微生物第七章-1(存儲版)
【正文】 過程和下游技術(shù)（分離工程）； ? 微生物發(fā)酵過程包含同時進(jìn)行的微生物培養(yǎng)過程和微生物反應(yīng)過程； ? 在工業(yè)微生物發(fā)酵過程中，既要控制微生物的生長，又要控制微生物的代謝；通常的微生物培養(yǎng)僅需要控制微生物的生長； ? 控制微生物生長，必需了解微生物的生長規(guī)律，清楚影響生長的主要因素； 11 青霉素 G的發(fā)酵生產(chǎn)工藝 —— 發(fā)酵（反應(yīng)）過程 ? 種子培養(yǎng)：產(chǎn)生健壯和大量的種子； ? 產(chǎn)黃青霉接種到固體培養(yǎng)基上，在 25℃ 下培養(yǎng) 7天，收獲產(chǎn)黃青霉的孢子； ? 將孢子洗脫下來，制備孢子懸液，接種到液體種子培養(yǎng)基中，在 27℃ 下，種子罐通氣攪拌培養(yǎng) 24h； ? 發(fā)酵培養(yǎng)（微生物反應(yīng)）：獲得大量次級代謝產(chǎn)物； ? 將種子培養(yǎng)液接種到發(fā)酵罐中，在 27℃ 下，通氣攪拌培養(yǎng) 7天，期間流加苯乙酸，作為合成青霉素的前體物； 12 種子擴大培養(yǎng)和發(fā)酵的工藝流程和工藝條件 ? 工業(yè)發(fā)酵：通過控制微生物的培養(yǎng)條件，使微生物正常生長，并大量積累目標(biāo)代謝產(chǎn)物； 平面培養(yǎng) 一級種子罐培養(yǎng) 搖管培養(yǎng) 搖瓶培養(yǎng) 二級種子罐培養(yǎng) 發(fā)酵培養(yǎng) 13 生物量測定方法 ? 微生物培養(yǎng)物的定量測定，稱為生物量測定；測定對象不同，方法不同，單位也不同，但可互相校正； ? 顯微鏡直接計數(shù)法：測單細(xì)胞或單孢子； ? 平板菌落計數(shù)法：測單細(xì)胞或單孢子； ? 細(xì)胞濕重和干重法：測定單細(xì)胞或絲狀微生物； ? 分光光度法：測單細(xì)胞或單孢子； ? 生理指標(biāo)法：測定單細(xì)胞或絲狀微生物； 14 顯微鏡直接計數(shù)法 ? 顯微鏡直接計數(shù)法：是在顯微鏡下，用血球計數(shù)板對單細(xì)胞或單孢子直接計數(shù)，單位為：個數(shù) /mL； ? 顯微鏡直接計數(shù)法不能區(qū)分死菌與活菌 ，稱為全菌計數(shù)法； 15 ? 血球計數(shù)板是一塊特殊的載波片，在中間的兩個平臺上各刻有一個大方格網(wǎng)；大方格網(wǎng)由九個大方格組成，中間的正方形大方格為計數(shù)室； ? 計數(shù)室邊長 1mm、 高 ， 體積 （ 104 ml） 血球計數(shù)板的結(jié)構(gòu) 計數(shù)室 平臺 方格網(wǎng) 方格網(wǎng) 16 ? 計數(shù)室被劃分為 25個中方格，每個中方格分為 16個小方格，共 400個小方格；上面蓋上蓋玻片； 血球計數(shù)板的使用方法 ? 濃度約 108個細(xì)胞 /毫升的菌懸液，滴加在蓋玻片與血球計數(shù)板平臺的結(jié)合處，使菌懸液經(jīng)毛細(xì)作用吸入計數(shù)室，靜臵，使細(xì)胞沉底； ?計數(shù)若干小格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，計算每小格平均數(shù)，則： 菌濃（個 /ml）＝ 每格平均數(shù) 400 104 稀釋倍數(shù) 17 ? 將待測菌懸液適當(dāng)稀釋后，涂布在平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后進(jìn)行菌落計數(shù)，一個菌落相當(dāng)于一個活細(xì)胞； ? 平板菌落計數(shù)屬于活菌計數(shù)法，適用于單細(xì)胞或單孢子計數(shù)，單位：菌落形成單位 /mL（ cfu/mL）（ colony forming unit， cfu) 平板菌落計數(shù)法 ?選擇生長 50～ 300個單菌落的平板進(jìn)行計數(shù)，結(jié)果準(zhǔn)確； 18 平板菌落 計數(shù) 方法 ? 10倍稀釋法制備待測菌懸液，選擇適當(dāng)?shù)南♂?
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