【正文】 ；＋ /－表示多數(shù)陽性，少數(shù)陰性。 ?志賀氏菌屬是由四個亞群組成，即 A、 B、 C、 D四個亞群。 第四節(jié) 常見致病菌的測定 ?3)血清學分型和進一步的生化試驗 ? ? 挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗。除宋內氏菌和鮑氏 13型為烏氨酸陽性外，志賀氏菌屬的培養(yǎng)物均為陰性結果。 ? 直到 20世紀中葉，才認識到一些特殊血清型的大腸桿菌對人和動物有致病性，尤其對嬰兒和幼畜（禽），常引起嚴重腹瀉和敗血癥。我國各地發(fā)生的肉毒中毒主要是 A型和 B型菌。革蘭氏陽性球菌，呈葡萄串狀排列，直徑為 ~1μ m，無芽孢、無鞭毛、無莢膜。 1 ℃ ， 2 4 h 3 6 ℃ 177。 1℃ 培養(yǎng) 24h。 生化鑒定 （ 1）鏈激酶試驗（溶纖維蛋白酶試驗） 吸取草酸鉀血漿 ，加 ，混勻，再加入鏈球菌 1824h36177。 ?1． 3 平天。 ?1． 11 蓋玻片。 ?2． 2 孟加拉紅培養(yǎng)基：按 GB 中 規(guī)定。 ?糧食（包括糧庫貯糧，糧店或家庭小量存糧）樣品的采集，可根據(jù)糧囤或糧垛的大小和類型，分層定點取樣，一般可分三層五點，或分層隨機采取不同點的樣品，充分混合后，取 500 g 左右送檢。 第五節(jié) 真菌學檢驗 ?4． 5 按上述操作順序做 10倍遞增稀釋液，再稀釋一次，換用一支 1 mL滅菌吸管，根據(jù)對樣品污染情況的估計，選擇 3 個合適的稀釋度，分別在做 10 倍稀釋的同時，吸取 1 mL 稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做 2 個平皿，然后將涼至 45℃ 左右的培養(yǎng)基注入平皿中，待瓊脂凝固后，倒置于 25～ 28℃溫箱中， 3 d后開始觀察，共培養(yǎng)觀察 5 d。 無菌接種罩。 小刀。制片時最好是在接種罩內操作，以防孢子飛揚。 第五節(jié) 真菌學檢驗 ? 制片：取載玻片加乳酸－苯酚液一滴，用接種針鉤取一小塊霉菌培養(yǎng)物，置乳酸－苯酚液中，用兩支分離針將培養(yǎng)物撕開成小塊，切忌涂抹，以免破壞霉菌結構。 載物玻片。 溫箱。 ?4． 3 用滅菌吸管吸取 1： 10稀釋液 10 mL，注入試管中，另用帶橡皮乳頭的 1 mL滅菌吸管反復吹吸 50 次，使霉菌孢子充分散開。在衛(wèi)生學調查基礎上，采取有代表性的樣品。 ?1． 17 橡皮乳頭。 ?1． 9 酒精燈。 第四節(jié) 常見致病菌的測定 第五節(jié) 真菌學檢驗 ?一、霉菌和酵母計數(shù) ?1 設備和材料 ?1． 1 溫箱： 25～ 28℃ 。周圍有 2mm~4mm界限分明，無色透明的溶血圈。 1℃ 培養(yǎng) 24h。 1 ℃ ， 2 4 h 3 6 ℃ 177。其中金黃色葡萄球菌 (staphy aureus)為致病菌、表皮葡萄球菌偶爾致病（ staphy epidermidis)、 腐生葡萄球菌（ staphy saprophyticus)一般為非致病菌。 肉毒梭菌按其所產毒素的抗原特異性分為 A、 B、 C、 D、 E、 F、 G等七個型。 ?4) 結果報告：綜合生化和血清學的試驗結果判定菌型并作出報告。如果鮑氏多價血清不凝集，可用痢疾志賀氏菌 3～ 12型多價血清及各型因子血清檢查。 第四節(jié) 常見致病菌的測定 ?： ? ； ? 18～ 24h內發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物； ? ； ? ； ? ； ? 。臨床上能引起痢疾癥狀的病原微生物很多，如志賀氏菌屬、沙門氏菌屬、變形桿菌屬、艾希氏菌屬等，還有阿米巴原蟲、鞭毛蟲及病毒等均可引起人類痢疾，其中以志賀氏菌引起的細菌性痢疾最為常見。 第四節(jié) 常見致病菌的測定 腸桿菌科各屬在三糖鐵瓊脂內的反應結果 斜面 底層 產氣 硫化氫 可能的菌屬和種 － ＋ ＋ /－ ＋ 沙門氏菌屬、弗勞地氏檸檬酸 桿菌、變形桿菌屬、緩慢愛德 華氏菌 ＋ ＋ ＋ /－ ＋ 沙門氏菌 Ⅲ 、弗勞地氏檸檬酸 桿菌、普通變形桿菌 － ＋ ＋ － 沙門氏菌屬、大腸埃希氏菌、 蜂窩哈夫尼亞菌、摩根氏菌， 普羅菲登斯菌屬 － ＋ － － 傷寒沙門氏菌，雞沙門氏菌、 志賀氏菌屬、大腸埃希氏菌、 蜂窩哈夫尼亞菌、摩根氏菌， 普羅菲登斯菌屬 ＋ ＋ ＋ /－ － 大腸埃希氏菌、腸桿菌屬、克 雷伯氏菌屬、沙雷氏菌屬、弗 勞地氏檸檬酸桿菌 注：＋陽性；－陰性；＋ /－ 多數(shù)陽性，少數(shù)陰性 第四節(jié) 常見致病菌的測定 腸桿菌科各屬生化反應初步鑒別表 反應序號 硫化氫 （ H2S） 靛基質 氰化鉀 （ KCN） 賴氨酸脫羧酶 判定結果 A1 ＋ － － － ＋ 沙門氏菌屬 A2 ＋ ＋ － － ＋ 沙門氏菌屬（少見）緩慢愛 德華氏菌 A3 ＋ － ＋ ＋ － 弗勞地氏檸檬酸桿菌、奇異 變形桿菌 A4 ＋ ＋ ＋ ＋ － 普通變形桿菌 B1 － － － － － － － － ＋ － 沙門氏菌屬、大腸埃希氏 菌、甲型副傷寒沙門氏菌 大腸埃希氏菌、志賀氏菌屬 B2 － － ＋ ＋ － － － ＋ － 大腸埃希氏菌 大腸埃希氏菌、志賀氏菌屬 B3 － － － － ＋ /－ ＋ ＋ ＋ ＋ － 克雷伯氏菌族各屬陰溝腸桿 菌、弗勞地氏檸檬酸桿菌 B4 － ＋ ＋ /－ ＋ － 摩根氏菌，普羅菲登斯菌屬 注 1：三糖鐵瓊脂底層均產酸，不產氣者可排除；斜面產酸與產氣與否均不限。 1℃培養(yǎng) 18h～ 24h。 1） ℃ 18～ 24 h 挑取可疑菌落 TSI（斜面、底層、產氣、 H2S）、蛋白胨水（靛基質）、尿素（ ）、 KCN、賴氨酸 H2S＋靛基質－ H2S＋靛基質＋ H2S－靛基質－ 非如左述的 尿素－ KCN－賴氨酸＋ 尿素－ KCN－賴氨酸＋ 尿素－ KCN－賴氨酸＋ /－ 各種反應結果 甘露醇、山梨醇 ONPG 沙門氏菌血清學實驗 沙門氏菌血清學實驗 非沙門氏菌 非沙門氏菌 報告 1）前增菌和增菌 凍肉、蛋品、乳品及其他加工食品均應經過前增菌。 ? 污染源主要是人和家畜的糞便，沙門氏菌常存在于動物中，特別是禽類和豬。 第三節(jié) 大腸菌群的測定 第三節(jié) 大腸菌群的測定 ?二、ＬＴＳＥ快速檢驗法 ?１．原理 ? 不同的細菌以不同途徑分解糖類，在其代謝過程中均能產生丙酮 酸及轉變?yōu)楦鞣N酸類，大腸菌群能分解乳糖，由于具有甲酸解氫酶作 用于甲酸，產生氫和二氧化碳氣體，因此氣體的產生是在產酸的同時 進一步分解酸而形成的。 ? d．根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或對檢樣污染情況的估計，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種 3管。 ? 培養(yǎng)基及試劑： ? 乳糖膽鹽發(fā)酵管、乳糖發(fā)酵管、伊紅美藍瓊脂平板（ EMB）、 %滅菌生理鹽水、革蘭氏染色液。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用 10的指數(shù)來表示。 第二節(jié) 菌落總數(shù)的測定 ②稀釋度的選擇 30～ 300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報告之。 1） ℃ ）水浴鍋內保溫 ]注入平皿 15mL20mL，并轉動平皿使混合均勻，同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有 1mL稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內作空白對照。（以乳制品為例） ?1）能引起人類疾病和食物中毒的致病性微生物： ?沙門氏菌、葡萄球菌、鏈球菌、副溶血性弧菌，口蹄疫病毒等。當菌落數(shù)為 107cfu/cm2時表示確已經腐敗，雞肉的細菌數(shù)達 108cfu／ cm2時可有氣味并變粘。食品中細菌數(shù)量越多，說明被污染的程度就越嚴重，越不新鮮，對人體健康威脅越大。 第一節(jié) 概述 ?直接稱取 25g整粒樣品置于帶有 225mL稀釋液和直徑 5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖 50次，振幅要大于40cm。 ③ 車間空氣采樣：將 5個直徑 90mm的普通瓊脂平板分別置于車間的四角和中部，打開平皿蓋 5min，然后蓋蓋送檢 第一節(jié) 概述 （六）采樣標簽的填寫 標簽主要內容： 編號、樣品名稱、生產單位、生產日期、產品批號、產品數(shù)量、存放條件、采樣時間、采樣人姓名，現(xiàn)場情況。 不得加入防腐劑、固定劑等。菌體鏡檢是直接對送檢樣品進行鏡檢；顯微計數(shù)是在顯微鏡下直接計算菌液中微生物數(shù)量的方法，可以直接測定受檢樣品的帶菌量。 ?(1)它是衡量食品衛(wèi)生質量的重要指標之一，也是判定被檢食品能否食用的科學依據(jù)之一。 3. 為新產品、新資源利用、新食品化工產品、新工藝投產前進行衛(wèi)生鑒定。 第一節(jié) 概述 固體樣品采樣方法 ?大塊整體食品用無菌刀具和鑷子從不同的部位割取，并注意其代表性； ?小塊大包裝食品應從不同部位的小塊上切取樣品，放入無菌容器。 第一節(jié)