病毒從受染細(xì)胞釋放的全過程。缺點：雜菌污染和菌種退化?；罹鷶?shù)與培養(yǎng)時間呈反比關(guān)系，此期細(xì)菌變長腫脹或畸形衰變，甚至菌體自溶，難以辯認(rèn)其形。此期曲線平坦穩(wěn)定，因為細(xì)菌繁殖極少。第四章 微生物的營養(yǎng)營養(yǎng)物質(zhì)：能夠滿足微生物機(jī)體生長、繁殖和完成各項生理活動所需的物質(zhì)。原生質(zhì)體：人為溶菌酶除盡壁或青霉屬抑制新壁合成，一般由革蘭氏陽性菌組成。真菌：霉菌（菌體由分枝或不分枝的菌絲構(gòu)成）、酵母菌（一群單細(xì)胞真核微生物）。微生物學(xué)發(fā)展的奠基者及其貢獻(xiàn)法國的巴斯德：1徹底否定了“自生說”；2免疫學(xué)—預(yù)防接種；3證實發(fā)酵是由微生物引起；4創(chuàng)立巴斯德消毒法。第二章 微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)無菌技術(shù)：在分離、轉(zhuǎn)接、及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時防止被其他微生物污染，其自身也不污染操作環(huán)境的技術(shù)。缺點：操作較麻煩，對好氧菌、熱敏感菌效果不好！3平板劃線法 4稀釋搖管法第三章 微生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能原核生物與真核生物的異同點：原核微生物真核微生物細(xì)胞壁除少數(shù)外都有肽聚糖無肽聚糖細(xì)胞膜一般無固醇常有固醇內(nèi)膜簡單，有間體復(fù)雜，有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器只有核糖體有很多種核糖體70S（50S＋30S）80S（60S＋40S）線粒體葉綠體中的 70S細(xì)胞核擬核，無核膜、無核仁，無成有核膜、核仁，有多條染色體，DNA 與形染色體，DNA 不與 RNA 和組RNA 和組蛋白結(jié)合，有有絲分裂蛋白結(jié)合，無有絲分裂大小直徑通常小于 2 微米直徑在 2100 微米之間革蘭氏陰陽性菌的特點：革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁是一層厚而致密的肽聚糖和磷壁酸。實踐意義：原生質(zhì)體或球狀體比正常有細(xì)胞壁的細(xì)菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì)，故是研究遺傳規(guī)律和進(jìn)行原生質(zhì)體融合育種的良好實驗材料。培養(yǎng)基種類、四大微生物的常用培養(yǎng)基……第五章 微生物的代謝發(fā)酵：微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物，同時釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物的過程叫做發(fā)酵。細(xì)菌以穩(wěn)定的幾何級數(shù)極快增長。同步化方法的原理是在使所有細(xì)胞都處于大體相同的分裂周期的時候，才使增殖同時開始進(jìn)行。消毒：利用某種方法殺死或滅活物體中所有病原微生物的一種措施。溶源性感染對細(xì)胞的影響P190免疫性：溶源性細(xì)菌對本身所攜帶的原噬菌體的同源噬菌體有特異性免疫力。4 宿主：微生物細(xì)胞是基因克隆的重要宿主。因此土壤微生物種類多、數(shù)量多、代謝潛力巨大，是主要的微生物源。微生物學(xué)發(fā)展的奠基者及其貢獻(xiàn)法國的巴斯德：1徹底否定了“自生說”；2免疫學(xué)—預(yù)防接種；3證實發(fā)酵是由微生物引起；4創(chuàng)立巴斯德消毒法。真菌：霉菌（菌體由分枝或不分枝的菌絲構(gòu)成）、酵母菌（一群單細(xì)胞真核微生物）。原生質(zhì)體：人為溶菌酶除盡壁或青霉屬抑制新壁合成，一般由革蘭氏陽性菌組成。第四章 微生物的營養(yǎng)營養(yǎng)物質(zhì)：能夠滿足微生物機(jī)體生長、繁殖和完成各項生理活動所需的物質(zhì)。此期曲線平坦穩(wěn)定，因為細(xì)菌繁殖極少?；罹鷶?shù)與培養(yǎng)時間呈反比關(guān)系，此期細(xì)菌變長腫脹或畸形衰變，甚至菌體自溶，難以辯認(rèn)其形。缺點：雜菌污染和菌種退化。病毒的殼體結(jié)構(gòu)*：螺旋對稱*P170、二十面體對稱、病毒的復(fù)制周期*：從一個病毒吸附于細(xì)胞開始到子代病毒從受染細(xì)胞釋放的全過程。微生物與基因工程的關(guān)系：1 基因資源：微生物的多樣性，尤其是抗性基因，為基因工程提供了豐富獨特的資源。水華：藻類（主要是微藻）的大量繁殖使水體出現(xiàn)顏色，并變得渾濁，許多藻類團(tuán)塊漂浮在水面上形成。補(bǔ)充細(xì)菌的生長規(guī)律和各個生長時期的特點水中微生物的來源原核微生物包括（7種）包括古細(xì)菌、真細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、粘細(xì)菌、立克次氏體、支原體、衣原體和螺旋體。脂質(zhì)A是內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要組分。腸白色念珠菌病時在腸粘膜表面還可形成灰白色假膜。這類鏈球菌致病力強(qiáng)。了解破傷風(fēng)痙攣毒素使神經(jīng)系統(tǒng)中毒的主要機(jī)制。：對乙醇、濕熱、紫外線敏感，對干燥抵抗力特別強(qiáng)，對酸或堿有一定的抵抗力。②結(jié)構(gòu)最簡單－無完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，僅有一種核酸（DNA或RNA）作為其遺傳物質(zhì)。－因細(xì)胞條件不合適，病毒雖可進(jìn)入細(xì)胞但不能復(fù)制的感染過程叫頓挫感染。②抗酸染色：分枝桿菌一般用抗酸染色，以5％石炭酸復(fù)紅加溫初染后可以染上，但用3％鹽酸乙醇不易脫色，若再加美蘭復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色，其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)呈藍(lán)色。1菌落：經(jīng)過一定時間的培養(yǎng)后，單個細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)，叫菌落。2細(xì)菌的變異現(xiàn)象：形態(tài)結(jié)構(gòu)的變異、毒力變異、耐藥性變異、菌落變異。2正常菌群的生理學(xué)意義：生物拮抗、營養(yǎng)作用、免疫作用、抗衰老作用。2二重感染的概念：機(jī)體因感染性疾病使用抗生素，特別是長期服用廣譜抗生素后，正常菌群中的敏感菌被抑制或殺死，耐藥菌大量繁殖而致病，這是抗菌藥物治療原感染性疾病或預(yù)防某些微生物感染過程中